Utilisation maternelle d'oxygène pendant l'accouchement et superoxyde dismutase du sang de cordon

Nous avons mené un essai clinique contrôlé randomisé prospectif sur une cohorte de femmes accoucheuses admises au centre de naissance de l'hôpital universitaire George Washington. Cette étude a été approuvée par l'Institutional Review Board de l'Université George Washington et les consentements ont été obtenus de tous les sujets avant l'inscription. Tous les sujets inscrits répondaient aux critères suivants : a) grossesse sans complication, b) âge gestationnel à terme de 37 semaines à 42 semaines, et c) accouchement vaginal spontané normal (NSVD) ou césarienne élective. Les femmes enceintes ont été exclues de cette étude si elles présentaient l'un des éléments suivants : a) hypertension ou éclampsie, b) diabète induit par la grossesse, c) anémie, d) autres complications médicales ou chirurgicales au cours de la grossesse en cours, e) rupture des membranes amniotiques pendant plus de 18 heures, f) antécédents de nourrissons atteints d'infection invasive à streptocoque du groupe B lors de grossesses précédentes, g) détresse fœtale avant l'accouchement et h) suspicion d'anomalies chromosomiques et structurelles ou d'infections congénitales. Nous avons recueilli des données sur l'histoire maternelle (âge, race, parité et type d'anesthésie) et l'histoire de la naissance (mesures anthropométriques, âge gestationnel, sexe et scores d'Apgar).

Randomisation : Une fois inscrits à l'étude, tous les sujets ont été assignés au hasard à l'un des deux groupes en utilisant la technique des enveloppes opaques scellées. Une canule nasale était attachée à tous les sujets et était reliée à un débitmètre recouvert d'une feuille de métal afin que les obstétriciens responsables ne sachent pas à quel groupe appartient le sujet particulier. Les participants du groupe Oxygen ont reçu 100 % d'oxygène à raison de 2 litres/minute en commençant au moins 30 minutes avant l'accouchement. Les participants du groupe témoin avaient leur canule nasale encore attachée à un débitmètre qui était éteint. La canule nasale a été déconnectée des participants après l'accouchement.

Procédure de surveillance : Les femmes enceintes ont été surveillées en continu pour la fréquence cardiaque, la fréquence respiratoire et la saturation en oxygène. Si la saturation en oxygène a diminué < 93 % pendant au moins 60 secondes, et/ou lorsque l'obstétricien l'a jugé nécessaire à tout moment, de l'oxygène thérapeutique a été administré et la participante a été exclue de l'étude.

Enquête de laboratoire : Nous avons obtenu trois échantillons de trois ml de sang total de chaque couple mère-enfant dans les deux groupes. Le premier échantillon de sang a été obtenu à partir de la veine périphérique des participants au moment de l'inscription avant la randomisation (référence). Le deuxième échantillon de sang a été prélevé du côté placentaire du cordon ombilical après l'accouchement. Le troisième échantillon a été obtenu à partir de la veine périphérique des participants dans les 4 heures suivant l'accouchement.

Nous avons mesuré les gaz sanguins dans chaque échantillon au chevet du patient à l'aide d'un analyseur iSTAT (Abbott, IL). Le reste de l'échantillon a été utilisé pour les dosages de SOD. Il a été recueilli dans un tube glacé contenant de l'EDTA et centrifugé à 4 ºC. Le plasma a été jeté et la suspension d'érythrocytes a été lavée avec une solution saline normale et centrifugée à nouveau deux fois. Les suspensions d'érythrocytes lavées ont été conservées à -70 ºC jusqu'au moment du dosage.

La concentration de SOD a été mesurée par une méthode colorimétrique indirecte en utilisant le sel de tétrazolium hautement soluble dans l'eau WST-1, qui produit un colorant formazan soluble dans l'eau lors de la réduction avec un anion superoxyde. Le kit de dosage Cayman Chemical SOD a été utilisé pour la mesure de l'activité SOD dans le lysat d'érythrocytes. L'activité SOD a été évaluée en mesurant la dismutation des radicaux superoxyde générés par l'oxyde de xanthine et l'hypoxanthine dans un format pratique à 96 puits. Cette technique comprenait une norme SOD de qualité contrôlée. La courbe standard, qui a été générée à l'aide de cette enzyme, fournit un moyen de quantifier avec précision l'activité des trois types de SOD (Cu/Zn-, Mn- et Fe-SOD). Concentration en SOD exprimée en UI par gramme d'hémoglobine contenue. Les résultats de la concentration en SOD, du pH, du pCO2, du pO2, du déficit en bases, de la concentration en Ht et Na ont été enregistrés.