Diagnostisen testin tekeminen ei-tuberkuloottiselle mykobakteeri-keuhkoinfektiolle käyttämällä ei-tuberkuloottista mykobakteeriantigeenistimulaatiotestiä: Immuunipohjasta, standardoidusta asennuksesta validointiin

Nontuberculous mycobacteria keuhkoinfektion lisääntyminen Nontuberculous mycobacteria keuhkoinfektiosta (NTM-LD) tulee tärkeä kliininen huolenaihe [1], koska NTM-infektioiden määrä on lisääntynyt viimeisen kymmenen vuoden aikana [2-3]. Taiwanissa tehdyn tutkimuksen mukaan NTM-LD nousi 1,26:sta 7,94:ään 100 000 potilasta kohden vuodessa vuosina 2000–2008 [2]. Tämän kasvun syyt eivät ole helposti selviä, mutta ne voivat liittyä hankitun immuunipuutteisen populaation määrän kasvuun ja mykobakteeriviljelytekniikan kehitykseen [4-7]. Taiwanissa esiintyvistä NTM-infektioista eristettiin yleisimmin Mycobacterium avium -kompleksi (MAC) ja M. abscessus (MAB) [2].

Todellisen NTM-LD:n varhaisen diagnosoinnin ja vahvistamisen vaikeus NTM:ää kuitenkin esiintyy ympäristössä kaikkialla, joten relevanssi (todellinen sairauspotilasluku verrattuna sairastuneiden tai vain kolonisoituneiden potilaiden määrään) on paljon alle 100 % ja vaihteli eri NTM:issä. lajit. Aiemmat tutkimukset ovat esimerkiksi osoittaneet, että M. kansasiin ja MAC:n esiintymisellä oli kliininen merkitys noin 47-70 % ja vastaavasti 35-42 % [8-9]. Mitä tulee MAB:n, joka on nouseva patogeeni maailmanlaajuisesti, sen merkitys on 33 % [9]. Amerikkalaisen rintakehäyhdistyksen nykyaikaisten NTM-ohjeiden mukaan NTM-keuhkoinfektio diagnosoidaan useilla kriteereillä, mukaan lukien hengitysnäytteiden mikrobiologia ja kliiniset löydökset sekä radiografiset löydökset [1]. Mikrobiologisissa kriteereissä tarvitaan kaksi tai useampia positiivisia ysköksen mykobakteeriviljelmiä samalle NTM-lajille vuoden sisällä.

Koska NTM-kolonisaatio ei ole harvinaista hengitysteissä, todellisen keuhkojen NTM-infektion diagnosointi on suuri haaste kliinisessä käytännössä. Itse asiassa mykobakteerien mikrobiologiset testit eivät ole oikea-aikaisia ​​eivätkä tehokkaita. Mykobakteeriviljely on aikaa vievää, ja se kesti viikkoja odottaa tuloksia, vaikka se on nykyinen kulta-standardi mikro-organismien tunnistamisessa [10]. Nukleiinihapon monistusmenetelmä, kuten polymeraasiketjureaktio, ei voinut erottaa todellista NTM-infektiota ja pelkästään kolonisaatiota, koska mikro-organismi on läsnä molemmissa tilanteissa [11].

NTM-infektion varhainen diagnosointi ja hoidon aloittaminen on tärkeää, koska NTM-keuhkoinfektio voi olla nopea tappava infektio tehohoidossa tai potilailla, jotka eivät olleet saaneet varhaista asianmukaista hoitoa [6]. Lisäksi MAC tai MAB, jotka ovat yleisimpiä Taiwanissa, ovat resistenttejä useimmille tuberkuloosin vastaisille hoito-ohjelmille. Siksi on kehitettävä nopeampi ja tarkempi diagnostinen testi [1-2, 6] Synnynnäisen immuniteetin apu NTM-LD:n diagnosoinnissa Kehon tulehdusmerkki, joka edustaa immuunivastettamme, olisi indikaattori todellisen mykobakteeri-keuhkoinfektion erottamisessa kolonisaatiosta. kun taas ensimmäinen mykobakteeriviljelmäsarja kasvatti NTM:ää [12-15]. Sekä interferoni-gamma että tuumorinekroositekijä-alfa ovat tärkeitä tehtäviä suojaavassa immuniteetissa mykobakteeri-infektioita vastaan ​​[16-17]. Nämä vasteet liittyvät Toll-like reseptori 2:n (TLR2) sitoutumiseen, mikä on kriittistä mykobakteeri-infektiolle [18]. TLR-2:n ilmentymistä ei kuitenkaan ole arvioitu potilaiden välillä, joilla on NTM-infektio ja kolonisaatio. Interferoni-gamma-vapautumismäärityksen menestyksen mukaan tuberkuloosin havaitsemiseen [19] ymmärrämme, että spesifinen immuunivaste on hyödyllinen mykobakteeri-infektion diagnosoinnissa. Siksi keskitymme TLR-2:n ja siihen liittyvien alavirran sytokiinien ilmentymiseen potilaillamme, joilla on MAC- tai MAB-keuhkosairaus, joka muodostaa suurimman osan NTM-infektiosta [2].

Suunnittelu tutkimuksessamme diagnoosia varten Jotta voitaisiin tutkia isännän immuunijärjestelmän apua NTM-keuhkoinfektion diagnosoinnissa, vertaamme aluksi TLR-2:n ja alavirran sytokiinien ilmentymistä MAC- tai MAB-infektoituneilla potilailla ja kolonisoiduilla koehenkilöillä. Sitten suoritamme in vitro -stimulaatiotestin käyttämällä mykobakteereja (MAC tai MAB) yhteisviljelyyn potilaiden perifeerisen veren mononukleaarisolujen kanssa. TLR-2:n ilmentyminen ja sytokiinien aktivaatio tutkitaan stimulaatiotestin jälkeen. Analysoimme sitten NTM-LD:n ja kolonisaation välistä ilmentymiseroa.