Stabilire un test diagnostico per l'infezione polmonare da micobatteri non tubercolari utilizzando il test di stimolazione dell'antigene da micobatteri non tubercolari: dalla base immunitaria, configurazione standardizzata alla convalida

L'aumento delle infezioni polmonari da micobatteri non tubercolari L'infezione polmonare da micobatteri non tubercolari (NTM-LD) diventa un'importante preoccupazione clinica [1] perché il tasso di infezione da NTM è aumentato negli ultimi dieci anni [2-3]. Secondo uno studio a Taiwan, NTM-LD è aumentato da 1,26 a 7,94 per 100.000 pazienti ricoverati/anno dal 2000 al 2008 [2]. Le ragioni di questo aumento non sono immediatamente chiare, ma potrebbero essere correlate alla crescita numerica della popolazione immunocompromessa acquisita e ai progressi della tecnica per la coltura di micobatteri [4-7]. Tra le infezioni da NTM a Taiwan, il Mycobacterium avium complex (MAC) e il M. abscessus (MAB) sono stati isolati più frequentemente [2].

La difficoltà nella diagnosi precoce e nella conferma della vera NTM-LD Tuttavia, la NTM esiste nell'ambiente in modo ubiquitario, quindi la rilevanza (vero numero di pazienti con malattia rispetto al numero di pazienti con malattia o solo colonizzazione) è di gran lunga inferiore al 100% e varia in diverse NTM specie. Ad esempio, studi precedenti hanno dimostrato che la presenza di M. kansasii e MAC aveva una rilevanza clinica rispettivamente del 47~70% e del 35~42% [8-9]. Per quanto riguarda il MAB, patogeno emergente a livello mondiale, ha una rilevanza del 33% [9]. Secondo le linee guida NTM contemporanee stabilite dalla società toracica americana, l'infezione polmonare da NTM viene diagnosticata in base a molteplici criteri, tra cui la microbiologia dei campioni respiratori e i risultati clinici, nonché i risultati radiografici [1]. Nei criteri microbiologici, sono necessarie due o più serie di colture micobatteriche dell'espettorato positive per la stessa specie NTM entro un anno.

Poiché la colonizzazione da NTM non è rara nel tratto respiratorio, la diagnosi di una vera infezione polmonare da NTM è una grande sfida nella pratica clinica. In realtà, i test microbiologici per i micobatteri non sono né tempestivi né efficienti. La coltura dei micobatteri richiede molto tempo, il che ha richiesto settimane per attendere i risultati, anche se è l'attuale gold standard per l'identificazione dei microrganismi [10]. Il metodo di amplificazione dell'acido nucleico come la reazione a catena della polimerasi non potrebbe discriminare la vera infezione da NTM e solo la colonizzazione perché il microrganismo è presente in entrambe le situazioni [11].

La diagnosi precoce e quindi l'inizio del trattamento dell'infezione da NTM è importante perché l'infezione polmonare da NTM potrebbe essere un'infezione letale rapida nell'unità di terapia intensiva o in pazienti che non hanno ricevuto un trattamento adeguato precoce [6]. Inoltre, MAC o MAB, che sono più comuni a Taiwan, sono resistenti alla maggior parte dei regimi antitubercolari. Pertanto, dovrebbero essere sviluppati test diagnostici più rapidi e accurati [1-2, 6] L'aiuto dell'immunità innata nella diagnosi di NTM-LD Il marker infiammatorio corporeo, rappresenta la nostra risposta immunitaria, sarebbe un indicatore per differenziare la vera infezione polmonare da micobatteri dalla colonizzazione mentre il primo set di coltura micobatterica ha fatto crescere NTM [12-15]. Sia l'interferone-gamma che il fattore di necrosi tumorale-alfa svolgono un ruolo critico nell'immunità protettiva alle infezioni micobatteriche [16-17]. Queste risposte sono collegate all'impegno del recettore Toll-like 2 (TLR2) che è fondamentale per l'infezione da micobatteri [18]. Tuttavia, l'espressione di TLR-2 non è stata valutata tra pazienti con infezione e colonizzazione da NTM. In base al successo dell'applicazione del test di rilascio dell'interferone-gamma per il rilevamento della tubercolosi [19], comprendiamo che la risposta immunitaria specifica è utile per diagnosticare l'infezione da micobatteri. Ci concentriamo quindi sull'espressione di TLR-2 e delle citochine a valle associate nei nostri pazienti con malattia polmonare MAC o MAB, che rappresenta la maggior parte dell'infezione da NTM [2].

Il design nel nostro studio per la diagnosi Al fine di indagare l'aiuto dell'ospite immune nella diagnosi di infezione polmonare da NTM, confrontiamo inizialmente l'espressione basale di TLR-2 e citochine a valle nei pazienti con infezione da MAC o MAB e nei soggetti colonizzati. Quindi, eseguiamo un test di stimolazione in vitro utilizzando micobatteri (MAC o MAB) per la co-coltura con cellule mononucleari del sangue periferico dei pazienti. L'espressione di TLR-2 e l'attivazione delle citochine saranno esaminate dopo il test di stimolazione. Analizziamo quindi la differenza di espressione tra NTM-LD e colonizzazione.