Upprätta ett diagnostiskt test för lunginfektion av icke-tuberkulösa mykobakterier med hjälp av antigenstimuleringstest för icke-tuberkulösa mykobakterier: från immunbas, standardiserad inställning till validering

Ökningen av icke-tuberkulös mykobakterie-lunginfektion Nontuberkulös mykobakterie-lunginfektion (NTM-LD) blir ett viktigt kliniskt problem [1] eftersom frekvensen av NTM-infektion har ökat under de senaste tio åren [2-3]. Enligt en studie i Taiwan ökade NTM-LD från 1,26 till 7,94 per 100 000 slutenvårdspatienter/år under 2000 till 2008 [2]. Orsakerna till denna ökning är inte lätt klarlagda, men kan vara relaterade till ökningen av antalet förvärvade immunförsvagade populationer och framsteg inom tekniken för mykobakterieodling [4-7]. Bland NTM-infektionen i Taiwan var Mycobacterium avium-komplex (MAC) och M. abscessus (MAB) oftast isolerade [2].

Svårigheten att tidigt diagnostisera och bekräfta äkta NTM-LD Men NTM finns i miljön allestädes närvarande, så relevansen (verkligt antal sjukdomspatienter över antalet patienter med sjukdom eller bara kolonisering) är mycket mindre än 100 % och varierade i olika NTM arter. Till exempel har tidigare studier visat att närvaron av M. kansasii och MAC hade en klinisk relevans kring 47~70% respektive 35~42% [8-9]. När det gäller MAB som är framväxande patogen över hela världen, har en relevans på 33% [9]. Enligt samtida NTM-riktlinjer som fastställts av det amerikanska bröstkorgssamhället, diagnostiseras NTM-lunginfektion genom flera kriterier inklusive mikrobiologi av andningsprover och kliniska fynd såväl som röntgenfynd [1]. I mikrobiologiska kriterier behövs två eller flera uppsättningar av positiv sputummykobakteriekultur för samma NTM-art inom ett år.

Eftersom NTM-kolonisering inte är ovanlig i luftvägarna, är diagnos av sann lung NTM-infektion en stor utmaning i klinisk praxis. Egentligen är mikrobiologiska tester för mykobakterier varken aktuella eller effektiva. Mykobakterieodling är tidskrävande, vilket behövde veckor för att vänta på resultaten även om det är den nuvarande guldstandarden för identifiering av mikroorganismer [10]. Nukleinsyraamplifieringsmetoden såsom polymeraskedjereaktion kunde inte särskilja sann NTM-infektion och enbart kolonisering eftersom mikroorganismen är närvarande i båda situationerna [11].

Att tidigt diagnostisera och sedan påbörja behandling av NTM-infektion är viktigt eftersom NTM-lunginfektion kan vara en snabb dödlig infektion på intensivvårdsavdelning eller hos patienter som inte fått tidig korrekt behandling [6]. Dessutom är MAC eller MAB som är vanligast i Taiwan resistenta mot de flesta anti-tuberkulosregimer. Därför bör ett snabbare och mer exakt diagnostiskt test utvecklas [1-2, 6] Hjälpen från medfödd immunitet för att diagnostisera NTM-LD. Den inflammatoriska markören i kroppen, representerar vårt immunsvar, skulle vara en indikator för att skilja sann mykobakteriell lunginfektion från kolonisering medan den första uppsättningen av mykobakteriekultur växte NTM [12-15]. Både interferon-gamma och tumörnekrosfaktor-alfa spelar avgörande roller i skyddande immunitet mot mykobakteriella infektioner [16-17]. Dessa svar är kopplade till engagemang av Toll-like receptor 2 (TLR2) som är avgörande för mykobakteriell infektion [18]. TLR-2-uttrycket har dock inte utvärderats mellan patienter med NTM-infektion och kolonisering. Enligt framgången med tillämpningen av interferon-gamma-frisättningsanalys för tuberkulosdetektering [19], förstår vi att det specifika immunsvaret är användbart för att diagnostisera mykobakteriell infektion. Vi fokuserar därför på uttrycket av TLR-2 och associerade nedströms cytokiner hos våra patienter med MAC eller MAB lungsjukdom, som står för det mesta av NTM-infektion [2].

Designen i vår studie för diagnos För att undersöka hjälpen av värdimmun för att diagnostisera NTM-lunginfektion, jämför vi initialt baslinjeuttrycket av TLR-2 och nedströms cytokiner i MAC- eller MAB-infekterade patienter och koloniserade försökspersoner. Sedan utför vi ett in vitro-stimuleringstest med mykobakterier (MAC eller MAB) för samodling med perifera mononukleära blodceller från patienter. TLR-2-uttrycket och cytokinaktiveringen kommer att undersökas efter stimuleringstestet. Vi analyserar sedan uttrycksskillnaden mellan NTM-LD och kolonisering.