Kalydecon vaikutukset ylähengitysteiden ja sivuonteloiden tulehdukseen nenähuuhtelun avulla mitattuna ja oireisiin (KPNSI)

Potilaiden ilmoittautuminen Tähän pitkittäiseen tutkimukseen Jenan (Saksa) ja Innsbruckin (Itävalta) yliopistojen CF-keskuksiin sisällytettiin 10 CF-potilasta, joilla oli G551D-mutaatio ja jotka saivat äskettäin ivakaftoria 150 mg bid, kuten hyväksytty (1). Sisällyttämiskriteerit olivat: CF-potilaiden ikä ≥ 6 vuotta, ja diagnoosi vahvistettiin kahdella positiivisella hikoilutestillä ja/tai kahden sairauden aiheuttavan CFTR-mutaatiolla; yksi niistä on G551D. Potilaiden oli noudatettava tiukasti SOP-ohjeissa määriteltyjä menettelyjä, ja he ja/tai heidän vanhempansa antoivat tietoisen kirjallisen suostumuksen ennen ilmoittautumista. Poissulkemiskriteerit olivat: kyvyttömyys suorittaa NL:ää standardoidulla tavalla alla kuvatulla tavalla, ivakaftorin vasta-aihe, raskaus tai imetys ja osallistuminen toiseen kliiniseen tutkimukseen 30 päivän sisällä ennen tutkimuslääkkeen antamista. Nenähuuhtelupotilaat koulutettiin perusteellisesti suorittamaan NL standardoiduissa kotioloissa (kuvat 1A–C) käyttämällä ohjevideota Journal of Immunological Methods 2014 -julkaisussamme (14) ja kuvitettua SOP-lomaketta. Yhdistetty natiivi NLF siirrettiin hävitettyihin reaktioputkiin, jotka sisälsivät 15 µl proteaasi-inhibiittoria (kuvat 1D, E), ja säilytettiin 30 minuutin sisällä näytteenoton jälkeen pakastimessa alle -18 °C:ssa, kunnes se siirrettiin jäillä keskuksiin. Tässä pulloja säilytettiin suoraan -80 °C:ssa laboratorioanalyysien suorittamiseen asti. Ennen ivakaftorihoidon aloittamista NL kerättiin vähintään kerran viikossa (keskiarvo: 5,5 ± 3,9 näytettä/potilas) keskimäärin 30,3 ± 19,7 päivän ajan. Ensimmäisen hoitokuukauden aikana (päivät 0-30) NL kerättiin joka toinen päivä ja kerran viikossa toisesta kuukaudesta eteenpäin (keskiarvo: 25,9 ± 4,1 näytettä/potilas). Seuranta-aika ivakaftorin aloittamisen jälkeen: 2,3-16,1 kuukautta (mediaani: 5,7 kuukautta). Tulehdusvälittäjien arviointi IL-1b-, IL-6- ja IL-8-pitoisuudet mitattiin laimentamattomasta NL-nesteestä käyttämällä Milliplex® MAP Kits -pakkauksia (Human High Sensitivity HS TCMAG-28K, Merck Millipore; Darmstadt, Saksa) ja Bio-Plexiä. ® 200 -järjestelmä (Bio-Rad; Hercules, Kalifornia, USA) valmistajan ohjeiden mukaan. Neutrofiilien elastaasin (NE) mittaukset suoritettiin käyttämällä Human PMN Elastase ELISA:ta (DEH3311, Demeditec Diagnostics GmbH; Kiel, Saksa) ja luettiin FLUOstar Galaxy -spektrometrillä (BMG LABTECH GmbH; Offenburg, Saksa). Kuten valmistaja on määrittänyt, alemmat havaitsemisrajat olivat 0,12 pg/ml (IL-1b), 0,13 pg/ml (IL-6), 0,12 pg/ml (IL-8) ja 0,2 ng/ml (NE). Tilastolliset analyysit Kuvaavia tilastoja käytettiin kuvaamaan tutkimuspopulaation kliinisiä ominaisuuksia. Lineaarisia sekavaikutusmalleja suoritettiin tulehdusmarkkerien yleisten suuntausten analysoimiseksi. Tulehdusmarkkeriarvojen poikkeamien aiheuttamien vaikutusten tasoittamiseksi kunkin potilaan kumulatiivisten ajanjaksojen yksilölliset muutokset määritettiin laskemalla mediaanit ajanjaksoille ennen hoidon aloittamista ja sen jälkeen (ts. koskien 4, 8 ja 12 viikon ajanjaksoja hoidon aikana, kuten kuvassa 2). Tuloksena saatuja yksittäisten potilaiden mediaaneja käytettiin koko kohortin mediaanien ja kvartiilien välisten (IQR) laskemiseen edellä mainittujen ajanjaksojen lopussa. Wilcoxon signedrank -testiä (kaksipyrstöä) käytettiin määrittämään muutoksia edellä mainituissa tulehdusvälittäjissä, hikitestissä, FEV1:ssä ja niiden tilastollisessa merkityksessä (käyttämällä p<0,05) uuden hoidon aikana. Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin IBM SPSS 19:llä (SPSS Inc., Chicago, IL, USA); hahmot luotiin GraphPad Prism -sovelluksella (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA, USA).