A Kalydeco hatása a felső légúti és az orrmelléküreg-gyulladásra orrmosással mérve és a tünetekre (KPNSI)

Betegek felvétele Ebben a longitudinális vizsgálatban 10, G551D mutációval rendelkező CF-beteget, akik újonnan kaptak napi kétszer 150 mg ivakaftort a jóváhagyás szerint (1), a jénai (Németország) és az Innsbrucki (Ausztria) Egyetem CF-központjaiba vontak be. A felvételi kritériumok a következők voltak: CF-betegek életkora ≥ 6 év, a diagnózist két pozitív verejtékteszt és/vagy két betegséget okozó CFTR mutáció kimutatta; az egyik a G551D. A betegeknek szigorúan be kellett tartaniuk az SOP-ban meghatározott eljárásokat, és ők és/vagy szüleik tájékozottan írásban hozzájárultak a felvételükhöz. A kizárási kritériumok a következők voltak: képtelenség az alábbiakban leírt módon standardizált módon végrehajtani az NL-t, az ivakaftor ellenjavallata, terhesség vagy szoptatás, valamint egy másik klinikai vizsgálatban való részvétel a vizsgált gyógyszer beadását megelőző 30 napon belül. Az orröblítéssel járó betegeket alaposan kiképezték arra, hogy standardizált otthoni körülmények között végezzék el az NL-t (1A–C. ábra), a Journal of Immunological Methods 2014-ben (14) publikált oktatóvideó és egy illusztrált SOP-lap segítségével. Az egyesített natív NLF-et 15 μl proteázgátlót tartalmazó, eldobott reakciócsövekbe helyeztük (1D, E ábra), és a mintavétel után 30 percen belül -18 °C alatti fagyasztóban tároltuk, amíg jégen át nem vittük a központokba. Itt a fiolákat közvetlenül -80 °C-on tároltuk a laboratóriumi elemzések elvégzéséig. Az ivakaftor-terápia megkezdése előtt az NL-t legalább hetente egyszer gyűjtötték (átlag: 5,5 ± 3,9 minta/beteg), átlagosan 30,3 ± 19,7 napon keresztül. A terápia első hónapjában (0-30. nap) az NL-t minden második napon, majd a második hónaptól hetente egyszer gyűjtöttük (átlag: 25,9 ± 4,1 minta/beteg). Az ivakaftor-kezelés megkezdése utáni követési tartomány: 2,3-16,1 hónap (medián: 5,7 hónap). A gyulladásos mediátorok értékelése Az IL-1b, IL-6 és IL-8 koncentrációját hígítatlan NL-folyadékban mértük Milliplex® MAP Kits (Human High Sensitivity HS TCMAG-28K, Merck Millipore; Darmstadt, Németország) és egy Bio-Plex segítségével. ® 200 rendszer (Bio-Rad; Hercules, California, USA) a gyártó utasításai szerint. A neutrofil elasztáz (NE) mérését Humán PMN Elastase ELISA (DEH3311, Demeditec Diagnostics GmbH; Kiel, Németország) segítségével végeztük, és FLUOstar Galaxy spektrométerrel (BMG LABTECH GmbH; Offenburg, Németország) olvastuk le. A gyártó előírásai szerint az alsó kimutatási határok 0,12 pg/ml (IL-1b), 0,13 pg/ml (IL-6), 0,12 pg/ml (IL-8) és 0,2 ng/ml (NE) voltak. Statisztikai elemzések Leíró statisztikákat használtunk a vizsgálati populáció klinikai jellemzőinek leírására. Lineáris vegyes hatású modelleket hajtottunk végre a gyulladásos markerek általános tendenciáinak elemzésére. A gyulladásos markerértékek kiugró értékei által okozott hatások kiegyenlítése érdekében az egyes betegeknél a kumulatív periódusok egyéni változásait a kezelés megkezdése előtti és utáni időszak mediánjainak kiszámításával határoztuk meg (pl. a kezelés alatti 4, 8 és 12 hetes periódusokra vonatkozóan, amint az a 2. ábrán látható). Az így kapott egyéni betegek mediánját a teljes kohorsz mediánjának és interkvartilis tartományának (IQR) kiszámításához használtuk a fent említett időszakok végén. Wilcoxon signedrank tesztet (kétfarkú) alkalmaztunk a fent említett gyulladásos mediátorok változásának, verejtékteszt, FEV1 és statisztikai szignifikancia meghatározására (p<0,05 alkalmazásával) az új terápia során. Minden statisztikai elemzést IBM SPSS 19-cel (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) végeztünk; Az ábrák a GraphPad Prism (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA, USA) segítségével készültek.