EGFRvIII CAR T-solut äskettäin diagnosoituun WHO:n asteen IV pahanlaatuiseen glioomaan (ExCeL)

Huomaa, että ilmoittautuminen tähän tutkimukseen päättyi ennenaikaisesti apuraharahoituksen päättymisen vuoksi.

Suostumuksen jälkeen koehenkilöt rekisteröitiin annoskorotusryhmiin. Potilaille tehdään leukafereesi perifeerisen veren mononukleaaristen solujen (PBMC) keräämiseksi EGFRvIII CAR T-solujen muodostamiseksi ennen RT:n ja samanaikaisen TMZ:n aloittamista. T-solut eristettiin potilaan PBMC:istä ja transdusoitiin CAR:n ilmentämiseksi. Lyhyesti sanottuna, PBMC:itä stimuloitiin Muromonab-klusterilla differentiaatio 3 (CD3) (OKT3), monoklonaalisella anti-CD3-vasta-aineella (mAb) ja transdusoitiin RetroNectin®-päällystetyillä levyillä. Transdusoituja soluja kasvatettiin interleukiini-2:ssa (IL-2) 14 päivän ajan.

Tämän jälkeen potilaat suorittivat normaalihoidon RT:n ja samanaikaisen TMZ:n. Potilaat, jotka säilyivät kelvollisina normaalin hoitosäteilyn ja TMZ:n jälkeen, saivat jopa 3 TMZ-sykliä annoksella 50-100 mg/m^2/vrk 21 päivän ajan 28 päivän sykleissä, mikä on tavanomainen annostehostettu (DI) TMZ-hoito-ohjelma. Jos CAR-spesifiset T-solut eivät täyttäneet vapautumiskriteerejä, potilas otettiin pois ennen CAR-hoitoa ja korvattiin.

Ainakin 48 tuntia viimeisen DI TMZ -annoksen jälkeen EGFRvIII CAR T-solujen kokonaisannos annettiin suonensisäisesti. Jos CAR-spesifisiä T-soluja ei voitu tuottaa riittävästi vastaamaan tavoiteltua osoitettua annosta tutkimuksen annoksen korotusosassa, potilasta on hoidettu pienemmällä ennalta määritetyllä annostasolla käyttämällä saatavilla olevia CAR-spesifisiä T-soluja ja korvattu. määrätyssä suuremmassa annoksessa. Annettu annos olisi ollut korkein määritetty annostaso, jolle on saatavilla riittävästi CAR-spesifisiä T-soluja. Jos laajennetun kohortin sisällä ei voitaisi tuottaa riittävästi CAR-spesifisiä T-soluja MTD-annoksen täyttämiseksi, kaikkia saatavilla olevia T-soluja annettaisiin.

EGFRvIII CAR-infuusion jälkeen otettiin verinäytteitä immuunijärjestelmän seurantaa varten 1, 5 ja 10 päivää infuusion jälkeen, sitten 1, 3 ja 6 kuukautta, sitten vuosittain, kunnes eteneminen (tai kuolema tai kosketus katkesi). Immuunijärjestelmän seurantakäynnit 3 kuukauden, 6 kuukauden ja vuoden välein osuivat samaan aikaan SOC-klinikkakäyntien kanssa. Veri otettiin myös replikaatiopätevän retroviruksen (RCR) polymeraasiketjureaktion (PCR) selvittämiseksi Food and Drug Administrationin (FDA) mukaan 3, 6 ja 12 kuukauden iässä SOC-klinikkakäyntien aikana. Lopuksi otettiin verta sytokiinin vapautumisoireyhtymän (CRS) arvioimiseksi ennen soluinfuusiota, 1 ja 4 tuntia infuusion jälkeen ja päivinä 1, 2, 5, 10 ja yhden kuukauden kuluttua. CRS:n mittauksiin sisältyivät IL-2, IL-6, tuumorinekroositekijä alfa (TNFa), interferoni (IFN) gamma, granulosyytti-makrofagipesäkkeitä stimuloiva tekijä (GM-CSF) ja C-reaktiivinen proteiini (CRP).

Potilaat palasivat klinikalle kuukausi EGFRvIII CAR T-soluinfuusion jälkeen arvioidakseen SOC 5 päivän TMZ-syklit annoksella 150-200 mg/m^2/vrk ensimmäisen 5 päivän syklin ajan, minkä jälkeen 200 mg/m^ 2/päivä 5 päivän ajan 28 päivän välein hoitavan onkologin mukaan. Tämä johti >30 päivän viiveeseen viimeisen DI TMZ -syklin ja ensimmäisen 5 päivän TMZ-syklin välillä.

Kasvaimen eteneminen dokumentoitiin histologisesti, ellei kliinisiä vasta-aiheita ollut, jotta voidaan sulkea pois tulehdusvasteet, jotka ilmenevät radiografisina tai kliinisinä muutoksina, jotka voisivat viitata mahdollisesti toksisiin tai terapeuttisiin vasteisiin eivätkä kasvaimen etenemiseen. Jos kudosta saatiin Duke Brain Tumor Center Biorepositoryn kautta, sitä käytettiin vahvistamaan kasvaimen eteneminen histologisesti ja arvioimaan immunologista solujen infiltraatiota ja EGFRvIII-antigeenin karkaamista kasvainkohdassa. Potilaat olisivat kelvollisia lisäadjuvanttihoitoon kasvaimen etenemisen aikana.

Klassinen "3+3"-tutkimussuunnitelma suunniteltiin arvioimaan MTD:tä CAR-spesifiselle T-soluhoidolle potilailla, joilla on äskettäin diagnosoitu GBM. Neljä annostasoa oli otettava huomioon: #1: 4,5 x 10^6/kg, #2: 1,5 x 10^7/kg, #3: 4,5 x 10^7/kg ja #4: 1,5 x 10^8 /kg. Alkaen alimmasta annostasosta, kullakin annostasolla kerryttäisiin 3-6 kohteen kohortteja. Jos potilas oli menetetty seurantaan ensimmäisten 4 viikon aikana CAR-hoidon jälkeen ilman annosta rajoittavaa toksisuutta (DLT), potilasta ei pidetty arvioitavana DLT:n määrittämiseksi ja hänet korvattiin. MTD:n katsottiin olevan korkein annostaso, jolla ≤1 potilaasta 6:sta koki DLT:n 4 viikon havaintojakson aikana CAR-hoidon jälkeen. Ensimmäiselle annostasolle otettiin vain 3 potilaskohortti apuraharahoituksen päättymisen vuoksi.

EGFRvIII CAR T-solujen MTD:ssä suunniteltiin laajennettu 12 potilaan kohortti, jotta saataisiin tarkempi arvio ei-hyväksyttävän toksisuuden todennäköisyydestä. Tässä kohortissa solut radioleimataan 111In:llä niiden jakautumisen seuraamiseksi. Lyhyesti sanottuna CAR:t olisi laskettu ja suspendoitu uudelleen fosfaattipuskuroituun suolaliuokseen (PBS). 4-6x10^8 solua leimattaisiin yhteensä 500 mikroCi:llä 111In. Solut pestiin ja sekoitettiin kylmien CAR:ien kanssa halutun soluannoksen saavuttamiseksi. Merkityt CAR:t infusoidaan potilaaseen suonensisäisen katetrin kautta ambulatorisen luuytimen siirtoyksikön (BMT) sisällä. 111In-leimattujen EGFRvIII CAR:ien jakautuminen arvioitaisiin 1, 2 ja 3 päivää infuusion jälkeen käyttämällä tuikekuvaa. Laajennetussa kohortissa ei ilmoittautunut apuraharahoituksen päättymisen vuoksi.