Células CAR T EGFRvIII para el glioma maligno de grado IV de la OMS recién diagnosticado (ExCeL)

Tenga en cuenta que la inscripción en este estudio finalizó antes de tiempo debido al final de la subvención.

Tras el consentimiento, los sujetos se inscribieron en cohortes de aumento de dosis. Los pacientes se someterán a leucaféresis para recolectar células mononucleares de sangre periférica (PBMC) para la generación de células T CAR EGFRvIII antes de comenzar la RT y TMZ concurrente. Las células T se aislaron de las PBMC del paciente y se transdujeron para expresar CAR. Brevemente, las PBMC se estimularon con grupo de diferenciación 3 (CD3) (OKT3) de Muromonab, un anticuerpo monoclonal (mAb) anti-CD3, y se transdujeron en placas recubiertas con RetroNectin®. Las células transducidas se expandieron en interleucina-2 (IL-2) durante 14 días.

Luego, los pacientes completaron RT estándar de atención y TMZ concurrente. Los pacientes que seguían siendo elegibles después de la radiación de atención estándar y TMZ recibieron hasta 3 ciclos de TMZ a 50-100 mg/m^2/día durante 21 días de ciclos de 28 días, que es el régimen estándar de TMZ con dosis intensificada (DI). Si las células T específicas para CAR no cumplían con los criterios de liberación, se retiraba al paciente antes del tratamiento con CAR y se reemplazaba.

Al menos 48 horas después de la última dosis de DI TMZ, la dosis total de células T CAR EGFRvIII se administró por vía intravenosa. Si no se pudieron generar suficientes células T específicas para CAR para cumplir con la dosis asignada asignada dentro de la parte de escalada de dosis del estudio, se trató al paciente con un nivel de dosis predefinido más bajo utilizando células T específicas para CAR disponibles y se reemplazó en la dosis más alta asignada. La dosis administrada habría sido el nivel de dosis definido más alto para el que hay suficientes células T específicas de CAR disponibles. Dentro de la cohorte ampliada, si no se pudieran generar suficientes células T específicas para CAR para cumplir con la dosis de MTD, se administrarían todas las células T disponibles.

Después de la infusión de CAR de EGFRvIII, se extrajeron muestras de sangre para el control inmunitario 1, 5 y 10 días después de la infusión, luego 1, 3 y 6 meses, luego anualmente hasta la progresión (o muerte o pérdida de contacto). Las visitas de seguimiento para el control inmunológico a los 3 meses, 6 meses y anualmente coincidieron con las visitas a la clínica SOC. También se extrajo sangre para la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) del retrovirus competente en replicación (RCR) según la Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) a los 3, 6 y 12 meses durante las visitas a la clínica SOC. Por último, se extrajo sangre para evaluar el síndrome de liberación de citoquinas (CRS) antes de la infusión de células, 1 y 4 horas después de la infusión, y los días 1, 2, 5, 10 y al mes. Las mediciones para CRS incluyeron IL-2, IL-6, factor de necrosis tumoral alfa (TNFα), interferón (IFN) gamma, factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF) y proteína C reactiva (CRP).

Los pacientes regresaron a la clínica un mes después de la infusión de células T CAR EGFRvIII para ser evaluados para ciclos de SOC TMZ de 5 días a 150-200 mg/m^2/día durante el primer ciclo de 5 días, seguido de 200 mg/m^ 2/día durante 5 días cada 28 días según el oncólogo tratante. Esto resultó en un retraso de más de 30 días entre el último ciclo de DI TMZ y el primer ciclo de 5 días de TMZ.

La progresión del tumor se documentó histológicamente, a menos que hubiera contraindicaciones clínicas, para excluir respuestas inflamatorias que se presentaran como cambios radiográficos o clínicos, lo que podría indicar respuestas potencialmente tóxicas o terapéuticas y no progresión del tumor. Si el tejido se obtuvo a través del Biorrepositorio del Centro de Tumores Cerebrales de Duke, se usó para confirmar la progresión del tumor histológicamente y para evaluar la infiltración de células inmunológicas y el escape del antígeno EGFRvIII en el sitio del tumor. Los pacientes serían elegibles para terapia adyuvante adicional en el momento de la progresión del tumor.

Se planeó un diseño de estudio clásico "3+3" para estimar la MTD para el tratamiento de células T específicas de CAR entre pacientes con GBM recién diagnosticado. Se consideraron cuatro niveles de dosis: #1: 4.5 x 10^6/kg, #2: 1.5 x 10^7/kg, #3: 4.5 x 10^7/kg y #4: 1.5 x 10^8 /kg. Comenzando con el nivel de dosis más bajo, se acumularían cohortes de 3 a 6 sujetos en cada nivel de dosis. Si un paciente se perdió durante el seguimiento durante las primeras 4 semanas después del tratamiento con CAR sin experimentar una toxicidad limitante de la dosis (DLT), entonces el paciente no se consideró evaluable para la determinación de DLT y sería reemplazado. Se consideró que la MTD era el nivel de dosis más alto en el que ≤1 de 6 pacientes experimentaron DLT durante el período de observación de 4 semanas después del tratamiento con CAR. Solo se inscribió una cohorte de 3 pacientes en el primer nivel de dosis debido a que finalizó la financiación de la subvención.

Se planeó una cohorte ampliada de 12 pacientes en el MTD de células T CAR EGFRvIII, para obtener una estimación más precisa de la probabilidad de toxicidad inaceptable. Esta cohorte tendría las células radiomarcadas con 111In para rastrear su distribución. Brevemente, los CAR se habrían contado y resuspendido en solución salina tamponada con fosfato (PBS). Se etiquetarían 4-6x10^8 celdas con un total de 500 microCi de 111In. Las células se lavarían y se mezclarían con CAR fríos para lograr la dosis celular deseada. Los CAR etiquetados se infundirían al paciente a través de un catéter intravenoso dentro de la Unidad de Trasplante Ambulatorio de Médula Ósea (BMT). La distribución de los CAR EGFRvIII marcados con 111In se evaluaría 1, 2 y 3 días después de la infusión mediante gammagrafía. No hubo inscripción en la cohorte ampliada debido a que finalizó la financiación de la subvención.