Cellules T EGFRvIII CAR pour le gliome malin de grade IV de l'OMS nouvellement diagnostiqué (ExCeL)

Veuillez noter que l'inscription à cette étude s'est terminée prématurément en raison de la fin du financement de la subvention.

Après consentement, les sujets ont été inscrits dans des cohortes d'escalade de dose. Les patients subiront une leucaphérèse pour récolter des cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC) pour la génération de cellules CAR T EGFRvIII avant de commencer la RT et le TMZ simultané. Les lymphocytes T ont été isolés des PBMC du patient et transduits pour exprimer le CAR. En bref, les PBMC ont été stimulés avec Muromonab-cluster of differentiation 3 (CD3) (OKT3), un anticorps monoclonal anti-CD3 (mAb), et transduits sur des plaques recouvertes de RetroNectin®. Les cellules transduites ont été développées dans l'interleukine-2 (IL-2) pendant 14 jours.

Les patients ont ensuite suivi la norme de soins RT et le TMZ simultané. Les patients qui sont restés éligibles après la radiothérapie standard et le TMZ ont reçu jusqu'à 3 cycles de TMZ à 50-100 mg/m^2/jour pendant 21 jours de cycles de 28 jours, ce qui correspond au régime standard de TMZ à dose intensifiée (DI). Si les lymphocytes T spécifiques au CAR ne répondaient pas aux critères de libération, le patient était retiré avant le traitement CAR et remplacé.

Au moins 48 heures après la dernière dose de DI TMZ, la dose totale de cellules CAR T EGFRvIII a été administrée par voie intraveineuse. Si suffisamment de lymphocytes T spécifiques au CAR n'ont pas pu être générés pour atteindre la dose ciblée assignée dans la partie d'escalade de dose de l'étude, le patient a été traité à un niveau de dose prédéfini inférieur en utilisant des lymphocytes T spécifiques au CAR disponibles et remplacés à la dose la plus élevée assignée. La dose administrée aurait été le niveau de dose défini le plus élevé pour lequel il existe suffisamment de lymphocytes T spécifiques au CAR disponibles. Au sein de la cohorte élargie, si suffisamment de lymphocytes T spécifiques au CAR ne pouvaient pas être générés pour répondre à la dose MTD, tous les lymphocytes T disponibles seraient administrés.

Suite à la perfusion des CAR EGFRvIII, des échantillons de sang pour le suivi immunitaire ont été prélevés 1, 5 et 10 jours après la perfusion, puis 1, 3 et 6 mois, puis annuellement jusqu'à progression (ou décès ou perte de contact). Les visites de retour pour la surveillance immunitaire à 3 mois, 6 mois et annuellement coïncidaient avec les visites à la clinique SOC. Du sang a également été prélevé pour la réaction en chaîne par polymérase (PCR) du rétrovirus compétent pour la réplication (RCR) par la Food and Drug Administration (FDA) à 3, 6 et 12 mois lors des visites à la clinique SOC. Enfin, du sang pour l'évaluation du syndrome de libération de cytokines (CRS) a été prélevé avant la perfusion cellulaire, 1 et 4 heures après la perfusion, et les jours 1, 2, 5, 10 et à un mois. Les mesures du SRC comprenaient l'IL-2, l'IL-6, le facteur de nécrose tumorale alpha (TNFα), l'interféron (IFN) gamma, le facteur de stimulation des colonies de granulocytes-macrophages (GM-CSF) et la protéine C-réactive (CRP).

Les patients sont retournés à la clinique un mois après la perfusion de cellules T EGFRvIII CAR pour être évalués pour des cycles de SOC 5 jours TMZ à 150-200 mg/m^2/jour pour le premier cycle de 5 jours, suivi de 200 mg/m^ 2/jour pendant 5 jours tous les 28 jours par l'oncologue traitant. Cela a entraîné un délai > 30 jours entre le dernier cycle de DI TMZ et le premier cycle de 5 jours TMZ.

La progression tumorale a été documentée histologiquement, sauf en cas de contre-indications cliniques, pour exclure les réponses inflammatoires se présentant comme des modifications radiographiques ou cliniques, qui pourraient indiquer une réponse potentiellement toxique ou thérapeutique et non une progression tumorale. Si le tissu a été obtenu par le Duke Brain Tumor Center Biorepository, il a été utilisé pour confirmer histologiquement la progression de la tumeur et pour évaluer l'infiltration des cellules immunologiques et l'échappement de l'antigène EGFRvIII au site de la tumeur. Les patients seraient éligibles à un traitement adjuvant supplémentaire au moment de la progression tumorale.

Une conception d'étude classique "3 + 3" a été prévue pour estimer le MTD pour le traitement des lymphocytes T spécifiques au CAR chez les patients atteints de GBM nouvellement diagnostiqué. Quatre niveaux de dose étaient à considérer : #1 : 4,5 x 10^6/kg, #2 : 1,5 x 10^7/kg, #3 : 4,5 x 10^7/kg et #4 : 1,5 x 10^8 /kg. En commençant par le niveau de dose le plus faible, des cohortes de 3 à 6 sujets seraient constituées à chaque niveau de dose. Si un patient était perdu de vue au cours des 4 premières semaines après le traitement CAR sans éprouver de toxicité limitant la dose (DLT), alors le patient n'était pas considéré comme évaluable pour la détermination de la DLT et serait remplacé. La DMT a été considérée comme la dose la plus élevée à laquelle ≤ 1 patient sur 6 a subi une DLT au cours de la période d'observation de 4 semaines après le traitement CAR. Seule la cohorte de 3 patients a été inscrite au premier niveau de dose en raison de la fin du financement de la subvention.

Une cohorte élargie de 12 patients était prévue au MTD des cellules CAR T EGFRvIII, afin d'obtenir une estimation plus précise de la probabilité d'une toxicité inacceptable. Cette cohorte aurait les cellules radiomarquées avec 111In pour suivre leur distribution. En bref, les CAR auraient été comptés et remis en suspension dans une solution saline tamponnée au phosphate (PBS). 4-6x10^8 cellules seraient marquées avec un total de 500 microCi de 111In. Les cellules seraient lavées et mélangées avec des CAR froids pour obtenir la dose de cellules souhaitée. Les CAR étiquetés seraient perfusés au patient par un cathéter intraveineux au sein de l'unité ambulatoire de greffe de moelle osseuse (BMT). La distribution des CAR d'EGFRvIII marqués à l'111In serait évaluée 1, 2 et 3 jours après la perfusion à l'aide d'une scintigraphie. Il n'y a eu aucune inscription dans la cohorte élargie en raison de la fin du financement des subventions.