EGFRvIII CAR T-cellen voor nieuw gediagnosticeerd WHO graad IV maligne glioom (ExCeL)

Houd er rekening mee dat de inschrijving voor deze studie voortijdig is beëindigd vanwege het einde van de subsidiefinanciering.

Na toestemming werden proefpersonen ingeschreven in cohorten met dosisescalatie. Patiënten zullen leukaferese ondergaan om perifere mononucleaire bloedcellen (PBMC's) te oogsten voor het genereren van EGFRvIII CAR T-cellen voorafgaand aan het begin van RT en gelijktijdige TMZ. T-cellen werden geïsoleerd uit de PBMC's van de patiënt en getransduceerd om de CAR tot expressie te brengen. In het kort werden PBMC's gestimuleerd met Muromonab-cluster van differentiatie 3 (CD3) (OKT3), een anti-CD3 monoklonaal antilichaam (mAb) en getransduceerd op met RetroNectin® gecoate platen. Getransduceerde cellen werden gedurende 14 dagen geëxpandeerd in interleukine-2 (IL-2).

Patiënten voltooiden vervolgens standaardzorg RT en gelijktijdige TMZ. Patiënten die in aanmerking bleven komen na standaardzorgstraling en TMZ kregen tot 3 cycli TMZ bij 50-100 mg/m^2/dag gedurende 21 dagen van cycli van 28 dagen, wat het standaard dosis-geïntensifieerde (DI) TMZ-regime is. Als de CAR-specifieke T-cellen niet voldeden aan de vrijgavecriteria, werd de patiënt vóór de CAR-behandeling teruggetrokken en vervangen.

Ten minste 48 uur na de laatste dosis DI TMZ werd de totale dosis EGFRvIII CAR T-cellen intraveneus toegediend. Als er niet voldoende CAR-specifieke T-cellen konden worden gegenereerd om te voldoen aan de beoogde toegewezen dosis binnen het dosis-escalatiegedeelte van het onderzoek, werd de patiënt behandeld op een lager vooraf bepaald dosisniveau met behulp van beschikbare CAR-specifieke T-cellen en vervangen in de toegewezen hogere dosis. De toegediende dosis zou het hoogste gedefinieerde dosisniveau zijn geweest waarvoor voldoende CAR-specifieke T-cellen beschikbaar zijn. Als binnen het uitgebreide cohort niet voldoende CAR-specifieke T-cellen konden worden gegenereerd om aan de MTD-dosis te voldoen, zouden alle beschikbare T-cellen worden toegediend.

Na de infusie van EGFRvIII CAR's werden bloedmonsters genomen voor immuunbewaking 1, 5 en 10 dagen na de infusie, vervolgens 1, 3 en 6 maanden, daarna jaarlijks tot progressie (of overlijden of verloren contact). De herhalingsbezoeken voor immuunmonitoring na 3 maanden, 6 maanden en jaarlijks vielen samen met SOC-kliniekbezoeken. Er werd ook bloed afgenomen voor replicatiecompetente retrovirus (RCR) polymerasekettingreactie (PCR) volgens de Food and Drug Administration (FDA) na 3, 6 en 12 maanden tijdens SOC-kliniekbezoeken. Ten slotte werd bloed afgenomen voor evaluatie van cytokine-afgiftesyndroom (CRS) voorafgaand aan celinfusie, 1 en 4 uur na infusie en op dagen 1, 2, 5, 10 en na één maand. Metingen voor CRS omvatten IL-2, IL-6, tumornecrosefactor-alfa (TNFα), interferon (IFN)-gamma, granulocyt-macrofaag-koloniestimulerende factor (GM-CSF) en C-reactief proteïne (CRP).

Patiënten keerden een maand na de EGFRvIII CAR T-celinfusie terug naar de kliniek om te worden geëvalueerd voor cycli van SOC 5-daagse TMZ bij 150-200 mg/m^2/dag voor de eerste 5-daagse cyclus, gevolgd door 200 mg/m^ 2/dag gedurende 5 dagen om de 28 dagen volgens de behandelend oncoloog. Dit resulteerde in een vertraging van >30 dagen tussen de laatste cyclus van DI TMZ en de eerste cyclus van 5-daagse TMZ.

Tumorprogressie werd histologisch gedocumenteerd, tenzij er klinische contra-indicaties waren, om ontstekingsreacties uit te sluiten die zich manifesteerden als radiografische of klinische veranderingen, die zouden kunnen wijzen op een mogelijk toxische of therapeutische respons en niet op tumorprogressie. Als weefsel werd verkregen via Duke Brain Tumor Center Biorepository, werd het gebruikt om tumorprogressie histologisch te bevestigen en om immunologische celinfiltratie en ontsnapping van EGFRvIII-antigeen op de tumorplaats te beoordelen. Patiënten zouden in aanmerking komen voor aanvullende adjuvante therapie op het moment van tumorprogressie.

Een klassieke "3+3" studieopzet was gepland om de MTD te schatten voor CAR-specifieke T-celbehandeling bij patiënten met nieuw gediagnosticeerde GBM. Vier dosisniveaus moesten worden overwogen: #1: 4,5 x 10^6/kg, #2: 1,5 x 10^7/kg, #3: 4,5 x 10^7/kg, en #4: 1,5 x 10^8 /kg. Beginnend met het laagste dosisniveau, zouden op elk dosisniveau cohorten van 3-6 proefpersonen worden opgebouwd. Als een patiënt tijdens de eerste 4 weken na de CAR-behandeling geen follow-up meer had zonder een dosisbeperkende toxiciteit (DLT) te ervaren, werd de patiënt niet als evalueerbaar beschouwd voor de bepaling van DLT en zou hij worden vervangen. De MTD werd beschouwd als het hoogste dosisniveau waarbij ≤1 van de 6 patiënten DLT ervoer tijdens de observatieperiode van 4 weken na CAR-behandeling. Er was slechts een cohort van 3 patiënten ingeschreven op het eerste dosisniveau vanwege het beëindigen van de subsidiefinanciering.

Een uitgebreid cohort van 12 patiënten was gepland bij de MTD van EGFRvIII CAR T-cellen om een ​​nauwkeurigere schatting te krijgen van de waarschijnlijkheid van onaanvaardbare toxiciteit. Dit cohort zou de cellen radioactief gemerkt hebben met 111In om hun verspreiding te volgen. Kortom, CAR's zouden zijn geteld en opnieuw gesuspendeerd in fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS). 4-6x10^8 cellen zouden worden gelabeld met een totaal van 500 microCi van 111In. De cellen zouden worden gewassen en gemengd met koude CAR's om de gewenste celdosis te bereiken. De gelabelde CAR's zouden via een intraveneuze katheter in de patiënt worden ingebracht in de Ambulante Beenmergtransplantatie (BMT)-eenheid. Distributie van 111In-gelabelde EGFRvIII CAR's zou 1, 2 en 3 dagen na infusie worden beoordeeld met behulp van scintigrafie. Er was geen inschrijving voor het uitgebreide cohort vanwege het beëindigen van de subsidiefinanciering.