EGFRvIII CAR T-celler for nylig diagnostisert WHO Grad IV ondartet gliom (ExCeL)

Vær oppmerksom på at påmeldingen til denne studien ble avsluttet tidlig på grunn av slutten av stipendet.

Etter samtykke ble forsøkspersoner registrert i kohorter med doseeskalering. Pasienter vil gjennomgå leukaferese for å høste perifere blodmononukleære celler (PBMCs) for generering av EGFRvIII CAR T-celler før de starter RT og samtidig TMZ. T-celler ble isolert fra pasientens PBMC-er og transdusert for å uttrykke CAR. Kort fortalt ble PBMC-er stimulert med Muromonab-cluster of differentiation 3 (CD3) (OKT3), et anti-CD3 monoklonalt antistoff (mAb), og transdusert på RetroNectin®-belagte plater. Transduserte celler ble ekspandert i interleukin-2 (IL-2) i 14 dager.

Pasientene fullførte deretter standardbehandling RT og samtidig TMZ. Pasienter som forble kvalifiserte etter standardbehandlingsstråling og TMZ fikk opptil 3 sykluser med TMZ med 50-100 mg/m^2/dag i 21 dager med 28 dagers sykluser, som er standard dose-intensifisert (DI) TMZ-regime. Dersom de CAR-spesifikke T-cellene ikke oppfylte frigjøringskriteriene, ble pasienten trukket ut før CAR-behandling og erstattet.

Minst 48 timer etter siste dose av DI TMZ ble den totale dosen av EGFRvIII CAR T-celler gitt intravenøst. Hvis tilstrekkelig CAR-spesifikke T-celler ikke kunne genereres for å møte den målrettede tildelte dosen innenfor doseeskaleringsdelen av studien, ble pasienten blitt behandlet med et lavere forhåndsdefinert dosenivå ved bruk av tilgjengelige CAR-spesifikke T-celler og erstattet i den tildelte høyere dosen. Den administrerte dosen ville vært det høyeste definerte dosenivået som det er tilstrekkelig med CAR-spesifikke T-celler tilgjengelig for. Innenfor den utvidede kohorten, hvis tilstrekkelig CAR-spesifikke T-celler ikke kunne genereres for å møte MTD-dosen, ville alle tilgjengelige T-celler bli administrert.

Etter infusjon av EGFRvIII CARer ble blodprøver for immunovervåking tatt 1, 5 og 10 dager etter infusjonen, deretter 1, 3 og 6 måneder, deretter årlig til progresjon (eller død eller tap av kontakt). Gjenbesøkene for immunovervåking etter 3 måneder, 6 måneder og årlig falt sammen med SOC-klinikkbesøk. Det ble også tatt blod for replikasjonskompetent retrovirus (RCR) Polymerase Chain Reaction (PCR) i henhold til Food and Drug Administration (FDA) etter 3, 6 og 12 måneder under SOC-klinikkbesøk. Til slutt ble blod for evaluering av cytokinfrigjøringssyndrom (CRS) tappet før celleinfusjon, 1 og 4 timer etter infusjon, og på dag 1, 2, 5, 10 og etter en måned. Målinger for CRS inkluderte IL-2, IL-6, Tumor Necrosis Factor alfa (TNFα), interferon (IFN) gamma, Granulocytt-makrofag kolonistimulerende faktor (GM-CSF) og C-reaktivt protein (CRP).

Pasienter returnerte til klinikken en måned etter EGFRvIII CAR T-celleinfusjonen for å bli evaluert for sykluser med SOC 5-dagers TMZ ved 150-200 mg/m^2/dag for den første 5-dagers syklusen, etterfulgt av 200 mg/m^ 2/dag i 5 dager hver 28. dag per behandlende onkolog. Dette resulterte i en forsinkelse på >30 dager mellom siste syklus av DI TMZ og den første syklusen med 5-dagers TMZ.

Tumorprogresjon ble dokumentert histologisk, med mindre det var kliniske kontraindikasjoner, for å utelukke inflammatoriske responser som presenteres som radiografiske eller kliniske endringer, som kan indikere en potensielt toksisk eller terapeutisk respons og ikke tumorprogresjon. Hvis vev ble oppnådd gjennom Duke Brain Tumor Center Biorepository, ble det brukt til å bekrefte tumorprogresjon histologisk, og for å vurdere immunologisk celleinfiltrasjon og EGFRvIII-antigenunnslipping på tumorstedet. Pasienter vil være kvalifisert for ytterligere adjuvant terapi på tidspunktet for tumorprogresjon.

Et klassisk "3+3" studiedesign ble planlagt for å estimere MTD for CAR-spesifikk T-cellebehandling blant pasienter med nylig diagnostisert GBM. Fire dosenivåer skulle vurderes: #1: 4,5 x 10^6/kg, #2: 1,5 x 10^7/kg, #3: 4,5 x 10^7/kg og #4: 1,5 x 10^8 /kg. Starter med det laveste dosenivået, vil kohorter på 3-6 forsøkspersoner samles på hvert dosenivå. Hvis en pasient gikk tapt for oppfølging i løpet av de første 4 ukene etter CAR-behandling uten å oppleve en dosebegrensende toksisitet (DLT), ble pasienten ikke ansett som evaluerbar for bestemmelse av DLT og ville bli erstattet. MTD ble ansett for å være det høyeste dosenivået der ≤1 av 6 pasienter opplevde DLT i løpet av den 4-ukers observasjonsperioden etter CAR-behandling. Bare 3-pasientkohort ble registrert på det første dosenivået på grunn av tilskuddsfinansiering.

En utvidet kohort på 12 pasienter ble planlagt ved MTD av EGFRvIII CAR T-celler, for å oppnå et mer presist estimat av sannsynligheten for uakseptabel toksisitet. Denne kohorten ville ha cellene radiomerket med 111In for å spore deres distribusjon. Kort fortalt ville CAR-er blitt talt og resuspendert i fosfatbufret saltvann (PBS). 4-6x10^8 celler vil bli merket med totalt 500 mikroCi av 111In. Cellene ble vasket og blandet med kalde CARer for å oppnå ønsket celledose. De merkede CAR-ene vil bli infundert inn i pasienten gjennom et intravenøst ​​kateter i den ambulerende benmargstransplantasjonsenheten (BMT). Distribusjon av 111In-merkede EGFRvIII CARer vil bli evaluert 1, 2 og 3 dager etter infusjon ved bruk av scintigrafi. Det var ingen påmelding på det utvidede kohorten på grunn av at tilskuddsfinansieringen sluttet.