Cellule CAR T EGFRvIII per glioma maligno di grado IV dell'OMS di nuova diagnosi (ExCeL)

Si noti che l'iscrizione a questo studio è terminata anticipatamente a causa della fine del finanziamento della sovvenzione.

Dopo il consenso, i soggetti sono stati arruolati in coorti di aumento della dose. I pazienti saranno sottoposti a leucaferesi per raccogliere cellule mononucleari del sangue periferico (PBMC) per la generazione di cellule CAR T EGFRvIII prima dell'inizio della RT e della concomitante TMZ. Le cellule T sono state isolate dalle PBMC del paziente e trasdotte per esprimere la CAR. In breve, le PBMC sono state stimolate con Muromonab-cluster of differenziation 3 (CD3) (OKT3), un anticorpo monoclonale anti-CD3 (mAb) e trasdotte su piastre rivestite con RetroNectin®. Le cellule trasdotte sono state espanse in interleuchina-2 (IL-2) per 14 giorni.

I pazienti hanno quindi completato lo standard di cura RT e TMZ concomitante. I pazienti che sono rimasti eleggibili dopo radiazioni standard di cura e TMZ hanno ricevuto fino a 3 cicli di TMZ a 50-100 mg/m^2/giorno per 21 giorni di cicli di 28 giorni, che è il regime standard di TMZ a dose intensificata (DI). Se le cellule T CAR-specifiche non soddisfacevano i criteri di rilascio, il paziente veniva ritirato prima del trattamento CAR e sostituito.

Almeno 48 ore dopo l'ultima dose di DI TMZ, la dose totale di cellule CAR T EGFRvIII è stata somministrata per via endovenosa. Se non è stato possibile generare cellule T CAR-specifiche sufficienti per soddisfare la dose assegnata mirata all'interno della porzione di aumento della dose dello studio, il paziente è stato trattato a un livello di dose predefinito inferiore utilizzando cellule T CAR-specifiche disponibili e sostituito nella dose più alta assegnata. La dose somministrata sarebbe stata il livello di dose definito più elevato per il quale sono disponibili cellule T CAR-specifiche sufficienti. All'interno della coorte espansa, se non fosse possibile generare un numero sufficiente di cellule T CAR-specifiche per soddisfare la dose MTD, verrebbero somministrate tutte le cellule T disponibili.

Dopo l'infusione di CAR di EGFRvIII, i campioni di sangue per il monitoraggio immunitario sono stati prelevati 1, 5 e 10 giorni dopo l'infusione, quindi 1, 3 e 6 mesi, quindi annualmente fino alla progressione (o morte o perdita per contatto). Le visite di ritorno per il monitoraggio immunitario a 3 mesi, 6 mesi e annualmente hanno coinciso con le visite cliniche del SOC. Il sangue è stato anche prelevato per la reazione a catena della polimerasi (PCR) del retrovirus competente per la replica (RCR) secondo la Food and Drug Administration (FDA) a 3, 6 e 12 mesi durante le visite cliniche SOC. Infine, il sangue per la valutazione della sindrome da rilascio di citochine (CRS) è stato prelevato prima dell'infusione cellulare, 1 e 4 ore dopo l'infusione e nei giorni 1, 2, 5, 10 e dopo un mese. Le misurazioni per CRS includevano IL-2, IL-6, fattore di necrosi tumorale alfa (TNFα), interferone (IFN) gamma, fattore stimolante le colonie di granulociti-macrofagi (GM-CSF) e proteina C-reattiva (CRP).

I pazienti sono tornati in clinica un mese dopo l'infusione di cellule CAR T EGFRvIII per essere valutati per cicli di SOC TMZ di 5 giorni a 150-200 mg/m^2/giorno per il primo ciclo di 5 giorni, seguito da 200 mg/m^ 2 volte al giorno per 5 giorni ogni 28 giorni per l'oncologo curante. Ciò ha comportato un ritardo >30 giorni tra l'ultimo ciclo di DI TMZ e il primo ciclo di 5 giorni TMZ.

La progressione del tumore è stata documentata istologicamente, a meno che non vi fossero controindicazioni cliniche, per escludere risposte infiammatorie che si presentassero come cambiamenti radiografici o clinici, che potrebbero indicare risposte potenzialmente tossiche o terapeutiche e non progressione del tumore. Se il tessuto è stato ottenuto attraverso il biorepository del Duke Brain Tumor Center, è stato utilizzato per confermare istologicamente la progressione del tumore e per valutare l'infiltrazione immunologica delle cellule e la fuga dell'antigene EGFRvIII nel sito del tumore. I pazienti sarebbero idonei per una terapia adiuvante aggiuntiva al momento della progressione del tumore.

È stato pianificato un classico disegno di studio "3 + 3" per stimare l'MTD per il trattamento con cellule T CAR-specifiche tra i pazienti con GBM di nuova diagnosi. Si dovevano considerare quattro livelli di dose: #1: 4,5 x 10^6/kg, #2: 1,5 x 10^7/kg, #3: 4,5 x 10^7/kg e #4: 1,5 x 10^8 /kg. A partire dal livello di dose più basso, a ciascun livello di dose verrebbero accumulate coorti di 3-6 soggetti. Se un paziente veniva perso al follow-up durante le prime 4 settimane dopo il trattamento con CAR senza manifestare una tossicità dose-limitante (DLT), allora il paziente non veniva considerato valutabile per la determinazione della DLT e veniva sostituito. L'MTD è stato considerato il livello di dose più elevato al quale ≤1 paziente su 6 ha manifestato DLT durante il periodo di osservazione di 4 settimane dopo il trattamento CAR. Solo la coorte di 3 pazienti è stata arruolata al primo livello di dose a causa della fine del finanziamento.

È stata pianificata una coorte allargata di 12 pazienti al MTD delle cellule CAR T EGFRvIII, al fine di ottenere una stima più precisa della probabilità di tossicità inaccettabile. Questa coorte avrebbe le cellule radiomarcate con 111In per tracciare la loro distribuzione. In breve, le CAR sarebbero state contate e risospese in soluzione salina tamponata con fosfato (PBS). 4-6x10^8 celle verrebbero etichettate con un totale di 500 microCi di 111In. Le cellule verrebbero lavate e miscelate con CAR fredde per ottenere la dose cellulare desiderata. Le CAR etichettate verrebbero infuse nel paziente attraverso un catetere endovenoso all'interno dell'unità ambulatoriale di trapianto di midollo osseo (BMT). La distribuzione di CAR EGFRvIII marcati con 111In verrebbe valutata a 1, 2 e 3 giorni dopo l'infusione mediante scintigrafia. Non ci sono state iscrizioni alla coorte ampliata a causa della fine del finanziamento della sovvenzione.