Células CAR T EGFRvIII para Glioma Maligno de Grau IV da OMS recém-diagnosticado (ExCeL)

Observe que a inscrição neste estudo foi encerrada antecipadamente devido ao fim do financiamento da concessão.

Após o consentimento, os indivíduos foram inscritos em coortes de escalonamento de dose. Os pacientes serão submetidos a leucaférese para colher células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) para a geração de células T CAR EGFRvIII antes do início da RT e TMZ concomitante. As células T foram isoladas das PBMCs do paciente e transduzidas para expressar o CAR. Resumidamente, as PBMCs foram estimuladas com Muromonab-cluster de diferenciação 3 (CD3) (OKT3), um anticorpo monoclonal anti-CD3 (mAb) e transduzidas em placas revestidas com RetroNectin®. As células transduzidas foram expandidas em interleucina-2 (IL-2) por 14 dias.

Os pacientes então completaram o tratamento padrão de RT e TMZ concomitante. Os pacientes que permaneceram elegíveis após o tratamento padrão com radiação e TMZ receberam até 3 ciclos de TMZ a 50-100 mg/m^2/dia por 21 dias de ciclos de 28 dias, que é o regime de TMZ de dose intensificada (DI) padrão. Se as células T específicas do CAR não atendessem aos critérios de liberação, o paciente era retirado antes do tratamento do CAR e substituído.

Pelo menos 48 horas após a última dose de DI TMZ, a dose total de células T CAR EGFRvIII foi administrada por via intravenosa. Se células T específicas de CAR suficientes não puderem ser geradas para atender à dose designada designada dentro da porção de escalonamento de dose do estudo, o paciente foi tratado com um nível de dose pré-definido mais baixo usando células T específicas de CAR disponíveis e substituído na dose mais elevada atribuída. A dose administrada teria sido o nível de dose definido mais alto para o qual existem células T específicas de CAR suficientes disponíveis. Dentro da coorte expandida, se células T específicas de CAR suficientes não pudessem ser geradas para atender à dose de MTD, todas as células T disponíveis seriam administradas.

Após a infusão de CARs EGFRvIII, amostras de sangue para monitoramento imunológico foram coletadas 1, 5 e 10 dias após a infusão, depois 1, 3 e 6 meses, depois anualmente até a progressão (ou morte ou perda de contato). As consultas de retorno para monitoramento imunológico aos 3 meses, 6 meses e anualmente coincidiram com as visitas clínicas do SOC. O sangue também foi coletado para a reação em cadeia da polimerase (PCR) do retrovírus competente para replicação (RCR) de acordo com a Food and Drug Administration (FDA) aos 3, 6 e 12 meses durante as visitas clínicas do SOC. Por fim, sangue para avaliação da síndrome de liberação de citocinas (CRS) foi coletado antes da infusão celular, 1 e 4 horas após a infusão e nos dias 1, 2, 5, 10 e em um mês. As medições para CRS incluíram IL-2, IL-6, fator de necrose tumoral alfa (TNFα), interferon (IFN) gama, fator estimulante de colônias de granulócitos-macrófagos (GM-CSF) e proteína C reativa (PCR).

Os pacientes retornaram à clínica um mês após a infusão de células T CAR EGFRvIII para serem avaliados quanto aos ciclos de SOC 5 dias TMZ a 150-200 mg/m^2/dia para o primeiro ciclo de 5 dias, seguido por 200 mg/m^ 2/dia por 5 dias a cada 28 dias pelo oncologista responsável. Isso resultou em um atraso de >30 dias entre o último ciclo de DI TMZ e o primeiro ciclo de 5 dias de TMZ.

A progressão tumoral foi documentada histologicamente, a menos que houvesse contraindicações clínicas, para excluir respostas inflamatórias que se apresentassem como alterações radiográficas ou clínicas, o que poderia indicar respostas potencialmente tóxicas ou terapêuticas e não progressão tumoral. Se o tecido foi obtido através do Duke Brain Tumor Center Biorepository, ele foi usado para confirmar histologicamente a progressão do tumor e para avaliar a infiltração de células imunológicas e o escape do antígeno EGFRvIII no local do tumor. Os pacientes seriam elegíveis para terapia adjuvante adicional no momento da progressão do tumor.

Um desenho de estudo clássico "3+3" foi planejado para estimar o MTD para o tratamento de células T CAR-específicas entre pacientes com GBM recém-diagnosticado. Quatro níveis de dose foram considerados: #1: 4,5 x 10^6/kg, #2: 1,5 x 10^7/kg, #3: 4,5 x 10^7/kg e #4: 1,5 x 10^8 /kg. Começando com o nível de dose mais baixo, grupos de 3-6 indivíduos seriam acumulados em cada nível de dose. Se um paciente perdesse o acompanhamento durante as primeiras 4 semanas após o tratamento com CAR sem apresentar uma toxicidade limitante da dose (DLT), o paciente não era considerado avaliável para a determinação de DLT e seria substituído. O MTD foi considerado o nível de dose mais alto no qual ≤ 1 de 6 pacientes experimentou DLT durante o período de observação de 4 semanas após o tratamento com CAR. Apenas a coorte de 3 pacientes foi inscrita no primeiro nível de dose devido ao término do financiamento da concessão.

Uma coorte expandida de 12 pacientes foi planejada no MTD de células T CAR EGFRvIII, a fim de obter uma estimativa mais precisa da probabilidade de toxicidade inaceitável. Esta coorte teria as células radiomarcadas com 111In para rastrear sua distribuição. Resumidamente, os CARs teriam sido contados e ressuspensos em solução salina tamponada com fosfato (PBS). 4-6x10^8 células seriam marcadas com um total de 500 microCi de 111In. As células seriam lavadas e misturadas com CARs frios para atingir a dose celular desejada. Os CARs marcados seriam infundidos no paciente por meio de um cateter intravenoso dentro da Unidade Ambulatorial de Transplante de Medula Óssea (BMT). A distribuição de CARs de EGFRvIII marcados com 111In seria avaliada em 1, 2 e 3 dias após a infusão usando cintilografia. Não houve inscrição na coorte expandida devido ao término do financiamento da concessão.