Т-клетки EGFRvIII CAR для недавно диагностированной злокачественной глиомы IV степени ВОЗ (ExCeL)

Обратите внимание, что регистрация в этом исследовании была прекращена досрочно в связи с окончанием грантового финансирования.

После согласия субъекты были включены в когорты с повышением дозы. Пациенты будут подвергаться лейкаферезу для сбора мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) для генерации Т-клеток EGFRvIII CAR до начала лучевой терапии и одновременного введения TMZ. Т-клетки выделяли из РВМС пациента и трансдуцировали для экспрессии CAR. Вкратце, PBMC стимулировали муромонабом-кластером дифференцировки 3 (CD3) (OKT3), моноклональным антителом против CD3 (mAb) и трансдуцировали на покрытые RetroNectin® планшеты. Трансдуцированные клетки размножали в интерлейкине-2 (IL-2) в течение 14 дней.

Затем пациенты прошли стандартную терапию лучевой терапией и одновременным введением ТМЗ. Пациенты, которые оставались пригодными для лечения после стандартной лучевой терапии и ТМЗ, получали до 3 циклов ТМЗ в дозе 50-100 мг/м^2/день в течение 21 дня из 28-дневных циклов, что является стандартным режимом ТМЗ с усиленной дозой (DI). Если CAR-специфические Т-клетки не соответствовали критериям высвобождения, пациента исключали до лечения CAR и заменяли.

По крайней мере, через 48 часов после введения последней дозы DI TMZ внутривенно вводили общую дозу Т-клеток EGFRvIII CAR. Если не удавалось генерировать достаточное количество CAR-специфических Т-клеток для достижения целевой назначенной дозы в рамках части исследования, связанной с повышением дозы, пациента лечили на более низком предварительно определенном уровне дозы с использованием доступных CAR-специфических Т-клеток и заменяли в назначенной более высокой дозе. Вводимая доза была бы наивысшим определенным уровнем дозы, для которого имеется достаточное количество CAR-специфических Т-клеток. В расширенной когорте, если не может быть получено достаточное количество CAR-специфичных Т-клеток для соответствия дозе MTD, будут вводиться все доступные Т-клетки.

После инфузии EGFRvIII CAR образцы крови для иммунного мониторинга брали через 1, 5 и 10 дней после инфузии, затем через 1, 3 и 6 месяцев, затем ежегодно до прогрессирования (или смерти или потери контакта). Повторные визиты для иммунного мониторинга через 3 месяца, 6 месяцев и ежегодно совпадали с визитами в клинику SOC. Кровь также брали для репликационно-компетентной ретровирусной (RCR) полимеразной цепной реакции (PCR) в соответствии с Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) через 3, 6 и 12 месяцев во время визитов в клинику SOC. Наконец, кровь для оценки синдрома высвобождения цитокинов (CRS) брали до инфузии клеток, через 1 и 4 часа после инфузии, а также в дни 1, 2, 5, 10 и через один месяц. Измерения для CRS включали IL-2, IL-6, фактор некроза опухоли альфа (TNFα), гамма-интерферон (IFN), гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF) и С-реактивный белок (CRP).

Пациенты вернулись в клинику через месяц после инфузии Т-клеток EGFRvIII CAR для оценки циклов SOC 5-дневный ТМЗ в дозе 150-200 мг/м2/день в течение первого 5-дневного цикла, затем 200 мг/м2. 2 раза в день в течение 5 дней каждые 28 дней по показаниям лечащего онколога. Это привело к более чем 30-дневной задержке между последним циклом DI TMZ и первым циклом 5-дневного TMZ.

Прогрессирование опухоли документировали гистологически, если не было клинических противопоказаний, чтобы исключить воспалительные реакции, проявляющиеся рентгенологическими или клиническими изменениями, которые могли указывать на потенциально токсические или терапевтические реакции, а не на прогрессирование опухоли. Если ткань была получена из биорепозитория Duke Brain Tumor Center, ее использовали для гистологического подтверждения прогрессирования опухоли, а также для оценки иммунологической клеточной инфильтрации и выхода антигена EGFRvIII в месте опухоли. Пациенты будут иметь право на дополнительную адъювантную терапию во время прогрессирования опухоли.

Был запланирован классический дизайн исследования «3+3» для оценки MTD для лечения CAR-специфическими Т-клетками у пациентов с впервые диагностированной глиобластомой. Необходимо было рассмотреть четыре уровня доз: #1: 4,5 x 10^6/кг, #2: 1,5 x 10^7/кг, #3: 4,5 x 10^7/кг и #4: 1,5 x 10^8. /кг. Начиная с самого низкого уровня дозы, группы из 3-6 субъектов будут накапливаться при каждом уровне дозы. Если пациент был потерян для последующего наблюдения в течение первых 4 недель после лечения CAR без проявления дозолимитирующей токсичности (DLT), то пациент не считался пригодным для оценки для определения DLT и должен был быть заменен. MTD считался максимальным уровнем дозы, при котором ≤1 из 6 пациентов испытал DLT в течение 4-недельного периода наблюдения после лечения CAR. Только когорта из 3 пациентов была зарегистрирована на уровне первой дозы в связи с окончанием финансирования гранта.

Расширенная когорта из 12 пациентов была запланирована на МПД Т-клеток EGFRvIII CAR, чтобы получить более точную оценку вероятности неприемлемой токсичности. В этой когорте клетки будут помечены радиоактивным изотопом 111In для отслеживания их распределения. Вкратце, CAR подсчитывали и повторно суспендировали в фосфатно-солевом буфере (PBS). Клетки 4-6x10^8 будут помечены в общей сложности 500 мкКи 111In. Клетки промывали и смешивали с холодными CAR для достижения желаемой дозы клеток. Меченые CAR будут вводиться пациенту через внутривенный катетер в отделении амбулаторной трансплантации костного мозга (BMT). Распределение 111In-меченых EGFRvIII CAR оценивали через 1, 2 и 3 дня после инфузии с помощью сцинтиграфии. Зачисления в расширенную группу не было из-за прекращения финансирования гранта.