새로 진단된 WHO 등급 IV 악성 신경아교종에 대한 EGFRvIII CAR T 세포 (ExCeL)

이 연구에 대한 등록은 보조금 지원 종료로 인해 조기 종료되었습니다.

동의 후, 피험자는 용량 증량 코호트에 등록되었습니다. 환자는 RT 및 동시 TMZ를 시작하기 전에 EGFRvIII CAR T 세포의 생성을 위해 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 수확하기 위해 백혈구 성분채집술을 받게 됩니다. T 세포를 환자의 PBMC로부터 분리하고 CAR을 발현하도록 형질도입하였다. 간략히 설명하면, PBMC를 항-CD3 단클론 항체(mAb)인 무로모나브-분화 3(CD3) 클러스터(OKT3)로 자극하고 RetroNectin® 코팅된 플레이트에 형질도입했습니다. 형질도입된 세포를 인터루킨-2(IL-2)에서 14일 동안 확장시켰다.

그런 다음 환자는 표준 치료 RT 및 동시 TMZ를 완료했습니다. 표준 치료 방사선 및 TMZ 후에 자격이 남아 있는 환자는 28일 주기 중 21일 동안 50-100mg/m^2/일에서 최대 3주기의 TMZ를 받았습니다. 이는 표준 선량 강화(DI) TMZ 요법입니다. CAR 특이적 T 세포가 방출 기준을 충족하지 못한 경우, 환자는 CAR 치료 전에 철회되고 교체되었습니다.

DI TMZ의 마지막 투여 후 최소 48시간 후에 EGFRvIII CAR T 세포의 총 투여량을 정맥으로 전달했습니다. 연구의 용량 증량 부분 내에서 목표 할당 용량을 충족시키기 위해 충분한 CAR 특이적 T 세포가 생성될 수 없는 경우, 환자는 이용 가능한 CAR 특이적 T 세포를 사용하여 더 낮은 미리 정의된 용량 수준에서 치료되었고 대체되었습니다. 할당된 더 높은 복용량에서. 투여된 용량은 이용 가능한 충분한 CAR-특이적 T 세포가 있는 최고로 정의된 용량 수준이었을 것입니다. 확장된 코호트 내에서, MTD 용량을 충족시키기 위해 충분한 CAR-특이적 T 세포가 생성될 수 없는 경우, 모든 이용 가능한 T 세포가 투여될 것입니다.

EGFRvIII CAR 주입 후, 면역 모니터링을 위한 혈액 샘플을 주입 후 1, 5, 10일, 그 다음에는 1, 3, 6개월, 그리고 진행(또는 사망 또는 접촉 상실)까지 매년 채취했습니다. 면역 모니터링을 위한 재방문은 3개월, 6개월 및 매년 SOC 클리닉 방문과 일치했습니다. SOC 클리닉 방문 중 3개월, 6개월 및 12개월에 미국 식품의약국(FDA)에 따라 복제 적격 레트로바이러스(RCR) 중합효소 연쇄 반응(PCR)을 위해 혈액도 채취했습니다. 마지막으로 사이토카인 방출 증후군(cytokine release syndrome, CRS) 평가를 위한 혈액은 세포 주입 전, 주입 후 1시간 및 4시간, 1, 2, 5, 10일 및 1개월에 채혈하였다. CRS 측정에는 IL-2, IL-6, 종양 괴사 인자 알파(TNFα), 인터페론(IFN) 감마, 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF) 및 C-반응성 단백질(CRP)이 포함되었습니다.

환자는 EGFRvIII CAR T 세포 주입 후 1개월 후에 병원으로 돌아와 첫 5일 주기 동안 150-200 mg/m^2의 SOC 5일 TMZ 주기에 대해 평가를 받은 후 200 mg/m^2 치료하는 종양 전문의당 28일마다 5일 동안 2/일. 이로 인해 DI TMZ의 마지막 주기와 5일 TMZ의 첫 번째 주기 사이에 >30일 지연이 발생했습니다.

종양 진행은 종양 진행이 아닌 잠재적인 독성 또는 치료 반응을 나타낼 수 있는 방사선학적 또는 임상적 변화로 나타나는 염증 반응을 배제하기 위해 임상적 금기 사항이 없는 한 조직학적으로 문서화되었습니다. Duke Brain Tumor Center Biorepository를 통해 조직을 얻은 경우 조직학적으로 종양 진행을 확인하고 종양 부위에서 면역학적 세포 침윤 및 EGFRvIII 항원 탈출을 평가하는 데 사용되었습니다. 환자는 종양 진행 시 추가 보조 요법을 받을 수 있습니다.

새로 진단된 GBM 환자에서 CAR 특정 T 세포 치료에 대한 MTD를 추정하기 위해 고전적인 "3+3" 연구 설계가 계획되었습니다. 네 가지 용량 수준을 고려했습니다. #1: 4.5 x 10^6/kg, #2: 1.5 x 10^7/kg, #3: 4.5 x 10^7/kg, #4: 1.5 x 10^8 /킬로그램. 가장 낮은 용량 수준에서 시작하여 각 용량 수준에서 3-6명의 피험자의 코호트가 누적됩니다. 환자가 용량 제한 독성(DLT)을 경험하지 않고 CAR 치료 후 처음 4주 동안 후속 조치를 취하지 못한 경우, 환자는 DLT 결정에 대해 평가할 수 있는 것으로 간주되지 않으며 대체됩니다. MTD는 CAR 치료 후 4주 관찰 기간 동안 6명의 환자 중 1명 이하가 DLT를 경험한 가장 높은 용량 수준으로 간주되었습니다. 보조금 지급 종료로 인해 첫 번째 용량 수준에는 3명의 환자 코호트만 등록되었습니다.

수용할 수 없는 독성의 확률을 보다 정확하게 추정하기 위해 EGFRvIII CAR T 세포의 MTD에서 12명의 환자로 구성된 확장 코호트를 계획했습니다. 이 코호트는 세포 분포를 추적하기 위해 111In으로 방사성 표지된 세포를 갖게 됩니다. 간단히 말해, CAR은 계수되고 인산염 완충 식염수(PBS)에 재현탁되었을 것입니다. 4-6x10^8 세포는 111In의 총 500 microCi로 표시됩니다. 원하는 세포 용량을 달성하기 위해 세포를 세척하고 차가운 CAR과 혼합합니다. 레이블이 지정된 CAR은 외래 골수 이식(BMT) 단위 내 정맥 카테터를 통해 환자에게 주입됩니다. 111In 표지된 EGFRvIII CAR의 분포는 신티그래피를 사용하여 주입 후 1일, 2일 및 3일에 평가됩니다. 보조금 종료로 인해 확장된 코호트에는 등록이 없었습니다.