All-trans-retinoiinihapon ja isotretinoiinin aerosoliyhdistelmähoito uutena hoitona neutraloivien vasta-aineiden indusoimiseksi COVID-19-tartunnan saaneilla potilailla, parempi kuin rokote: Innovatiivinen hoito (Antibodies)

Tämä on 2. vaiheen, satunnaistettu (1:1:1), lumekontrolloitu, 2 viikon mittainen proof-of-concept -tutkimus, jossa arvioidaan neutrofiilien voimakkaan estäjän oraalisen annon turvallisuutta ja siedettävyyttä sekä mekaanista vaikutusta. elastaasi (inhaloitu kaikki transretinoiinihappo ja inhaloitu isotretinoiini COVID-19-tartunnan saaneilla henkilöillä

Valitettavasti kaikkia rokotettuja apinoita, joita hoidetaan Oxford-rokotteella, joka tunnetaan nimellä ChAdOx1 nCoV-19, tehdään ihmiskokeita Isossa-Britanniassa. tartunnan saaneet altistettuina viruksen genomisen RNA:n palautumisen perusteella nenän eritteistä", sanoi tohtori William Haseltine, entinen Harvard Medical Schoolin professori, jolla oli keskeinen rooli varhaisten HIV/aidsin hoitojen kehittämisessä. ja yleensä inaktivoidusta virusrokotteesta riippuvainen COVID-19-rokotus rajoitetaan terveille ihmisille, joilla on vahva immuniteetti, eikä sitä anneta potilaille, joilla on aiempi kosketus SARS-CoV-2-infektioon (positiivinen nukleiinihappotestissä) . COVID-19-viruksen antigeenit stimuloivat vasta-aineiden muodostumista akuutissa vaiheessa IgM ja kroonisessa vaiheessa IgG-tyyppiset vasta-aineet, mikä helpottaa viruksen sisäänpääsyä ja fuusioitumista infektoituneen solun kanssa ottamalla virus-IgG-kompleksi Fc-reseptoriperheen kautta ja myöhempi virusfuusio antigeeniä esittelevien solujen, kuten makrofagien, B-solujen, monosyyttien kanssa FcR-perheen kautta, ja verisuonten endoteelin kanssa vastasyntyneen Fc-reseptorin (nFcR) kautta vasta-aineiden sijaan aiheutti viruksen agglutinaation, ja tämä tunnetaan vasta-aineista riippuvaisena tehostuksena (ADE) (2).

On olemassa erilaisia ​​hypoteeseja siitä, miten ADE tapahtuu, ja on todennäköistä, että on olemassa useampi kuin yksi mekanismi. Yhdessä tällaisessa reitissä joistakin immuunijärjestelmän soluista puuttuu pinnoiltaan tavanomaisia ​​reseptoreita, joita virus käyttää päästäkseen sisään, mutta niillä on Fc-reseptoreita, jotka sitoutuvat vasta-aineiden toiseen päähän. Virus sitoutuu toisessa päässä olevaan antigeeniä sitovaan kohtaan ja pääsee tällä tavalla immuunisoluun ja saastuttaa sen. Denguevirus voi käyttää tätä mekanismia ihmisen makrofagien infektoimiseen, jos aiemmin on ollut infektio eri viruskannan kanssa, mikä aiheuttaa normaalisti lievästä virusinfektiosta hengenvaarallisen.(3) Jatkuva kysymys COVID-19-pandemiassa on, saako COVID-19 ADE:tä aiemmasta muiden koronavirustartunnan saamisesta, ja jos saa, niin missä määrin.

ADE voi haitata rokotteen kehitystä: ADE voi haitata rokotteen kehitystä, koska rokote voi aiheuttaa vasta-aineiden tuotantoa, jotka ADE:n kautta pahentavat tautia, jota vastaan ​​rokote on suunniteltu suojaamaan. Rokoteehdokkaat Dengue-virusta ja kissan tarttuvaa peritoniittivirusta (kissan koronavirus) vastaan ​​jouduttiin lopettamaan, koska ne aiheuttivat ADE:n.(4)

ADE koronavirusinfektiossa voi johtua piikki (S) -proteiinia koodaavan geenin korkeasta mutaatiosta. Perusteellinen analyysi aminohappovaihteluista SARS-CoV-2-virusproteiineissa, joihin S-proteiini sisältyi, paljasti, että vähiten konservatiivisia aminohappoja on useimmissa altistuneissa S-proteiinin fragmenteissa, mukaan lukien reseptoria sitova domeeni (RBD).(5) Viivästynyt vasta-ainevaste ja eritys covid-19-oireiden ilmaantumisen jälkeen ovat vastuussa vasta-aineista riippuvaisesta tehostamisesta (ADE)

Tutkimus osoittaa, että IgA:n ensimmäinen serokonversiopäivä oli 2 päivää ensimmäisten oireiden alkamisen jälkeen, ja IgM:n ja IgG:n ensimmäinen serokonversiopäivä oli 5 päivää alkamisen jälkeen. Positiivisten vasta-aineiden määrä 183 näytteessä oli 98,9 %, 93,4 % ja 95,1 % IgA:lle, IgM:lle ja IgG:lle, vastaavasti. IgA:n, IgM:n tai IgG:n serokonversionopeus oli 100 % 32 päivää oireiden alkamisen jälkeen. Kumulatiivisen serokonversiokäyrän mukaan IgA:n, IgM:n ja IgG:n muuntumisajan mediaani oli 13, 14 ja 14 päivää, vastaavasti. (6)

Koska tämän immuunivasteen ilmaantuminen kestää jonkin aikaa, vasta-ainetestit ovat negatiivisia niille, jotka ovat äskettäin saaneet COVID-19-tartunnan, minkä vuoksi niitä ei käytetä diagnoosiin.

"Jos se on infektion alku, et ota sitä vastaan, se on jotain, joka kehittyy vasta myöhemmin", tohtori Melanie Ott, virologi ja immunologi Gladstone Institutesista ja professori Kalifornian yliopistosta San Franciscossa. (7)

Niinpä päätutkija odottaa, että viivästynyt vasta-ainevaste ja viivästynyt immunoglobuliiniluokan vaihto ovat tärkein syy vasta-aineiden tarttuvuuden ja epäspesifisyyteen erittäin mutatoidussa covid-19-infektiossa.

Korkean affiniteetin IgG-vasta-aineet voivat tehokkaasti ratkaista Covid-19-infektion

Yli 100 kehitteillä olevaa COVID-19-rokotetta keskittyvät pääasiassa toiseen immuunivasteeseen: vasta-aineisiin. Nämä proteiinit ovat B-solujen valmistamia, ja ihannetapauksessa ne kiinnittyvät SARS-CoV-2:een ja estävät sitä pääsemästä soluihin. T-solut sitä vastoin estävät infektiot kahdella eri tavalla. Auttaja-T-solut kannustavat B-soluja ja muita immuunipuolustajia toimintaan, kun taas tappaja-T-solut kohdistavat ja tuhoavat infektoituneet solut. Sairauden vakavuus voi riippua näiden T-soluvasteiden voimakkuudesta (1).

Infektioiden humoraalisia vasteita koskevat tutkimukset on suunnattu pääasiassa korkean affiniteetin IgG-vasta-aineiden tuotantoon, jotka ratkaisevat infektion tehokkaasti. On kuitenkin hyvin tiedossa, että humoraalinen immuunivaste infektiolle voi olla kaksiteräinen miekka, joka joko toimii suojamekanismina infektion ratkaisemiseksi tai pahentaa kudosvauriota, esim. IgG-vaste aiheuttaa kuolemaan johtavan akuutin keuhkovaurion vääristämällä tulehdusta poistavaa vastetta SARSissa.(8)

Hengitystieinfektioiden tapauksessa IgM- ja IgG-isotyypit ovat olleet ensisijainen painopiste immuniteetin karakterisoinnissa, mutta limakalvo- ja systeemiset IgA-vasteet, joilla voi olla kriittinen rooli taudin patogeneesissä, ovat saaneet paljon vähemmän huomiota.(9),(11)

Korkeat neutrofiilit covid-19-infektiossa voivat olla syynä viivästyneeseen vasta-ainevasteeseen ja vakaviin komplikaatioihin

Humoraalinen immuunivaste, erityisesti neutraloivan vasta-aineen tuotanto, toimii suojaavana roolina rajoittamalla infektiota myöhemmässä vaiheessa ja estämällä uudelleentartunnan tulevaisuudessa. SARS-CoV:ssa sekä T- että B-soluepitoopit kartoitettiin laajasti rakenneproteiinien, S-, N-, M- ja E-proteiinien, suhteen.(12) SARS-CoV-2:sta raportoitiin rajoitetusti serologisia yksityiskohtia. Esitutkimuksessa yksi potilas osoitti huippuspesifisen IgM:n 9. päivänä taudin puhkeamisen jälkeen ja IgG:hen vaihdon viikolla 2.25 Mielenkiintoista on, että 5 vahvistetun COVID-19-potilaan seerumit osoittavat jonkin verran ristireaktiivisuutta SARS-CoV:n kanssa, mutta eivät muun koronaviruksen kanssa. . Lisäksi kaikki potilaiden seerumit pystyivät neutraloimaan SARS-CoV-2:n in vitro plakkimäärityksessä, mikä viittaa mahdolliseen humoraalisten vasteiden onnistuneeseen lisääntymiseen.(13) Vielä on tutkittava, korreloiko spesifisen vasta-aineen kinetiikka/tiitteri sairauden vaikeusasteen kanssa.(14)

Vaikeissa koronavirustaudin 2019 (COVID-19) tapauksissa viruskeuhkokuume etenee hengitysvajaukseksi. Neutrofiilien ekstrasellulaariset ansat (NET) ovat solunulkoisia kromatiiniverkkoja, mikrobisidisia proteiineja ja hapettavia entsyymejä, joita neutrofiilit vapauttavat infektioiden hillitsemiseksi. Jos NET:t eivät kuitenkaan ole asianmukaisesti säänneltyjä, ne voivat levittää tulehdusta ja mikrovaskulaarista tromboosia - myös akuuttia hengitysvaikeusoireyhtymää sairastavien potilaiden keuhkoissa. Vaikka veren neutrofiilien kohonneet tasot ennustavat huonompia tuloksia COVID-19:ssä, NET:ien roolia ei ole tutkittu. Raportoimme nyt, että COVID-19-potilaiden seerumeissa (n = 50 potilasta, n = 84 näytettä) on kohonneet soluvapaan DNA:n, myeloperoksidaasi (MPO)-DNA:n ja sitrullinoidun histoni H3:n (Cit-H3) tasot. kaksi jälkimmäistä ovat erittäin spesifisiä NET-markkereita.(15)

Neutrofiilit ovat kehittyneitä soluja, jotka pystyvät sopeutumaan muuttuvaan tulehdukseen

Neutrofiilit eivät ole yksinkertaisia ​​entsyymipusseja, jotka lähetetään tappamaan patogeenejä ennen kuin adaptiiviset immuunisolut siirtyvät sisään. Itse asiassa ne pystyvät reagoimaan muuttuneeseen tulehdustilaan; neutrofiilit voivat tuottaa sytokiinejä, muuttaa geenin ilmentymistä tulehduksen aikana ja koko "ikääntymisen" ajan ja selviytyä huomattavasti pidempään kuin perinteisesti ajatellaan, ja yhdessä tutkimuksessa luuytimestä peräisin oleva elinikä on 5,4 päivää. Tämän seurauksena neutrofiilit pystyvät sopeutumaan muuttuviin olosuhteisiin ja ohjaamaan muiden solujen käyttäytymistä - tehtävä, jonka ne voivat suorittaa tietyllä tavalla.

On olemassa useita hiiren malleja, joissa T-soluvasteet voivat pahentua neutrofiilien ehtyessä, mikä viittaa siihen, että niillä on säätelevä rooli. Tämä neutrofiilien aiheuttama T-soluvasteiden tukahduttaminen vaatii läheistä kosketusta ja immunologisen synapsin kehittymistä - ehkä koska välittäjät, jotka uskoivat olevan vastuussa, reaktiiviset happilajit ja H2O2 eivät diffundoidu kauas. Apoptoottisten tai nekroottisten neutrofiilien sisäänotto estää myös DC-antigeenin esittelyä ja yhteisstimulaatiota, mikä johtaa vähentyneisiin T-soluvasteisiin - tilanne, jota patogeenit voivat hyödyntää. Esimerkiksi neutrofiilit vangitsevat L. majorin, ja sen jälkeen DC:t nielaisevat ne, mikä estää antigeenin esittelyn ja T-solujen käynnistyksen

NE:n osoitettiin myös estävän dendriittisolujen kypsymistä ja toimintaa, mukaan lukien kostimuloivien molekyylien CD40, CD80 ja CD86 ilmentymistä tulehduksellisista keuhkoerityksistä, jotka estävät dendriittisolujen kypsymistä ja toimintaa neutrofiilielastaasin kautta.(16)

Covid-19-infektion elastaasin estäjä:

1. Alvelestat kehitettiin keuhkosairauksien, kuten kroonisen obstruktiivisen keuhkosairauden, hoitoon. Alevelestat toimii estämällä tiettyjä kehon proteiineja, jotka ovat vastuussa tulehduksesta ja keuhkovaurioista, jotka voivat johtaa keuhkoahtaumatautiin.

   Alvelestat Elastaasin estäjä stimuloi hiiren B-lymfosyyttien erilaistumista IgG- ja IgA:ta tuottaviksi soluiksi vaihtamalla immunoglobuliiniluokkaa ja indusoimalla, joka tunnetaan myös nimellä isotyypin vaihto, isotyyppikommutaatio tai luokanvaihtorekombinaatio (CSR), on biologinen mekanismi, joka muuttaa B-solun tuotantoa. immunoglobuliinin tyypistä toiseen, kuten isotyypistä IgM isotyyppiin IgG

   Tutkimus osoitti, että neutrofiilien väheneminen parantaa limakalvon IgA- ja IgG-tuotantoa sublingvaalisen immunisoinnin jälkeen Bacillus anthracis -turvotustoksiinilla adjuvanttina. Nämä aiemmat tutkimukset osoittivat myös, että neutrofiilien lukumäärän ja B-solujen IgA-tuotannon välillä on käänteinen korrelaatio. Spesifisten elastaasi-inhibiittorien avulla tarkastelimme, voisiko neutrofiilien elastaasiaktiivisuus olla se tekijä, joka häiritsee IgA:n ja mahdollisesti muiden immunoglobuliinien isotyyppien tuotantoa. Havaitsimme, että hiiren pernasolut ja suoliliepeen imusolmukesolut, joita viljeltiin 5 päivää neutrofiilien elastaasi-inhibiittoreiden läsnä ollessa, erittivät korkeampia IgG- ja IgA-tasoja kuin solut, joita viljeltiin ilman inhibiittoreita, ja tämä hoito kuitenkin lisäsi CD4+ T-solujen esiintymistiheyttä. .(17) Limakalvoon kohdistuvana viruksena SARS-CoV-2:n odotetaan tuottavan erittävää IgA:ta (sIgA) ja indusoivan vahvan limakalvon immuniteetin. Itse asiassa limakalvon virusten vastaisen immuniteetin on osoitettu johtuvan osittain IgA-välitteisistä vuorovaikutuksista patogeenisten mikro-organismien kanssa, jotka estävät patogeenien kiinnittymisen solun pintaan.(17) Lisääntynyt IgA-tuotanto voi johtua lisääntyneistä TGF-β- ja IL-10-tasoista, jotka edistävät vasta-aineiden vaihtoa SARS-CoV-2-infektiossa.(17) Eräässä tutkimuksessa raportoitiin, että neutrofiilien väheneminen ennen systeemistä rokotteiden injektiota lisäsi antigeenispesifisten CD4+ T-soluvasteiden suuruutta ja antigeenispesifisten seerumin IgG-vasteiden tasoa.(18)

   Alvelestatin ja Sivelestatin havaittiin stimuloivan AID-mRNA-synteesiä. NE-inhibiittorit indusoivat myös BAFF-, APRIL- ja IL-10-mRNA:n ilmentymistä annosriippuvaisella tavalla. Neutrofiilielastaasin ja vastaavien seriiniproteaasien, katepsiini G:n ja proteinaasi 3:n, osoitettiin säätelevän sytokiinivasteita sytokiinien, sytokiinireseptoreiden tai maksun kaltaisten reseptoreiden aktivoinnin tai hajoamisen kautta.(18) Tämä on yhdenmukainen havaintomme kanssa, että NE-inhibiittorit stimuloivat IL-10:n ilmentymistä, mutta myös BAFF- ja APRIL-proteiinia splenosyyttiviljelmissä. IL-10:n raportoitiin säätelevän AID:n ilmentymistä Ig-CSR:n indusoimiseksi. (19) ja on vakiintunutta, että IL-10 helpottaa Ig-luokan vaihtoa IgA:n tuottamiseksi (20). Siten nämä tiedot viittaavat siihen, että NE-inhibiittorit stimuloivat vasta-ainetuotantoa stimuloimalla AID:tä ja estämällä sytokiinien ja sytokiinireseptorien aktivaatiota/hajoamista elastaasin vaikutuksesta. NE:n osoitettiin myös inhiboivan dendriittisolujen kypsymistä ja toimintaa, mukaan lukien kostimuloivien molekyylien CD40, CD80 ja CD86 ekspressio.(21). Siten neutrofiilien estäjien läsnäolo on saattanut edistää dendriittisolujen kypsymistä ja niiden BAFF- ja APRIL-ilmentymistä ja ehkä kostimulatorisia molekyylejä (eli CD40) vasta-ainetuotannon tehostamiseksi. Vaikka Alvelestat ja Sivelestat ovat spesifisiä NE-estäjiä, on otettava huomioon, että ne saattavat myös estää vastaavia elastaasin kaltaisia ​​entsyymejä. Tässä suhteessa aktivoitujen ihmisen B-solujen raportoitiin ilmentävän trypsiinin kaltaista seriiniproteaasia solun pinnalla.(22) Loppuhuomautukset Aikaisemmin on osoitettu, että neutrofiilipeptidi-defensiinit tehostavat IgG:tä, mutta eivät IgA-vastetta nenän kautta annettuja rokoteantigeenejä vastaan.(23) Tässä tutkimus on osoittanut, että neutrofiilien elastaasin ja mahdollisesti muiden seriiniproteaasien, kuten B-soluelastaasin, seriiniproteaasiaktiivisuus osallistuu myös B-solubiologian ja adaptiivisen immuniteetin säätelyyn. Toisin kuin neutrofiilipeptididefensiinit, NE säätelee kuitenkin negatiivisesti B-lymfosyyttien erilaistumista IgG:tä ja IgA:ta erittäviksi soluiksi. AID:n esiintyminen yleensä parantaa vasta-ainepohjaista immuniteettia.(24).

   Korkeat neutrofiilit COVID-19-tartunnan saaneilla potilailla voivat aiheuttaa vakavia vaurioita keuhkokudokselle vapauttamalla myrkyllisiä proteaaseja ja reaktiivisia happilajeja, jos antiproteaasit eivät tasapainota niitä.

2. All-trans-retinoiinihapolla (RA) on hyödyllisiä vaikutuksia, kun sitä käytetään erilaisissa tulehduksellisissa ihosairauksissa. Tutkimuksessa tekijät havaitsivat, että RA esti superoksidianionien tuotantoa ja proteolyyttisten entsyymien vapautumista ihmisen ja rotan neutrofiileistä. Samanaikaisesti kirjoittajat havaitsivat, että RA-käsitellyt neutrofiilit kykenivät heikommin kuin käsittelemättömät neutrofiilit vahingoittamaan endoteelisoluja viljelmässä, vaikka RA-käsiteltyjen neutrofiilien adheesio endoteelisolujen yksikerroksisiin kerroksiin ei heikentynyt. Sytotoksisuuden esto tapahtui samalla pitoisuuksien alueella, joka esti happiradikaalin muodostumista ja proteaasin vapautumista. Lisätutkimuksissa havaittiin, että RA-indusoitujen endoteelisolujen esikäsittely aktivoituneiden neutrofiilien myöhemmälle vauriolle aiheutti resistenssin. Lopuksi in vivo -tutkimukset osoittivat, että rottien esikäsittely nivelreumalla (1-10 mg/vrk, IP) 3 päivän ajan vähensi keuhkojen ja ihon vaurioiden astetta naudan seerumin albumiinilla ja naudan seerumin albumiinin vasta-aineilla tehdyn hoidon jälkeen. käänteinen passiivinen Arthus-reaktio. Siten RA voi moduloida neutrofiilien välittämää endoteelisoluvauriota vaikuttamalla sekä neutrofiileihin että niiden kohdesoluihin. Yhdessä nämä vaikutukset voivat olla taustalla immuunikompleksivälitteisten vaurioiden vähenemisen koe-eläimillä. Retinoidien suotuisat vaikutukset erilaisissa tulehduksellisissa ihosairauksissa voivat myös olla heijastus niiden vaikutuksista sekä neutrofiilien että endoteelisolujen fysiologiaan.

Suun kautta otettava retinyylipalmitaatti tai retinoiinihappo korjaa limakalvon IgA-vasteita intranasaalista influenssavirusrokotetta kohtaan a-vitamiinin puutteesta kärsivillä hiirillä. Retinoidit estävät tulehduksellisia TH17-T-soluvasteita, edistävät sääteleviä T-soluvasteita (Treg) ja säätelevät toll-like-reseptorien (TLR:t) ilmentymistä.(57)

Niinpä päätutkija odottaa, että retinoiinihappo tehoaa covid-19-potilailla paremmin kuin toinen neutrofiilielastaasin estäjä, kuten Alvelestat, koska Attia et al (2018) osoittivat, että Sivelestat vähensi IgM:n eritystä annoksesta riippuvalla tavalla, IgM-tyyppistä vasta-aineet, jotka ovat erittäin tärkeitä viruksen neutraloinnissa, ja toisaalta retinoiinihappo pysäyttää neutrofiilien välittämän endoteelisoluvaurion vaikuttamalla sekä neutrofiileihin että niiden kohdesoluihin.

Toinen lääke on isotretinoiini (13cis RA), ja ATRA saattaa kyetä estämään COVID 2019 -infektiota indusoimalla antiviraalista immuniteettia, ja tästä keskustellaan seuraavasti:

Tutkimus osoitti, että 13 cis-retinoiinia käytetään emfyseeman hoidossa (emfyseema on keuhkosairaus, joka aiheuttaa hengenahdistusta), koska tehokas immuunivaste virusinfektioita vastaan ​​riippuu sytotoksisten T-solujen aktivoinnista, jotka voivat poistaa infektion tappamalla virustartunnan saaneet. T-solujen määrän ja toiminnan lisääminen COVID-19-potilailla on ratkaisevan tärkeää onnistuneen toipumisen kannalta. Tuoreen tutkimuksen mukaan 82,1 %:lla COVID-19-tapauksista oli alhainen kiertävien lymfosyyttien määrä. CoV infektoi makrofageja, ja sitten makrofagit esittelevät CoV-antigeenejä T-soluille. Tämä prosessi johtaa T-solujen aktivaatioon ja erilaistumiseen, mukaan lukien eri T-solujen alaryhmiin (Th17) liittyvien sytokiinien tuotanto, jota seuraa massiivinen sytokiinien vapautuminen immuunivasteen monistamiseksi. Näiden välittäjien jatkuvalla tuotannolla viruksen pysyvyyden vuoksi on negatiivinen vaikutus NK- ja CD8-T-solujen aktivaatioon.(25)

Äskettäin tehty tutkimus 522 COVID-potilaalla ja 40 terveellä kontrollilla kahdesta sairaalasta Wuhanissa Kiinassa osoitti, että T-solujen määrät korreloivat negatiivisesti seerumin IL-6-, IL-10- ja TNF-α-pitoisuuksiin, ja heikkenemisvaiheessa olevien potilaiden IL-6-pitoisuus oli vähentynyt. IL-10- ja TNF-a-pitoisuudet ja palautuneet T-solumäärät. COVID-19-potilaiden T-soluissa on huomattavasti korkeammat tasot PD-1:n loppuun ohjelmoitua solukuolemaproteiinia verrattuna terveyskontrolleihin. Lisäksi PD-1:n ja Tim-3:n ilmentymisen lisääntyminen T-soluissa voitiin nähdä, kun potilaat etenivät prodromaalisista vaiheista selvästi oireenmukaisiin vaiheisiin, mikä edelleen osoittaa T-solujen uupumusta. T-solujen uupumus on effektoritoiminnan asteittainen menetys pitkittyneen antigeenistimulaation vuoksi, mikä on ominaista kroonisille infektioille. Dendriittisolujen esto liittyy CD8+ T-solujen polyfunktionaalisuuden ehtymiseen kroonisen hepatiitti C -virusinfektion aikana. CD8 T-solut tuottavat erittäin tehokkaita välittäjäaineita nCoV2019:n poistamiseksi.(26)

Dendriittisoluilla (DC:t) on keskeinen rooli synnynnäisissä immuuni- ja adaptiivisissa immuunivasteissa. Organismin vahvimpina antigeenia esittelevinä soluina ne stimuloivat tehokkaasti T-lymfosyyttien ja B-lymfosyyttien aktivaatiota, mikä yhdistää synnynnäisen ja adaptiivisen immuniteetin. Epäkypsillä DC:illä on vahva migraatiokyky, ja kypsät DC:t voivat tehokkaasti aktivoida T-soluja immuunivasteiden käynnistyksen, säätelyn ja ylläpidon keskeisessä linkissä. Siten, kun DC:iden kypsymisprosessi on estetty, se vaikuttaa suoraan myöhemmän adaptiivisen immuunivasteen alkamiseen. MERS-CoV-2 pystyy vaikuttamaan ihmisen dendriittisoluihin ja makrofageihin in vitro. Lähi-idän hengitystieoireyhtymän koronaviruksen tuottava replikaatio monosyyteistä johdetuissa dendriittisoluissa moduloi synnynnäistä immuunivastetta.(27)

Toisessa tutkimuksessa ehdotettiin, että C-C-kemokiinireseptorityyppi 4 (CCR4) myötävaikuttaa T-solujen keuhkoihin suuntautumiseen. Havaittiin, että keuhkojen DC:t indusoivat CCR4:n ilmentymistä T-soluissa. Keuhkojen DC:iden aktivoimat T-solut kulkevat tehokkaammin keuhkoihin ja suojaavat influenssalta tehokkaammin verrattuna T-soluihin, jotka aktivoituvat muiden kudosten DC:illä. Lim ja kollegat ehdottivat, että CXCR4:llä on rooli CD8+ T-solujen migraatiossa hengitysteiden kudoksiin.(28)

Dendriittisolujen esto liittyy CD8+ T-solujen polyfunktionaalisuuden ehtymiseen kroonisen hepatiitti C -virusinfektion aikana. CD8 T-solut tuottavat erittäin tehokkaita välittäjäaineita nCoV2019:n poistamiseksi.(29)

RA:n esiintyminen eri kudoksissa on erittäin tärkeää immuuni-induktion ja virusinfektion torjunnan kannalta, esimerkiksi RA:ta esiintyy korkeina pitoisuuksina ohutsuolessa, koska suoliston epiteelisolut metaboloivat ravinnon A-vitamiinia. Tässä paikallisessa ympäristössä RA aktivoi ja esittelee dendriittisoluja (DC:t) CD103+ DC:iksi, jotka tuottavat RA:ta.3, 4CD103+ DC:t ovat vaeltavia soluja, jotka aktivoivat naiiveja T-soluja suoliliepeen imusolmukkeissa, jotta niistä tulee efektori-T-soluja, jotka edistävät sekä suoliston homeostaasia että immuniteetti.ja myös RA on tärkeä signaali, joka indusoi IgA:ta tuottavia B-soluja. Suolistoon suuntautuvilla T-soluilla ja B-soluilla on olennainen rooli ruuansulatuskanavan suojelemisessa taudinaiheuttajilta.(30) Retinoiinihappo (atRA) voi estää aktivoituneiden ihmisen T-lymfosyyttien spontaanin apoptoosin in vitro. 13-cis RA aktivoi Th2-sytokiinituotannon Lisääntynyt kiertävien dendriittisolujen määrä.(40)

Joten näiden aikaisempien tutkimusten mukaan päätutkija ehdottaa, että T-solujen lymfopenia ja uupumus voivat johtua dendriittisolujen (DCs) infektiosta ja MERS-CoV-2:n inhibitiosta.

Retinoiinihapolla on syvällinen vaikutus solujen lisääntymiseen ja erilaistumiseen. Lisäksi on raportoitu, että ATRA:lla on sekä anti-inflammatorisia että immunosäätelyvaikutuksia. Viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että ATRA voi tehostaa FOXP3:n ilmentymistä ja säätelevien T-solujen (Tregs) immuunitoimintaa sekä potilaiden että mikrofonin immuunijärjestelmässä.13Retinoiinihappoa (RA) tuottavat useat solutyypit, mukaan lukien makrofagit ja dendriittisolut, jotka ilmentävät verkkokalvon dehydrogenaaseja, jotka muuttavat A-vitamiinin pääasialliseksi biologisesti aktiiviseksi metaboliitiksi, all-trans RA:ksi. All-trans RA sitoutuu tumaretinoiinihapporeseptoreihinsa, jotka ilmentyvät lymfoidisoluissa ja toimivat transkriptiotekijöinä säätelemään solujen kohdistamista ja erilaistumista. CD103+-dendriittisolujen ja alveolaaristen makrofagien aiheuttama RA-tuotanto toimii TGF-b:n kanssa edistäen naiivien T-solujen muuttumista Foxp3+-säätely-T-soluiksi ja siten ylläpitäen limakalvon sietokykyä.(50) Niinpä päätutkija odottaa dendriittisolujen (DC:iden) suurta indusoitumista retinoiinihappokäsittelyllä, mikä johtaa T-solujen aktivaatioon ja migraatioon vähemmällä uupumusilmiöllä.

Tutkijat Wenzhousta Kiinasta tarkastelivat kliinisen laboratorion ominaisuuksia, mukaan lukien COVID 19 -potilaiden lipiditasoja. He havaitsivat COVID 19 -tartunnan saaneiden potilaiden kolesterolitasojen dramaattisen alenemisen terveisiin verrokkeihin verrattuna. Tutkimus antaa tietoja, jotka viittaavat siihen, että kolesterolitasot laskevat melko nopeasti infektion alkuvaiheessa ja nousevat potilaan toipumisen alkaessa. Siksi osoittaa, että kolesterolilla voi olla tärkeä rooli kehon puolustamisessa tällaisia ​​infektioita vastaan. Protokollamme mukaan aiemmista tutkimuksista riippuen päätutkija osoitti, että immuunijärjestelmän ja kolesterolitasojen välillä on vahva yhteys. :-

Solujen kolesteroli on osa plasmakalvoa ja se on myös välttämätön solujen lisääntymiselle. Solunsisäisten kolesterolitasojen säätelyä on ehdotettu mekanismiksi säätelemään T-solujen ja makrofagien lisääntymistä. Solunsisäistä kolesterolitasoa säätelee kaksi kilpailevaa reittiä, kolesterolin otto ja ulosvirtaus, ja ABCA1:llä on tärkeä rooli kolesterolin ulosvirtausreitissä. ATRA indusoi ABCA1:n ilmentymistä ja ABCA1-riippuvaista kolesterolin ulosvirtausta aktivoiduissa ihmisen primaarisissa CD4+ T-soluissa, mikä viittaa siihen, että RA voi vaikuttaa T-solujen toimintaan säätelemällä solujen kolesterolitasoja.(51) ATRA lisää ABCA1:n ilmentymistä vain aktivoiduissa CD4+ T-soluissa, mikä osoittaa, että ATRA:n ja 13cis-retinoiinihapon ABCA1:n induktiolla voi olla tärkeä rooli immuunivasteessa.

Retinoiinihappo ja maksan X-reseptorin agonisti estävät synergistisesti HIV-infektiota CD4+ T-soluissa säätelemällä ABCA1-välitteistä kolesterolin ulosvirtausta.(52)(53)

RA vaikuttaa myös suoraan makrofageihin sekä limakalvokohdissa että muissa immunologisissa kohdissa. AtRA moduloi vatsakalvon makrofagien aktivaatiota endotoksiinin ja IFN-y:n vaikutuksesta estämällä TNF:n tuotantoa ja typpioksidin (NO) synteesiä. Lisäksi RA estää PGE2:n ja COX-2:n ilmentymisen ja TNF:n vapautumisen, joita bakteerien lipopolysakkaridi indusoi ( LPS) hiiren vatsakalvon makrofageissa .(54)

Äskettäin tehdyssä tutkimuksessa raportoitiin, että aineella (ATRA) on ehkäiseviä vaikutuksia keuhkofibroosiin estämällä IL-6-riippuvaista proliferaatiota ja TGF-p1-riippuvaista trans-erilaistumista keuhkofibroblasteissa. Myös toiset tutkimukset osoittivat, että 13-cis-retinoiinihappo ja muut retinoidianalogit estävät IL-1:n indusoimaa IL-6:n tuotantoa ja että tämä vaikutus on analogispesifinen ja ainakin osittain transkription välittämä. Tämä vaikutus oli annoksesta riippuvainen, kun IC50 oli 10(-7) M RA, ja merkittävää estoa havaittiin niinkin alhaisilla RA-annoksilla kuin 10(-8) M. IL-10:n tuotanto esti ATRA:n antamisella.(55)

Tutkimus osoitti, että TLR3(-/-), TLR4(-/-) ja TRAM(-/-)-hiiret ovat herkempiä SARS-CoV:lle kuin villityypin hiiret, mutta heillä on vain ohimenevä painonpudotus ilman kuolleisuutta. infektio. Sitä vastoin hiiret, joista puuttuu TLR3/TLR4-adapteri TRIF, ovat erittäin alttiita SARS-CoV-infektiolle, ja niillä on lisääntynyt painonlasku, kuolleisuus, heikentynyt keuhkojen toiminta, lisääntynyt keuhkojen patologia ja korkeammat virustiitterit. Uudet tutkimukset osoittivat, että TLR3-IRF3/IRF7-reitin ja IFN-β:n korkea IFN-α/β-taso on syy DENV:n replikaation estämiseen. 13Cis-retinoiinihappo aiheutti merkittävän tietullin kaltaisen reseptorin 3 (TLR3) lisääntymisen, mikä johtaa immuunivasteeseen dsRNA-välituotteelle, joka voi osittain muodostua CoV-2:n replikaation aikana. TLR3 on herkistynyt dsRNA:lla ja signaalireittien (IRF:t ja NFKB) kaskadit aktivoituvat, vastaavasti. aktivoitu tuottamaan tyypin I IFN:iä.(56)

.

Suun kautta otettava retinyylipalmitaatti tai retinoiinihappo korjaa limakalvon IgA-vasteita intranasaalista influenssavirusrokotetta kohtaan a-vitamiinin puutteesta kärsivillä hiirillä. Retinoidit estävät tulehduksellisia TH17-T-soluvasteita, edistävät sääteleviä T-soluvasteita (Treg) ja säätelevät toll-like-reseptorien (TLR:t) ilmentymistä.(57) Ihmisen normaalien monosyyttien in vitro -käsittely all-trans-retinoiinihapolla (ATRA) vähentää TLR-2:n ilmentymistä (58), mutta tätä vaikutusta ei ole tutkittu potilailla, joita hoidettiin systeemisillä retinoideilla. Isotretinoiini (13-cis-retinoiinihappo; 13-cis RA) on ainoa lääke, joka pystyy indusoimaan aknen pitkäaikaisen tai pysyvän remission; tähän kestävään reaktioon johtavia mekanismeja ei kuitenkaan tunneta. Ottaen huomioon TLR-2:n roolin immuunivasteiden käynnistämisessä P. acnesille, oletimme, että TLR-2:n heikkeneminen monosyyteissä ja/tai Treg-vasteiden induktio in vivo voi edustaa mekanismeja, joilla isotretinoiini saa aikaan pitkäaikaisia ​​vaikutuksiaan. .

Isotretinoiini (13cis RA) saattaa kyetä estämään COVID 2019:n sisäänpääsyn ACE2:n, AT1-proteiinin ja Ang II -välitteisen solunsisäisen kalsiumin vapautumisen vaimennuksen kautta interleukiini-6:n (IL-6) estämisen sijaan, ja tästä keskustellaan seuraavasti:

Monet kirjoittajat ymmärtävät väärin eron ATR1-reseptoreita salpaavien ARB-lääkkeiden ja oletetun lääkkeen välillä, joka voisi estää COVID-19:n sitoutumiskohdan ACE2-reseptorissa, joka on täysin erilainen kuin ATR1 ja 2.

SARS-COV-2:n aiheuttama COVID-19-pandemia on tartuttanut yli 2 000 000 ihmistä ja aiheuttanut yli 150 000 kuolemaa.(59) Keskeinen isäntäsoluproteiini, jota tarvitaan viruksen sisäänpääsyyn, on angiotensiiniä konvertoiva entsyymi 2 (ACE2), jonka ilmentymistä on osoitettu monissa kudoksissa, mukaan lukien keuhkojen, suun limakalvojen ja suolistossa, sydämessä, munuaisissa, endoteelissä ja ihossa olevissa alveolaarisissa epiteelisoluissa. ACE2:ta ilmentävät solut voivat toimia kotisoluina ja ovat alttiita SARS-CoV-2-infektiolle, koska ACE2-reseptori helpottaa viruksen pääsyä soluun ja replikaatiota.(60) Tutkimus osoitti, että potilailla, joilla on korkea verenpaine ja diabetes mellitus, saattaa olla suurempi riski saada SARS-CoV-2-infektio, koska näitä potilaita hoidetaan usein ACE:n estäjillä (ACEI) tai angiotensiini II tyypin I reseptorin salpaajilla (ARB). aiemmin ehdotettu lisäävän ACE2:n ilmentymistä.(61) Toisessa tutkimuksessa Sinha et al, jotka analysoivat julkisesti saatavilla olevaa Connectivity Map (CMAP) -tietosarjaa transkriptioiden edeltävistä ja jälkeisistä profiileista lääkehoitoa varten solulinjoissa yli 20 000 pienelle molekyylille, isotretinoiini oli vahvin ACE 2 -reseptorien säätelijä. Toisaalta he löysivät CMAP:sta kuusi lääkettä, joita tutkitaan parhaillaan COVID-19:n hoitoon tarkoitetuissa kliinisissä tutkimuksissa (klorokiini, talidomidi, metyyliprednisoloni, losartaani, lopinaviiri ja ritonaviiri, Clinictrials.gov), yhdenkään niistä ei havaittu merkittävästi muuttavan ACE2:n ilmentymistä (P>0,1) Lisäksi toinen tutkimus osoitti, että isotretinoiini on mahdollinen papaiinin kaltainen proteaasin (PLpro) inhibiittori, joka on SARS-CoV-2-geenien koodaama proteiini, jota pidetään yhtenä proteiineista, johon COVID-19-hoidossa tulisi kohdistua kohdepohjaisen virtuaalisen hoidon avulla. ligandiseulonta. Kuten päätutkija aiemmin mainitsi, (13cRA) on vahvin ACE2:n alasäätäjä.

Päätutkija odottaa, että 13cRA voi inhiboida tai laskea ACE2:ta suoran vuorovaikutuksen ja transmembraanisen ACE2:n kanssa sitoutumisen kautta, mikä viittaa sen terapeuttiseen potentiaaliin estää COVID 2019:n pääsyn isäntäsoluun.

Aiemmat tutkimukset vastaavasta vakavasta akuutista hengitystieoireyhtymästä koronaviruksesta (SARS-CoV) ja SARS-CoV FP FP:stä ovat osoittaneet, että kalsiumilla (Ca2+) on tärkeä rooli fusogeenisessa aktiivisuudessa Ca2+:aa sitovan taskun kautta, jossa on säilynyt glutamiinihappo (E) ja asparagiinihappo. (D) tähteet osoittivat, että solunsisäinen Ca2+ tehostaa MERS-CoV WT PP -infektiota noin kaksinkertaisesti ja että E891 on ratkaiseva jäännös Ca2+-vuorovaikutukselle. Elektronispin resonanssi paljasti, että tämä parannus voi johtua Ca2+:n lisäämisestä MERS-CoV FP -fuusion kannalta merkitykselliseen kalvojärjestykseen. Kiehtovaa on, että isoterminen kalorimetrinen titraus osoitti, että MERS-CoV FP sitoo yhden Ca2+:n, toisin kuin SARS-CoV FP, joka sitoutuu kahteen Ca2+-ioniin.(62)

Angiotensiini II lisää solunsisäistä kalsiumaktiivisuutta ehjän glomeruluksen podosyyteissä. L-tyypin Ca2+-kanavan salpaaja nikardipiini ei vaikuttanut Ang II-välitteiseen [Ca2+]-lisääntymiseen, ja on oletettu, että SARS-CoV-2:n sitoutuminen ACE2:een saattaa heikentää ACE2-jäännösaktiivisuutta ja vääristää ACE/ACE2-tasapainon tilaan. kohonnut angiotensiini II -aktiivisuus, joka johtaa keuhkojen vasokonstriktioon ja tulehduksellisiin ja oksidatiivisiin elinvaurioihin, mikä lisää akuutin keuhkovaurion (ALI) riskiä. AngII säätelee AT1-reseptorien kautta monia proinflammatorisia geenejä, kuten vaskulaaristen solujen adheesiomolekyyli-1 (VCAM-1), solujen välinen adheesiomolekyyli-1 (ICAM-1), interleukiini-6 (IL-6).30 mutta 13cis RA vähensi spesifisesti AT1-proteiinia annoksesta ja ajasta riippuvaisella tavalla. AT1:n ilmentymisen väheneminen johtaa vähentyneeseen AngII-välitteiseen solunsisäiseen kalsiumin vapautumiseen Samoin kuin reseptorin vaimeneminen, hoito 13cRA:lla johti AT1-mRNA:n merkittävään vähenemiseen.(63)

Lopuksi päätutkija odottaa, että isotretinoiini auttaa vasta-aineiden induktiossa COVID-19:ää vastaan ​​indusoimalla erilaisia ​​antiviraalisia immuunitekijöitä ja myös vähentämällä COVID-19 hypermutaatiota salpaamalla sen ACE2-reseptoreita ja estämällä viruksen pääsyn soluun ja replikaatioon sekä tämä antaa immuunijärjestelmälle aikaa tunnistaa COVID-19.