Terapia de combinación en aerosol de ácido retinoico todo trans e isotretinoína como un tratamiento novedoso para inducir anticuerpos neutralizantes en pacientes infectados con COVID-19 mejor que la vacuna: un tratamiento innovador (Antibodies)

Este es un estudio de fase 2, aleatorizado (1:1:1), controlado con placebo, de 2 semanas, de prueba de concepto para evaluar la seguridad y la tolerabilidad, así como el efecto mecánico de la administración oral de un potente inhibidor de neutrófilos. elastasa (ácido retinoico todo trans inhalado e isotretinoína inhalada en sujetos infectados con COVID -19

Desafortunadamente, todos los monos vacunados tratados con la vacuna Oxford conocida como ChAdOx1 nCoV-19 se están sometiendo a pruebas en humanos en Gran Bretaña. infectados cuando se desafiaron según lo juzgado por la recuperación del ARN genómico del virus de las secreciones nasales", dijo el Dr. William Haseltine, exprofesor de la Escuela de Medicina de Harvard que tuvo un papel fundamental en el desarrollo de los primeros tratamientos contra el VIH/SIDA. y, en general, la futura vacunación contra el COVID-19 que depende de la vacuna viral inactivada se restringirá a personas sanas con inmunidad fuerte y no se administrará a pacientes con antecedentes de contacto con una infección por SARS-CoV-2 (positivo en prueba de ácido nucleico) . Además de la COVID-19, los antígenos virales conducen a estimular la formación de anticuerpos de tipo IgM en la fase aguda y de tipo IgG en la fase crónica, lo que facilita la entrada viral y la fusión con la célula infectada a través de la captación del complejo virus-IgG a través de la familia de receptores Fc y la fusión viral posterior con células presentadoras de antígenos como macrófagos, células B, monocitos a través de la familia FcR y endotelio vascular a través del receptor Fc neonatal (nFcR) en lugar de la aglutinación viral inducida por anticuerpos y esto se conoce como mejora dependiente de anticuerpos (ADE) (2).

Hay varias hipótesis sobre cómo ocurre el ADE y existe la probabilidad de que exista más de un mecanismo. En una de esas vías, algunas células del sistema inmunitario carecen de los receptores habituales en sus superficies que utiliza el virus para entrar, pero tienen receptores Fc que se unen a un extremo de los anticuerpos. El virus se une al sitio de unión al antígeno en el otro extremo y, de esta manera, logra ingresar e infectar la célula inmunitaria. El virus del dengue puede usar este mecanismo para infectar macrófagos humanos, si hubo una infección previa con una cepa diferente del virus, lo que hace que una infección viral normalmente leve se convierta en una amenaza para la vida.(3) Una pregunta constante en la pandemia de COVID-19 es si, y en qué medida, el COVID-19 recibe ADE de una infección previa con otros coronavirus.

ADE puede obstaculizar el desarrollo de vacunas: ADE puede obstaculizar el desarrollo de vacunas, ya que una vacuna puede causar la producción de anticuerpos que, a través de ADE, empeoran la enfermedad contra la que la vacuna está diseñada para proteger. Las vacunas candidatas para el virus del dengue y el virus de la peritonitis infecciosa felina (un coronavirus felino) tuvieron que suspenderse porque provocaban ADE.(4)

ADE en la infección por coronavirus puede ser causado por una alta tasa de mutación del gen que codifica la proteína de pico (S). Un análisis exhaustivo de la variabilidad de los aminoácidos en las proteínas del virus SARS-CoV-2, que incluía la proteína S, reveló que los aminoácidos menos conservativos se encuentran en la mayoría de los fragmentos expuestos de la proteína S, incluido el dominio de unión al receptor (RBD).(5) La respuesta y secreción retardada de anticuerpos después del inicio de los síntomas de covid-19 es responsable de la mejora dependiente de anticuerpos (ADE)

Un estudio muestra que el primer día de seroconversión de IgA fue 2 días después del inicio de los síntomas iniciales, y el primer día de seroconversión de IgM e IgG fue 5 días después del inicio. La tasa de positividad de anticuerpos en las 183 muestras fue del 98,9%, 93,4% y 95,1%, para IgA, IgM e IgG, respectivamente. La tasa de seroconversión para IgA, IgM o IgG fue del 100% 32 días después del inicio de los síntomas. Según la curva de seroconversión acumulada, la mediana del tiempo de conversión para IgA, IgM e IgG fue de 13, 14 y 14 días, respectivamente. (6)

Debido a que esta respuesta inmunitaria tarda un tiempo en aparecer, las pruebas de anticuerpos serán negativas para las personas recién infectadas con COVID-19, razón por la cual no se utilizan para el diagnóstico.

"Si es el comienzo de la infección, no la contraes, es algo que solo se desarrolla más tarde", dijo la Dra. Melanie Ott, viróloga e inmunóloga de los Institutos Gladstone y profesora de la Universidad de California, San Francisco. (7)

Por lo tanto, el investigador principal espera que la respuesta retardada de anticuerpos y el cambio retardado de clase de inmunoglobulina sean la razón principal de la infectividad y falta de especificidad de los anticuerpos en la infección por covid-19 altamente mutada.

Los anticuerpos IgG de alta afinidad pueden resolver de manera eficiente la infección por Covid-19

Las más de 100 vacunas contra la COVID-19 en desarrollo se centran principalmente en otra respuesta inmunitaria: los anticuerpos. Estas proteínas están hechas por células B e idealmente se adhieren al SARS-CoV-2 y evitan que ingrese a las células. Las células T, por el contrario, frustran las infecciones de dos maneras diferentes. Las células T auxiliares estimulan la acción de las células B y otros defensores inmunitarios, mientras que las células T asesinas atacan y destruyen las células infectadas. La gravedad de la enfermedad puede depender de la fuerza de estas respuestas de células T(1).

Los estudios sobre las respuestas humorales a las infecciones se han orientado principalmente a la producción de anticuerpos IgG de alta afinidad que resuelven eficazmente una infección. Sin embargo, se ha reconocido ampliamente que la respuesta inmunitaria humoral a la infección puede ser un arma de doble filo que sirve como mecanismo de protección para resolver la infección o agrava la lesión tisular, p. La respuesta de IgG causa una lesión pulmonar aguda mortal al sesgar la respuesta de resolución de la inflamación en el SARS.(8)

En el caso de la infección respiratoria, mientras que los isotipos IgM e IgG han sido el énfasis principal en la caracterización de la inmunidad, las respuestas IgA mucosas y sistémicas que pueden jugar un papel crítico en la patogénesis de la enfermedad, han recibido mucha menos atención.(9),(11)

Los neutrófilos altos en la infección por covid-19 pueden ser la razón de la respuesta retardada de anticuerpos y complicaciones graves

La respuesta inmune humoral, especialmente la producción de anticuerpos neutralizantes, juega un papel protector al limitar la infección en la fase posterior y previene la reinfección en el futuro. En el SARS-CoV, los epítopos de células T y B se mapearon ampliamente para las proteínas estructurales, proteína S, N, M y E.(12) Se informaron detalles serológicos limitados de SARS-CoV-2. En un estudio preliminar, un paciente mostró un pico de IgM específico el día 9 después del inicio de la enfermedad y el cambio a IgG en la semana 2.25 Curiosamente, los sueros de 5 pacientes con COVID-19 confirmado muestran cierta reactividad cruzada con el SARS-CoV, pero no con otros coronavirus. . Además, todos los sueros de los pacientes pudieron neutralizar el SARS-CoV-2 en un ensayo de placa in vitro, lo que sugiere un posible montaje exitoso de las respuestas humorales.(13) Queda por investigar si la cinética/título del anticuerpo específico se correlaciona con la gravedad de la enfermedad.(14)

En casos graves de enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19), la neumonía viral progresa a insuficiencia respiratoria. Las trampas extracelulares de neutrófilos (NET) son redes extracelulares de cromatina, proteínas microbicidas y enzimas oxidantes que liberan los neutrófilos para contener infecciones. Sin embargo, cuando no se regulan adecuadamente, los NET tienen el potencial de propagar la inflamación y la trombosis microvascular, incluso en los pulmones de pacientes con síndrome de dificultad respiratoria aguda. Si bien los niveles elevados de neutrófilos en sangre predicen peores resultados en COVID-19, no se ha investigado el papel de los NET. Ahora informamos que los sueros de pacientes con COVID-19 (n = 50 pacientes, n = 84 muestras) tienen niveles elevados de ADN libre de células, mieloperoxidasa (MPO)-ADN e histona citrulinada H3 (Cit-H3); los dos últimos son marcadores altamente específicos de TNE.(15)

Los neutrófilos son células sofisticadas capaces de adaptarse a la inflamación cambiante

Los neutrófilos no son simples bolsas de enzimas enviadas para matar patógenos antes de que las células inmunitarias adaptativas se muevan. De hecho, son capaces de responder al estado inflamatorio alterado; los neutrófilos pueden producir citocinas, alterar su expresión génica durante la inflamación y durante el "envejecimiento" y sobrevivir durante mucho más tiempo de lo que se pensaba tradicionalmente, con un estudio que sitúa la vida útil de la médula ósea en 5,4 días. Como consecuencia, los neutrófilos pueden adaptarse a condiciones cambiantes y dirigir el comportamiento de otras células, una tarea que pueden realizar con cierta sofisticación.

Hay una serie de modelos murinos en los que las respuestas de las células T pueden verse exacerbadas por el agotamiento de los neutrófilos, lo que implica que tienen un papel regulador. Esta supresión de las respuestas de las células T por parte de los neutrófilos requiere un contacto cercano y el desarrollo de una sinapsis inmunológica, tal vez como los mediadores pensaron que las especies reactivas del oxígeno y el H2O2 no se difunden mucho. La captación de neutrófilos apoptóticos o necróticos también inhibe la presentación y la coestimulación del antígeno DC, lo que da como resultado respuestas reducidas de las células T, una situación que pueden aprovechar los patógenos. Por ejemplo, los neutrófilos capturan L. major y luego son absorbidos por las DC, lo que suprime la presentación de antígenos y el cebado de células T.

También se demostró que la NE inhibe la maduración y la función de las células dendríticas, incluida la expresión de las moléculas coestimuladoras CD40, CD80 y CD86. Las secreciones pulmonares inflamatorias inhiben la maduración y la función de las células dendríticas a través de la elastasa de neutrófilos.(16)

Inhibidor de la elastasa en la infección por covid-19:

1. Alvelestat fue desarrollado como tratamiento para enfermedades pulmonares como la Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica. Alevelestat actúa bloqueando ciertas proteínas en el cuerpo que son responsables de la inflamación y el daño a los pulmones que pueden provocar síntomas de EPOC.

   Alvelestat El inhibidor de la elastasa estimula la diferenciación de los linfocitos B murinos en células productoras de IgG e IgA a través del cambio de clase de inmunoglobulina y la inducción también conocida como cambio de isotipo, conmutación isotípica o recombinación de cambio de clase (CSR), es un mecanismo biológico que cambia la producción de células B de inmunoglobulina de un tipo a otro, como del isotipo IgM al isotipo IgG

   Un estudio demostró que el agotamiento de los neutrófilos mejora la producción de IgA e IgG en la mucosa después de la inmunización sublingual con la toxina del edema de Bacillus anthracis como adyuvante. Estos estudios anteriores también demostraron que existe una correlación inversa entre el número de neutrófilos y la producción de IgA por parte de las células B. Usando inhibidores específicos de elastasa, analizamos si la actividad elastasa de los neutrófilos podría ser el factor que interfiere con la producción de IgA y posiblemente con otros isotipos de inmunoglobulina. Encontramos que los esplenocitos murinos y las células de los ganglios linfáticos mesentéricos cultivadas durante 5 días en presencia de inhibidores de la elastasa de neutrófilos secretaron niveles más altos de IgG e IgA que las células cultivadas en ausencia de inhibidores y también, sin embargo, este tratamiento aumentó la frecuencia de células T CD4+. .(17) Como virus dirigido a las mucosas, se esperaría que el SARS-CoV-2 genere IgA secretora (sIgA) e induzca una fuerte inmunidad en las mucosas. De hecho, se ha demostrado que la inmunidad antiviral de la mucosa resulta en parte de las interacciones mediadas por IgA con los microorganismos patógenos para evitar que los patógenos se adhieran a la superficie celular.(17) La producción de IgA regulada al alza puede ser el resultado de mayores niveles de TGF-β e IL-10 que promueven el cambio de anticuerpos en la infección por SARS-CoV-2.(17) Un estudio informó que el agotamiento de los neutrófilos antes de la inyección sistémica de vacunas aumentó la magnitud de las respuestas de células T CD4+ específicas de antígeno y los niveles de respuestas de IgG séricas específicas de antígeno.(18)

   Se encontró que Alvelestat y Sivelestat estimulan la síntesis de ARNm de AID. Los inhibidores de NE también indujeron la expresión de ARNm de BAFF, APRIL e IL-10 de manera dependiente de la dosis. Se demostró que la elastasa de neutrófilos y las serina proteasas catepsina G y proteinasa 3 relacionadas regulan las respuestas de las citocinas a través de la activación o degradación de las citocinas, los receptores de citocinas o el receptor tipo toll.(18) Esto es consistente con nuestro hallazgo de que los inhibidores de NE estimulan la expresión de IL-10, pero también BAFF y APRIL en cultivos de esplenocitos. Se informó que IL-10 regula la expresión de AID para la inducción de Ig CSR. (19) y está bien establecido que la IL-10 facilita el cambio de clase de Ig para la producción de IgA (20). Por lo tanto, estos datos sugieren que los inhibidores de NE estimulan la producción de anticuerpos mediante la estimulación de AID y la inhibición de la activación/degradación de citoquinas y receptores de citoquinas por elastasa. También se demostró que la NE inhibe la maduración y la función de las células dendríticas, incluida la expresión de las moléculas coestimuladoras CD40, CD80 y CD86 (21). Por lo tanto, la presencia de inhibidores de neutrófilos puede haber promovido la maduración de las células dendríticas y su expresión BAFF y APRIL y quizás moléculas coestimuladoras (es decir, CD40) para aumentar la producción de anticuerpos. Aunque Alvelestat y Sivelestat son inhibidores específicos de NE, se debe considerar que también pueden inhibir enzimas similares a la elastasa relacionadas. En este sentido, se informó que las células B humanas activadas expresan una serina proteasa similar a la tripsina en la superficie celular.(22) Observaciones finales Se demostró previamente que las defensinas peptídicas de los neutrófilos mejoran las respuestas de IgG, pero no de IgA, contra los antígenos de vacunas coadministrados por vía nasal.(23) Aquí, el estudio ha demostrado que la actividad de la serina proteasa de la elastasa de neutrófilos, y posiblemente otra serina proteasa como la elastasa de células B, también participa en la regulación de la biología de las células B y la inmunidad adaptativa. Sin embargo, a diferencia de las defensinas peptídicas de los neutrófilos, la NE regula negativamente la diferenciación de los linfocitos B en células secretoras de IgG e IgA. La presencia de AID generalmente mejora la inmunidad basada en anticuerpos. (24).

   Los neutrófilos altos en pacientes infectados con COVID-19 son capaces de causar daños severos al tejido pulmonar al liberar proteasas tóxicas y especies reactivas de oxígeno si no se contrarrestan con las antiproteasas.

2. El ácido retinoico todo trans (RA) tiene efectos beneficiosos cuando se usa en una variedad de afecciones inflamatorias de la piel. En un estudio, los autores encontraron que la AR inhibía la producción de aniones superóxido y la liberación de enzimas proteolíticas por parte de los neutrófilos humanos y de ratas. Al mismo tiempo, los autores encontraron que los neutrófilos tratados con AR tenían menos capacidad que los neutrófilos no tratados para dañar las células endoteliales en cultivo, aunque la adhesión de los neutrófilos tratados con AR a las monocapas de células endoteliales no disminuyó. La inhibición de la citotoxicidad ocurrió en el mismo rango de concentraciones que inhibía la formación de radicales de oxígeno y la liberación de proteasa. En estudios adicionales, se observó que el pretratamiento de las células endoteliales con resistencia inducida por AR a la lesión posterior por neutrófilos activados. Finalmente, los estudios in vivo mostraron que el pretratamiento de ratas durante 3 días con AR (1-10 mg/día, IP) redujo el grado de lesión en los pulmones y la piel después del tratamiento con albúmina sérica bovina y anticuerpos contra la albúmina sérica bovina en el Reacción de Arthus pasiva inversa. Por tanto, la AR puede modular la lesión de las células endoteliales mediada por neutrófilos mediante un efecto sobre los neutrófilos y sus células diana. Juntos, estos efectos pueden ser la base de la reducción de la lesión mediada por inmunocomplejos observada en animales de experimentación. Los efectos beneficiosos que tienen los retinoides en una variedad de enfermedades inflamatorias de la piel también pueden ser un reflejo de sus efectos sobre la fisiología tanto de los neutrófilos como de las células endoteliales.

El palmitato de retinilo oral o el ácido retinoico corrigen las respuestas de IgA de la mucosa hacia una vacuna intranasal contra el virus de la influenza en ratones con deficiencia de vitamina a. Los retinoides inhiben las respuestas inflamatorias de las células T TH17, promueven las respuestas de las células T reguladoras (Treg) y regulan la expresión de los receptores tipo toll (TLR) .(57)

Por lo tanto, el investigador principal espera que el ácido retinoico sea más efectivo en pacientes con covid-19 que otros inhibidores de la elastasa de neutrófilos como Alvelestat porque Attia et al (2018) demostraron que Sivelestat redujo la secreción de IgM de manera dependiente de la dosis, tipo IgM de anticuerpos que es muy importante en la neutralización viral y, por otro lado, el ácido retinoico detiene la lesión de las células endoteliales mediada por neutrófilos por un efecto tanto en los neutrófilos como en sus células diana.

El fármaco secundario es la isotretinoína (13cis RA) y ATRA puede inhibir la infección por COVID 2019 mediante la inducción de la inmunidad antiviral y esto se analiza a continuación:

Un estudio demostró que el retinoico 13 cis se usa para tratar el enfisema (el enfisema es una afección pulmonar que causa dificultad para respirar), ya que una respuesta inmunitaria eficaz contra las infecciones virales depende de la activación de las células T citotóxicas que pueden eliminar la infección al matar a los infectados por el virus. células, aumentar el número y la función de las células T en pacientes con COVID-19 es fundamental para una recuperación exitosa. Un estudio reciente informó que el 82,1 % de los casos de COVID-19 mostraban recuentos bajos de linfocitos circulantes. Un CoV infecta a los macrófagos y luego los macrófagos presentan antígenos de CoV a las células T. Este proceso conduce a la activación y diferenciación de las células T, incluida la producción de citocinas asociadas con los diferentes subconjuntos de células T (Th17), seguida de una liberación masiva de citocinas para la amplificación de la respuesta inmunitaria. La producción continua de estos mediadores debido a la persistencia viral tiene un efecto negativo sobre la activación de las células T NK y CD8.(25)

Un estudio reciente de 522 pacientes con COVID y 40 controles sanos de dos hospitales en Wuhan, China, demostró que el número de células T se correlaciona negativamente con la concentración sérica de IL-6, IL-10 y TNF-α, y los pacientes en período de declive muestran una reducción de IL-6 , concentraciones de IL-10 y TNF-α y recuentos de células T restaurados. Las células T de pacientes con COVID-19 tienen niveles significativamente más altos del marcador agotado de proteína de muerte celular programada (PD-1) en comparación con los controles de salud. Además, se pudo observar un aumento de la expresión de PD-1 y Tim-3 en las células T a medida que los pacientes progresaban de etapas prodrómicas a etapas manifiestamente sintomáticas, lo que indica aún más el agotamiento de las células T. El agotamiento de las células T es una pérdida progresiva de la función efectora debido a la estimulación antigénica prolongada, característica de las infecciones crónicas. La inhibición de las células dendríticas está relacionada con el agotamiento de la polifuncionalidad de las células T CD8+ durante la infección crónica por el virus de la hepatitis C. Las células T CD8 producen mediadores muy efectivos para eliminar nCoV2019.(26)

Las células dendríticas (DC) juegan un papel clave en las respuestas inmunitarias innatas e inmunitarias adaptativas. Como las células presentadoras de antígenos más potentes del organismo, estimulan eficazmente la activación de los linfocitos T y los linfocitos B, combinando así la inmunidad innata y la adaptativa. Las DC inmaduras tienen una fuerte capacidad de migración, y las DC maduras pueden activar eficazmente las células T en el enlace central de inicio, regulación y mantenimiento de las respuestas inmunitarias. Por lo tanto, una vez que se bloquea el proceso de maduración de las CD, afecta directamente el inicio de la respuesta inmune adaptativa posterior. El MERS-CoV-2 puede afectar las células dendríticas y los macrófagos humanos in vitro. La replicación productiva del coronavirus del síndrome respiratorio de Oriente Medio en células dendríticas derivadas de monocitos modula la respuesta inmunitaria innata.(27)

Otro estudio propuso que el receptor de quimiocinas C-C tipo 4 (CCR4) contribuye a la impronta de localización pulmonar de células T. Se encontró que las CD de pulmón inducen la expresión de CCR4 en las células T. Los linfocitos T activados por las CD pulmonares circulan de manera más eficiente hacia el pulmón y protegen contra la influenza de manera más efectiva en comparación con las células T activadas por las CD de otros tejidos. Lim y sus colegas sugirieron que CXCR4 juega un papel en la migración de células T CD8+ a los tejidos de las vías respiratorias.(28)

La inhibición de las células dendríticas está relacionada con el agotamiento de la polifuncionalidad de las células T CD8+ durante la infección crónica por el virus de la hepatitis C. Las células T CD8 producen mediadores muy efectivos para eliminar nCoV2019.(29)

La presencia de AR en diferentes tejidos es muy importante para la inducción inmunológica y la lucha contra la infección viral, por ejemplo, la AR está presente en altas concentraciones en el intestino delgado debido al metabolismo de la vitamina A de la dieta por parte de las células epiteliales intestinales. En este entorno local, la AR activa y prepara las células dendríticas (DC) para convertirse en CD103+ DC que producen AR.3, 4CD103+ DC son células migratorias que activan las células T vírgenes en los ganglios linfáticos mesentéricos para convertirse en células T efectoras que contribuyen a la homeostasis intestinal y inmunidad.y además, la AR es una señal importante que induce a las células B productoras de IgA. Las células T y las células B alojadas en el intestino juegan un papel esencial en la protección del tracto digestivo de los patógenos.(30) El ácido retinoico (atRA) puede inhibir la apoptosis espontánea de los linfocitos T humanos activados in vitro. 13-cis RA activa la producción de citoquinas Th2 Mayor número de células dendríticas circulantes.(40)

Entonces, de acuerdo con estos estudios previos, el investigador principal sugiere que la linfopenia y el agotamiento de las células T pueden ser el resultado de la infección e inhibición de las células dendríticas (DC) por MERS-CoV-2.

El ácido retinoico tiene profundos efectos sobre la proliferación y diferenciación celular. Además, se ha informado que ATRA exhibe efectos antiinflamatorios e inmunorreguladores. Estudios recientes han demostrado que ATRA puede mejorar la expresión de FOXP3 y la función inmunitaria de las células T reguladoras (Tregs) en el sistema inmunitario de pacientes y mic.13 El ácido retinoico (AR) es producido por varios tipos de células, incluidos los macrófagos y células dendríticas, que expresan deshidrogenasas retinianas que convierten la vitamina A en su principal metabolito biológicamente activo, todo-trans RA. All-trans RA se une a sus receptores de ácido retinoico nuclear que se expresan en las células linfoides y actúan como factores de transcripción para regular el alojamiento y la diferenciación celular. La producción de AR por las células dendríticas CD103+ y los macrófagos alveolares funciona con TGF-b para promover la conversión de células T vírgenes en células T reguladoras Foxp3+ y, por lo tanto, mantener la tolerancia de la mucosa.(50) Por lo tanto, el investigador principal espera una alta inducción de células dendríticas (DC) mediante el tratamiento con ácido retinoico que conducirá a la activación y migración de células T con un fenómeno de agotamiento menor.

Investigadores de Wenzhou, China, observaron características de laboratorio clínico, incluidos los niveles de lípidos de pacientes con COVID 19. Encontraron reducciones dramáticas en los niveles de colesterol de los pacientes infectados con COVID 19, en comparación con los controles sanos. El estudio proporciona datos que sugieren que los niveles de colesterol disminuyen con bastante rapidez durante las primeras etapas de la infección y aumentan a medida que el paciente comienza a recuperarse. Por lo tanto, indica que el colesterol puede desempeñar un papel importante en la defensa del cuerpo contra tales infecciones. Según nuestro protocolo, según estudios previos, el investigador principal demostró que existe una fuerte relación entre el sistema inmunitario y los niveles de colesterol. :-

El colesterol celular es un componente de la membrana plasmática y también es esencial en la proliferación celular. La regulación de los niveles de colesterol intracelular se ha propuesto como un mecanismo para regular la proliferación de células T y macrófagos. El nivel de colesterol intracelular está regulado por dos vías en competencia, la captación y el eflujo de colesterol, y ABCA1 juega un papel importante en la vía de eflujo de colesterol. El ATRA induce la expresión de ABCA1 y la salida de colesterol dependiente de ABCA1 en células T CD4+ humanas primarias activadas, lo que implica que la AR podría afectar las funciones de las células T al regular los niveles de colesterol celular.(51) ATRA aumenta la expresión de ABCA1 solo en células T CD4+ activadas, lo que indica que la inducción de ABCA1 por ATRA y el ácido retinoico 13 cis puede desempeñar un papel importante en la respuesta inmunitaria.

El ácido retinoico y el agonista del receptor X del hígado inhiben sinérgicamente la infección por VIH en las células T CD4+ mediante la regulación al alza de la salida de colesterol mediada por ABCA1.(52)(53)

La AR también actúa directamente sobre los macrófagos tanto en sitios mucosos como en otros sitios inmunológicos. AtRA modula la activación de los macrófagos peritoneales por endotoxina e IFN-γ al suprimir la producción de TNF y la síntesis de óxido nítrico (NO). Además, at RA inhibe la expresión de PGE2 y COX-2 y la liberación de TNF, que son inducidas por el lipopolisacárido bacteriano ( LPS) en macrófagos peritoneales murinos.(54)

Un estudio informó recientemente que la sustancia (ATRA) tiene efectos preventivos sobre la fibrosis pulmonar al inhibir la proliferación dependiente de IL-6 y la diferenciación trans dependiente de TGF-β1 de fibroblastos pulmonares. Además, otros estudios demostraron que el ácido 13-cis-retinoico y otros análogos de retinoides inhiben la producción de IL-6 inducida por IL-1 y que este efecto es específico del análogo y, al menos parcialmente, mediado transcripcionalmente. Este efecto fue dependiente de la dosis con un IC50 de 10(-7) M RA y se observó una inhibición significativa con dosis de RA tan bajas como 10(-8) M. La producción de IL-10 fue inhibida por la administración de ATRA.(55)

Un estudio demostró que los ratones TLR3(-/-), TLR4(-/-) y TRAM(-/-) son más susceptibles al SARS-CoV que los ratones de tipo salvaje, pero solo experimentan una pérdida de peso transitoria sin mortalidad en respuesta a infección. Por el contrario, los ratones deficientes en el TRIF del adaptador TLR3/TLR4 son muy susceptibles a la infección por SARS-CoV y muestran una mayor pérdida de peso, mortalidad, función pulmonar reducida, mayor patología pulmonar y títulos virales más altos. Nuevos estudios demostraron que el alto nivel de IFN-α/β producido a partir de la vía TLR3-IRF3/IRF7 e IFN-β es la razón por la que se inhibe la replicación del DENV. El ácido retinoico 13Cis indujo una regulación positiva significativa del receptor tipo toll 3 (TLR3) que da como resultado una respuesta inmune al intermediario de dsRNA que puede generarse parcialmente durante la replicación de CoV-2 TLR3 sensibilizado por dsRNA y cascadas de vías de señalización (activación de IRF y NFκB, respectivamente) son activado para producir IFN tipo I.(56)

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El palmitato de retinilo oral o el ácido retinoico corrigen las respuestas de IgA de la mucosa hacia una vacuna intranasal contra el virus de la influenza en ratones con deficiencia de vitamina a. Los retinoides inhiben las respuestas inflamatorias de las células T TH17, promueven las respuestas de las células T reguladoras (Treg) y regulan la expresión de los receptores tipo toll (TLR) .(57) El tratamiento in vitro de monocitos humanos normales con ácido retinoico todo trans (ATRA) regula a la baja la expresión de TLR-2 (58), pero este efecto no se ha examinado en pacientes tratados con retinoides sistémicos. La isotretinoína (ácido retinoico 13-cis; RA 13-cis) es el único fármaco capaz de inducir una remisión permanente oa largo plazo del acné; sin embargo, se desconocen los mecanismos que conducen a esta respuesta duradera. Dada la función de TLR-2 en el inicio de las respuestas inmunitarias frente a P. acnes, planteamos la hipótesis de que la regulación a la baja de TLR-2 en los monocitos y/o la inducción de respuestas Treg in vivo pueden representar mecanismos mediante los cuales la isotretinoína ejerce sus efectos a largo plazo .

La isotretinoína (13cis RA) puede inhibir la entrada de COVID 2019 a través de la regulación negativa de la liberación de calcio intracelular mediada por ACE2, proteína AT1 y Ang II en lugar de la inhibición de la interleucina-6 (IL-6) y esto se analiza a continuación:

Muchos autores malinterpretan la diferencia entre los ARB, que bloquean los receptores ATR1, y el fármaco hipotético que podría bloquear el sitio de unión de COVID-19 en el receptor ACE2, que es totalmente diferente de ATR1 y 2.

La pandemia de COVID-19 provocada por el SARS-COV-2 ha infectado a más de 2.000.000 de personas provocando más de 150.000 muertes.(59) Una proteína celular huésped clave necesaria para la entrada del virus es la enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2), cuya expresión se ha demostrado en muchos tejidos, incluidas las células epiteliales alveolares de tipo II en los pulmones, la mucosa oral y el intestino, el corazón, los riñones, el endotelio y la piel. Las células que expresan ACE2 pueden actuar como células caseras y son propensas a la infección por SARS-CoV-2, ya que el receptor ACE2 facilita la entrada y la replicación viral celular.(60) Un estudio demostró que los pacientes con hipertensión y diabetes mellitus pueden tener un mayor riesgo de infección por SARS-CoV-2, ya que estos pacientes a menudo son tratados con inhibidores de la ECA (ACEI) o bloqueadores del receptor de angiotensina II tipo I (ARB), que han sido previamente sugerido para aumentar la expresión de ACE2.(61) En otro estudio realizado por Sinha et al, que analizó un conjunto de datos del Mapa de Conectividad (CMAP) disponible públicamente de perfiles transcriptómicos pre/post para el tratamiento farmacológico en líneas celulares para más de 20 000 moléculas pequeñas, la isotretinoína fue el regulador descendente más fuerte de los receptores ACE 2. Por otro lado, encontraron 6 medicamentos en CMAP que actualmente se están investigando en ensayos clínicos para el tratamiento de COVID-19 (cloroquina, talidomida, metilprednisolona, ​​losartan, lopinavir y ritonavir, de clinictrials.gov), ninguno de los cuales alteró significativamente la expresión de ACE2 (P>0.1) Además, otro estudio demostró que la isotretinoína es un posible inhibidor de la proteasa similar a la papaína (PLpro), que es una proteína codificada por los genes del SARS-CoV-2 y se considera una de las proteínas a las que se debe apuntar en el tratamiento de COVID-19 mediante la realización de pruebas virtuales basadas en objetivos. detección de ligandos. Como el investigador principal discutió antes, (13cRA) es el regulador descendente más fuerte de ACE2.

El investigador principal espera que 13cRA pueda inhibir o disminuir la ACE2 por interacción directa y unión con la ACE2 transmembrana, lo que sugiere su potencial terapéutico para prevenir la entrada de COVID 2019 a la célula huésped.

Estudios previos sobre el coronavirus del síndrome respiratorio agudo severo relacionado (SARS-CoV) y el SARS-CoV FP FP han demostrado que el calcio (Ca2+) juega un papel importante para la actividad fusogénica a través de un bolsillo de unión de Ca2+ con ácido glutámico (E) y ácido aspártico conservados (D) los residuos demostraron que el Ca2+ intracelular aumenta la infección por MERS-CoV WT PP en aproximadamente el doble y que E891 es un residuo crucial para la interacción de Ca2+. La resonancia de espín de electrones reveló que esta mejora podría atribuirse a que el Ca2+ aumenta el orden de la membrana relevante para la fusión MERS-CoV FP. Curiosamente, la titulación por calorimetría isotérmica mostró que el MERS-CoV FP se une a un Ca2+, a diferencia del SARS-CoV FP que se une a dos iones Ca2+.(62)

La angiotensina II aumenta la actividad del calcio intracelular en los podocitos del glomérulo intacto. El bloqueador de canales de Ca2+ tipo L nicardipina no influyó en el aumento de [Ca2+] mediado por Ang II y se ha postulado que la unión del SARS-CoV-2 a ACE2 puede atenuar la actividad residual de ACE2, sesgando el equilibrio ACE/ACE2 a un estado de aumento de la actividad de la angiotensina II que conduce a la vasoconstricción pulmonar y al daño orgánico inflamatorio y oxidativo, lo que aumenta el riesgo de lesión pulmonar aguda (ALI). AngII a través de los receptores AT1 regula al alza muchos genes proinflamatorios, como la molécula de adhesión de células vasculares-1 (VCAM-1), la molécula de adhesión intercelular-1 (ICAM-1) y la interleucina-6 (IL-6).30 pero 13cis RA específicamente reguló a la baja la proteína AT1 de una manera dependiente de la dosis y el tiempo. La regulación a la baja de la expresión de AT1 conduce a una liberación de calcio intracelular mediada por AngII reducida De manera similar a la regulación a la baja del receptor, el tratamiento con 13cRA dio como resultado una reducción significativa en el ARNm de AT1.(63)

Finalmente, el investigador principal espera que la isotretinoína ayude en la inducción de anticuerpos contra COVID-19 mediante la inducción de diferentes tipos de factores inmunes antivirales y también, la disminución de la hipermutación de COVID-19 mediante el bloqueo de sus receptores ACE2 y la prevención de la entrada y replicación del virus en las células. esto le dará tiempo al sistema inmunológico para reconocer el COVID-19.