Aerosolkombinasjonsterapi av all-trans retinsyre og isotretinoin som en ny behandling for å indusere nøytraliserende antistoffer hos COVID-19-infiserte pasienter bedre enn vaksine: en nyskapende behandling (Antibodies)

Dette er en fase 2, , randomisert (1:1:1), placebokontrollert, 2-ukers, proof-of-concept studie for å evaluere sikkerheten og tolerabiliteten samt den mekanistiske effekten av oral administrering av potente hemmere av nøytrofile celler. elastase (Inhalert all transretinsyre og inhalert isotretinoin hos personer infisert med COVID-19

Dessverre gjennomgår alle de vaksinerte apene behandlet med Oxford-vaksinen kjent som ChAdOx1 nCoV-19, menneskelige forsøk i Storbritannia. infisert når de blir utfordret som bedømt av gjenvinning av virusgenomisk RNA fra nesesekresjoner," sa Dr William Haseltine, en tidligere professor ved Harvard Medical School som hadde en sentral rolle i utviklingen av tidlige HIV/Aids-behandlinger. og generelt vil fremtidig covid-19-vaksinasjon som avhenger av inaktivert viral vaksine være begrenset til friske mennesker med sterk immunitet, og den vil ikke bli gitt til pasienter med historie med kontakt med en SARS-CoV-2-infeksjon (positiv i nukleinsyretest) . I tillegg til COVID-19 fører virale antigener til å stimulere antistoffdannelsen av IgM i akutt fase og IgG-type i kronisk fase som letter viral inntreden og fusjon med infiserte celler gjennom opptak av virus-IgG-komplekset via Fc-familien av reseptorer og senere viral fusjon med antigenpresenterende celler som makrofager, B-celler, monocytter via FcR-familien og vaskulært endotel gjennom den neonatale Fc-reseptoren (nFcR) i stedet for antistoffer indusert viral agglutinasjon, og dette er kjent som antistoffavhengig forsterkning (ADE)(2).

Det er ulike hypoteser om hvordan ADE oppstår, og det er en sannsynlighet for at mer enn én mekanisme eksisterer. I en slik bane mangler noen celler i immunsystemet de vanlige reseptorene på overflaten som viruset bruker for å komme inn, men de har Fc-reseptorer som binder seg til den ene enden av antistoffer. Viruset binder seg til antigenbindingsstedet i den andre enden, og får på denne måten innpass i og infiserer immuncellen. Denguevirus kan bruke denne mekanismen til å infisere menneskelige makrofager, hvis det var en tidligere infeksjon med en annen stamme av viruset, noe som forårsaker at en normalt mild virusinfeksjon blir livstruende.(3) Et pågående spørsmål i COVID-19-pandemien er om – og i så fall i hvilken grad – COVID-19 mottar ADE fra tidligere infeksjon med andre koronavirus.

ADE kan hemme vaksineutvikling: ADE kan hemme vaksineutvikling, da en vaksine kan forårsake produksjon av antistoffer som via ADE forverrer sykdommen vaksinen er laget for å beskytte mot. Vaksinekandidater for Dengue-virus og katteinfeksjonsvirus (et kattekoronavirus) måtte stoppes fordi de utløste ADE.(4)

ADE i koronavirusinfeksjon kan være forårsaket av høy mutasjonsrate av genet som koder for spike (S) protein. En grundig analyse av aminosyrevariabilitet i SARS-CoV-2-virusproteiner, som inkluderte S-proteinet, avslørte at minst konservative aminosyrer er i de fleste eksponerte fragmenter av S-protein inkludert reseptorbindende domene (RBD).(5) Forsinket antistoffrespons og sekresjon etter covid-19-symptomer er ansvarlig for antistoffavhengig forsterkning (ADE)

En studie viser at den første serokonversjonsdagen for IgA var 2 dager etter debut av de første symptomene, og den første serokonversjonsdagen for IgM og IgG var 5 dager etter debut. Den positive andelen av antistoffer i de 183 prøvene var 98,9 %, 93,4 % og 95,1 % for henholdsvis IgA, IgM og IgG. Serokonversjonsraten for IgA, IgM eller IgG var 100 % 32 dager etter symptomdebut. I følge den kumulative serokonversjonskurven var median konverteringstid for IgA, IgM og IgG henholdsvis 13, 14 og 14 dager. (6)

Fordi denne immunresponsen tar en stund å vise seg, vil antistofftester være negative for de som nylig er infisert med COVID-19, og det er derfor de ikke brukes til diagnose.

"Hvis det er begynnelsen på infeksjonen, tar du den ikke opp, det er noe som først utvikler seg senere," Dr. Melanie Ott, en virolog og immunolog ved Gladstone Institutes og professor ved University of California, San Francisco. (7)

Så hovedetterforskeren forventer at forsinket antistoffrespons og forsinket immunglobulinklassebytte er hovedårsaken til antistoffers smitteevne og ikke-spesifisitet i den sterkt muterte covid-19-infeksjonen

IgG-antistoffer med høy affinitet kan effektivt løse Covid-19-infeksjon

De mer enn 100 covid-19-vaksinene under utvikling fokuserer hovedsakelig på en annen immunrespons: antistoffer. Disse proteinene er laget av B-celler og fester seg ideelt til SARS-CoV-2 og hindrer det i å komme inn i cellene. T-celler, derimot, hindrer infeksjoner på to forskjellige måter. Hjelpe-T-celler ansporer B-celler og andre immunforsvarere til handling, mens drepende T-celler retter seg mot og ødelegger infiserte celler. Alvorlighetsgraden av sykdommen kan avhenge av styrken til disse T-celleresponsene(1).

Studier på humorale responser på infeksjoner har hovedsakelig vært rettet mot produksjon av høyaffinitets-IgG-antistoffer som effektivt løser en infeksjon. Det har imidlertid vært godt erkjent at humoral immunrespons på infeksjon kan være et tveegget sverd som enten tjener som en beskyttende mekanisme for å løse infeksjonen eller forverrer vevsskaden, f.eks. IgG-respons forårsaker fatal akutt lungeskade ved å skjeve betennelsesløsende respons ved SARS.(8)

Når det gjelder luftveisinfeksjon, mens IgM- og IgG-isotyper har vært hovedvekten i karakterisering av immunitet, har slimhinne- og systemiske IgA-responser som kan spille en kritisk rolle i sykdomspatogenesen, fått mye mindre oppmerksomhet.(9),(11).

Høye nøytrofiler ved covid-19-infeksjon kan være årsaken til forsinket antistoffrespons og alvorlige komplikasjoner

Humoral immunrespons, spesielt produksjon av nøytraliserende antistoffer, spiller en beskyttende rolle ved å begrense infeksjon i senere fase og forhindrer reinfeksjon i fremtiden. I SARS-CoV ble både T- og B-celleepitoper omfattende kartlagt for de strukturelle proteinene, S-, N-, M- og E-protein.(12) En begrenset serologisk detalj av SARS-CoV-2 ble rapportert. I en foreløpig studie viste en pasient toppspesifikk IgM på dag 9 etter sykdomsdebut og overgangen til IgG innen uke 2.25. Interessant nok viser sera fra 5 pasienter med bekreftet COVID-19 en viss kryssreaktivitet med SARS-CoV, men ikke annet koronavirus . Videre var alle sera fra pasienter i stand til å nøytralisere SARS-CoV-2 i en in vitro plakkanalyse, noe som tyder på en mulig vellykket montering av humorale responser.(13) Hvorvidt kinetikken/titeren til spesifikt antistoff korrelerer med sykdommens alvorlighetsgrad gjenstår å undersøke.(14)

I alvorlige tilfeller av koronavirussykdom 2019 (COVID-19), utvikler viral lungebetennelse seg til respirasjonssvikt. Nøytrofile ekstracellulære feller (NET) er ekstracellulære vev av kromatin, mikrobicidproteiner og oksidantenzymer som frigjøres av nøytrofiler for å inneholde infeksjoner. Men når de ikke er riktig regulert, har NET potensial til å forplante betennelse og mikrovaskulær trombose - inkludert i lungene til pasienter med akutt respiratorisk distress syndrom. Mens forhøyede nivåer av blodnøytrofiler forutsier verre utfall i COVID-19, har ikke NETs rolle blitt undersøkt. Vi rapporterer nå at sera fra pasienter med COVID-19 (n = 50 pasienter, n = 84 prøver) har forhøyede nivåer av cellefritt DNA, myeloperoksidase(MPO)-DNA og citrullinert histon H3 (Cit-H3); de to sistnevnte er svært spesifikke markører for NET.(15)

Nøytrofiler er sofistikerte celler i stand til å tilpasse seg endrede betennelser

Nøytrofiler er ikke enkle poser med enzymer som sendes for å drepe patogener før de adaptive immuncellene flytter inn. Faktisk er de i stand til å reagere på endret inflammatorisk status; nøytrofiler kan produsere cytokiner, endre genuttrykket deres under betennelse og gjennom "aldring" og overleve betydelig lenger enn tradisjonelt antatt, med en studie som plasserer levetiden fra benmargen til 5,4 dager. Som en konsekvens er nøytrofiler i stand til å tilpasse seg endrede forhold og styre andre cellers oppførsel - en oppgave som de kan utføre med en viss raffinement.

Det finnes en rekke murine modeller der T-celleresponsene kan forverres ved å ta ut nøytrofiler, noe som antyder at de har en regulerende rolle. Denne undertrykkelsen av T-celleresponser av nøytrofiler krever nær kontakt og utvikling av en immunologisk synapse - kanskje som mediatorene trodde var ansvarlige, diffunderer ikke reaktive oksygenarter og H2O2 langt. Opptak av apoptotiske eller nekrotiske nøytrofiler hemmer også DC-antigenpresentasjon og ko-stimulering, noe som resulterer i reduserte T-celleresponser - en situasjon som kan utnyttes av patogener. For eksempel fanger nøytrofiler L. major og blir deretter oppslukt av DC-er, undertrykker antigenpresentasjon og T-celle-priming

NE ble også vist å hemme modning og funksjon av dendrittiske celler, inkludert ekspresjon av de samstimulerende molekylene CD40, CD80 og CD86. Inflammatoriske lungesekresjoner hemmer dendrittiske cellemodning og funksjon via nøytrofil elastase.(16)

Hemmer av elastase ved covid-19-infeksjon:

1. Alvelestat ble utviklet som behandling for lungesykdommer som kronisk obstruktiv lungesykdom. Alevelestat virker ved å blokkere visse proteiner i kroppen som er ansvarlige for betennelse og skade på lungene som kan føre til KOLS-symptomer.

   Alvelestat-hemmer av elastase stimulerer murine B-lymfocytt-differensiering til IgG- og IgA-produserende celler via immunoglobulinklassebytte og -indusering også kjent som isotypebytte, isotypisk kommutering eller klassesvitsj-rekombinasjon (CSR), er en biologisk mekanisme som endrer en B-celles produksjon av immunglobulin fra en type til en annen, slik som fra isotypen IgM til isotypen IgG

   En studie viste at uttømming av nøytrofiler forbedrer produksjonen av slimhinne-IgA og IgG etter sublingual immunisering med Bacillus anthracis ødemtoksin som adjuvans. Disse tidligere studiene viste også at det eksisterer en omvendt korrelasjon mellom antall nøytrofiler og produksjon av IgA av B-celler. Ved å bruke spesifikke hemmere av elastase, tok vi opp om elastaseaktiviteten til nøytrofil kan være faktoren som forstyrrer produksjonen av IgA og muligens andre immunoglobulinisotyper. Vi fant at murine splenocytter og mesenteriske lymfeknuteceller dyrket i 5 dager i nærvær av nøytrofile elastasehemmere utskilte høyere nivåer av IgG og IgA enn celler dyrket i fravær av inhibitorer, og også denne behandlingen økte imidlertid frekvensen av CD4+ T-celler .(17) Som et slimhinnemålrettet virus vil SARS-CoV-2 forventes å generere sekretorisk IgA (sIgA) og indusere sterk slimhinneimmunitet. Faktisk har den antivirale slimhinneimmuniteten delvis vist seg å være et resultat av IgA-medierte interaksjoner med de patogene mikroorganismene for å forhindre at patogener fester seg til celleoverflaten.(17) Oppregulert IgA-produksjon kan være et resultat av økte nivåer av TGF-β og IL-10 som fremmer antistoffbytte ved SARS-CoV-2-infeksjon.(17) En studie rapporterte at uttømming av nøytrofiler før systemisk injeksjon av vaksiner økte omfanget av antigenspesifikke CD4+ T-celleresponser, og nivåene av antigenspesifikke serum IgG-responser.(18)

   Alvelestat og Sivelestat ble funnet å stimulere AID-mRNA-syntese. NE-hemmerne induserte også ekspresjon av BAFF, APRIL og IL-10 mRNA på en doseavhengig måte. Nøytrofil elastase og de relaterte serinproteasene cathepsin G og proteinase 3, ble vist å regulere cytokinresponser gjennom aktivering eller nedbrytning av cytokiner, cytokinreseptorer eller tolllignende reseptorer.(18) Dette samsvarer med vårt funn om at NE-hemmere stimulerer IL-10-ekspresjon, men også BAFF og APRIL i kulturer av splenocytter. IL-10 ble rapportert å regulere ekspresjon av AID for induksjon av Ig CSR. (19) og det er veletablert at IL-10 letter Ig-klassebytte for produksjon av IgA (20). Disse dataene antyder således at NE-hemmere stimulerer antistoffproduksjon gjennom stimulering av AID og inhibering av aktivering/degradering av cytokiner og cytokinreseptorer av elastase. NE ble også vist å hemme modning og funksjon av dendrittiske celler, inkludert ekspresjon av de costimulerende molekylene CD40, CD80 og CD86.(21). Således kan tilstedeværelsen av nøytrofilhemmere ha fremmet modningen av dendrittiske celler og deres ekspresjon BAFF og APRIL og kanskje samstimulerende molekyler (dvs. CD40) for forbedret antistoffproduksjon. Selv om Alvelestat og Sivelestat er spesifikke NE-hemmere, bør man vurdere at de også kan hemme relaterte elastase-lignende enzymer. I denne forbindelse ble aktiverte humane B-celler rapportert å uttrykke en trypsinlignende serinprotease på celleoverflaten.(22) Avsluttende bemerkninger Det ble tidligere vist at nøytrofile peptiddefensiner forsterker IgG, men ikke IgA-responser mot nasalt samtidig administrerte vaksineantigener.(23) Her har studien vist at serinproteaseaktiviteten til nøytrofil elastase, og muligens annen serinprotease som B-celle-elastase, også deltar i reguleringen av B-cellebiologi og adaptiv immunitet. Imidlertid, i motsetning til nøytrofile peptiddefensiner, regulerer NE negativt differensiering av B-lymfocytter til IgG- og IgA-utskillende celler. Tilstedeværelsen av AID forbedrer generelt antistoff-basert immunitet.(24).

   Høye nøytrofiler hos COVID-19-infiserte pasienter er i stand til å forårsake alvorlig skade på lungevevet ved å frigjøre giftige proteaser og reaktive oksygenarter hvis de ikke motvirkes av antiproteasene.

2. All-trans retinsyre (RA) har gunstige effekter når det brukes i en rekke inflammatoriske hudsykdommer. I en studie fant forfatterne at RA hemmet superoksidanionproduksjon og frigjøring av proteolytiske enzymer av nøytrofiler fra mennesker og rotter. Samtidig fant forfatterne at RA-behandlede nøytrofiler var mindre i stand til å skade endotelceller i kultur enn ubehandlede nøytrofiler, selv om adhesjonen til de RA-behandlede nøytrofilene til endotelcellemonolag ikke ble redusert. Hemming av cytotoksisitet skjedde over det samme konsentrasjonsområdet som inhiberte dannelse av oksygenradikaler og frigjøring av protease. I tilleggsstudier ble det observert at forbehandling av endotelceller med RA-indusert motstand mot påfølgende skade av aktiverte nøytrofiler. Til slutt viste in vivo-studier at forbehandling av rotter i 3 dager med RA (1-10 mg/dag, IP) reduserte skadegraden i lungene og huden etter behandling med bovint serumalbumin og antistoffer mot bovint serumalbumin i revers-passiv Arthus-reaksjon. Dermed kan RA modulere nøytrofil-mediert endotelcelleskade ved en effekt på både nøytrofilene og deres målceller. Sammen kan disse effektene ligge til grunn for reduksjonen i immunkompleksmediert skade sett hos forsøksdyr. De gunstige effektene som retinoider har i en rekke inflammatoriske hudsykdommer kan likeledes være en refleksjon av deres effekter på fysiologien til både nøytrofiler og endotelceller.

Oral retinylpalmitat eller retinsyre korrigerer slimhinne-IgA-responser mot en intranasal influensavirusvaksine i mus med vitamin a-mangel. Retinoider hemmer inflammatoriske TH17 T-celleresponser, fremmer regulatoriske T-celle (Treg) responser og regulerer ekspresjon av tolllignende reseptorer (TLR).(57)

Så hovedetterforskeren forventer at retinsyre vil være effektiv i covid -19-pasienter bedre enn den andre nøytrofile elastasehemmeren som Alvelestat fordi Attia et al (2018) viste at Sivelestat reduserte sekresjonen av IgM på en doseavhengig måte, IgM-type av antistoffer som er svært viktig ved viral nøytralisering og på den annen side stopper retinsyre nøytrofil-mediert endotelcelleskade ved en effekt på både nøytrofilene og deres målceller.

Utskilt medikament er Isotretinoin (13cis RA) og ATRA kan være i stand til å hemme COVID 2019-infeksjon ved å indusere den antivirale immuniteten, og dette diskuteres som følger:

En studie viste at 13 cis retinoic brukes til å behandle emfysem (emfysem er en lungetilstand som forårsaker kortpustethet), siden en effektiv immunrespons mot virusinfeksjoner avhenger av aktivering av cytotoksiske T-celler som kan fjerne infeksjon ved å drepe virusinfiserte celler, øke antallet og funksjonen til T-celler hos COVID-19-pasienter er avgjørende for vellykket utvinning. En fersk studie rapporterte at 82,1 % av COVID-19-tilfellene viste lavt antall sirkulerende lymfocytter. En CoV infiserer makrofager, og deretter presenterer makrofager CoV-antigener til T-celler. Denne prosessen fører til T-celleaktivering og differensiering, inkludert produksjon av cytokiner assosiert med de forskjellige T-celleundergruppene (Th17), etterfulgt av en massiv frigjøring av cytokiner for immunresponsamplifisering. Fortsatt produksjon av disse mediatorene på grunn av viral persistens har en negativ effekt på NK, og CD8 T-celleaktivering.(25)

Nylig studie av 522 COVID-pasienter og 40 friske kontroller fra to sykehus i Wuhan, Kina viste at T-celletall er negativt korrelert til serum IL-6, IL-10 og TNF-α konsentrasjon, med pasienter i nedgangsperiode som viser redusert IL-6 , IL-10 og TNF-a konsentrasjoner og gjenopprettede T-celletall. T-celler fra COVID-19-pasienter har betydelig høyere nivåer av det utmattede markørprogrammerte celledødsproteinet (PD-1) sammenlignet med helsekontroller. Dessuten kan økende PD-1- og Tim-3-ekspresjon på T-celler sees etter hvert som pasienter gikk fra prodromale til åpenlyst symptomatiske stadier, noe som ytterligere indikerer utmattelse av T-celler. T-celleutmattelse er et progressivt tap av effektorfunksjon på grunn av langvarig antigenstimulering, karakteristisk for kroniske infeksjoner. Dendritisk cellehemming er forbundet med utmattelse av CD8+ T-cellepolyfunksjonalitet under kronisk hepatitt C-virusinfeksjon. CD8 T-celler produserer svært effektive mediatorer for å fjerne nCoV2019.(26)

Dendritiske celler (DCs) spiller en nøkkelrolle i medfødte immun- og adaptive immunresponser. Som de sterkeste antigenpresenterende cellene i organismen, stimulerer de effektivt aktiveringen av T-lymfocytter og B-lymfocytter, og kombinerer dermed medfødt og adaptiv immunitet. Umodne DC-er har sterk migrasjonsevne, og modne DC-er kan effektivt aktivere T-celler i den sentrale koblingen for oppstart, regulering og vedlikehold av immunresponser. Således, når modningsprosessen til DCs er blokkert, påvirker den direkte initieringen av påfølgende adaptiv immunrespons. MERS-CoV-2 er i stand til å påvirke menneskelige dendrittiske celler og makrofager in vitro. Produktiv replikasjon av koronaviruset i Midtøsten respiratorisk syndrom i monocyttavledede dendrittiske celler modulerer medfødt immunrespons.(27)

En annen studie foreslo at C-C kjemokinreseptor type 4 (CCR4) bidrar til T-celle lunge homing imprinting. Det ble funnet at lunge-DC induserer ekspresjonen av CCR4 på T-celler. Lunge-DC-aktiverte T-celler trafikkerer mer effektivt inn i lungen og beskytter mot influensa mer effektivt sammenlignet med T-celler aktivert av DC-er fra andre vev. Lim og kolleger antydet at CXCR4 spiller en rolle i CD8+ T-cellemigrasjon til luftveisvev.(28)

Dendritisk cellehemming er forbundet med utmattelse av CD8+ T-cellepolyfunksjonalitet under kronisk hepatitt C-virusinfeksjon. CD8 T-celler produserer svært effektive mediatorer for å fjerne nCoV2019.(29)

Tilstedeværelse av RA i forskjellige vev er svært viktig for immuninduksjon og bekjempelse av virusinfeksjon, for eksempel er RA tilstede i høye konsentrasjoner i tynntarmen på grunn av metabolisering av vitamin A i kosten av tarmepitelceller. I dette lokale miljøet aktiverer og primer RA dendritiske celler (DCs) til å bli CD103+ DCs som produserer RA.3, 4CD103+ DCs er migrerende celler som aktiverer naive T-celler i mesenteriske lymfeknuter til å bli effektor-T-celler som bidrar til både intestinal homeostase og immunitet.og også RA er et viktig signal som induserer IgA-produserende B-celler. Tarmsøkende T- og B-celler spiller viktige roller for å beskytte fordøyelseskanalen mot patogener.(30) Retinsyre (atRA) kan hemme den spontane apoptose av aktiverte humane T-lymfocytter in vitro. 13-cis RA aktiverer Th2-cytokinproduksjon Forbedret sirkulerende dendrittiske celletall.(40)

Så ifølge disse tidligere studiene antyder hovedetterforskeren at lymfopeni og utmattelse i T-celler kan være et resultat av dendritiske celler (DCs) infeksjon og hemming av MERS-CoV-2.

Retinsyre har dype effekter på cellulær spredning og differensiering. Dessuten har det blitt rapportert at ATRA viser både antiinflammatoriske og immunregulerende effekter. Nyere studier har vist at FOXP3-ekspresjon og immunfunksjonen til Regulatory T-celler (Tregs ) kan forsterkes av ATRA i immunsystemet til både pasienter og mic.13Retinsyre (RA) produseres av en rekke celletyper, inkludert makrofager og dendritiske celler, som uttrykker retinale dehydrogenaser som omdanner vitamin A til dens biologisk aktive hovedmetabolitt, all-trans RA. All-trans RA binder seg til sine nukleære retinsyrereseptorer som uttrykkes i lymfoide celler og fungerer som transkripsjonsfaktorer for å regulere cellesøking og differensiering. RA-produksjon av CD103+ dendrittiske celler og alveolære makrofager fungerer sammen med TGF-b for å fremme konvertering av naive T-celler til Foxp3+ regulatoriske T-celler og opprettholder derved slimhinnetoleranse.(50) Så hovedetterforsker forventer høy indusering av dendrittiske celler (DCs) ved retinsyrebehandling som vil føre til T-celleaktivering og migrasjon med mindre utmattelsesfenomen.

Forskere fra Wenzhou, Kina så på kliniske laboratorieegenskaper, inkludert lipidnivåer hos pasienter med COVID 19. De fant dramatiske reduksjoner i kolesterolnivåene til pasienter infisert med COVID 19, sammenlignet med friske kontroller. Studien gir data som tyder på at kolesterolnivået synker ganske raskt i de tidlige stadiene av infeksjonen og øker etter hvert som pasienten begynner å bli frisk. Derfor indikerer det at kolesterol kan ha en viktig rolle å spille for å forsvare kroppen mot slike infeksjoner. I henhold til vår protokoll, avhengig av tidligere studier, viste hovedetterforskeren at det er en sterk sammenheng mellom immunsystem og kolesterolnivåer. :-

Cellulært kolesterol er en komponent i plasmamembranen og er også essensielt i celleproliferasjon. Regulering av intracellulære kolesterolnivåer har blitt foreslått som en mekanisme for å regulere spredning av T-celler og makrofager. Intracellulært kolesterolnivå reguleres av to konkurrerende veier, kolesterolopptak og efflux, og ABCA1 spiller en stor rolle i kolesterolutstrømningsveien. ATRA induserer ABCA1-ekspresjon og ABCA1-avhengig kolesterolutstrømning i aktiverte primære humane CD4+ T-celler, noe som antyder at RA kan påvirke T-cellefunksjoner ved å regulere cellulære kolesterolnivåer.(51) ATRA oppregulerer ABCA1-ekspresjon bare i aktiverte CD4+ T-celler, noe som indikerer at induksjon av ABCA1 av ATRA og 13 cis retinsyre kan spille en viktig rolle i immunresponsen.

Retinsyre og lever X-reseptoragonist hemmer synergistisk HIV-infeksjon i CD4+ T-celler ved å oppregulere ABCA1-mediert kolesterolutstrømning.(52)(53)

RA virker også direkte på makrofager både på slimhinnene og andre immunologiske steder. AtRA modulerer peritoneal makrofagaktivering av endotoksin og IFN-γ ved å undertrykke TNF-produksjon og nitrogenoksid (NO) syntese. I tillegg hemmer RA ekspresjonen av PGE2 og COX-2 og frigjøringen av TNF, som induseres av bakteriell lipopolysakkarid ( LPS) i murine peritoneale makrofager.(54)

En studie rapporterte nylig at substans (ATRA) har forebyggende effekter på lungefibrose ved å hemme IL-6-avhengig spredning og TGF-β1-avhengig transdifferensiering av lungefibroblaster. Også andre studier viste at 13-cis-retinsyre og andre retinoidanaloger hemmer IL-1-indusert IL-6-produksjon og at denne effekten er analogspesifikk og, i det minste delvis, transkripsjonelt mediert. Denne effekten var doseavhengig med en IC50 på 10(-7) M RA og signifikant hemming ble notert med doser av RA så lave som 10(-8) M. IL-10-produksjonen ble hemmet av ATRA-administrasjon.(55)

En studie viste at TLR3(-/-), TLR4(-/-) og TRAM(-/-) mus er mer mottakelige for SARS-CoV enn villtype mus, men opplever bare forbigående vekttap uten dødelighet som svar på infeksjon. I motsetning til dette er mus som mangler TLR3/TLR4-adapteren TRIF svært utsatt for SARS-CoV-infeksjon, og viser økt vekttap, dødelighet, redusert lungefunksjon, økt lungepatologi og høyere virustitere. Nye studier viste at det høye nivået av IFN-α/β produsert fra TLR3-IRF3/IRF7-banen og IFN-β er årsaken til å hemme DENV-replikasjon. 13Cis retinsyre induserte betydelig oppregulering av toll-lignende reseptor 3 (TLR3), noe som resulterer i en immunrespons mot dsRNA-mellomprodukt som delvis kan genereres under CoV-2-replikasjon. aktivert for å produsere type I IFNs.(56)

.

Oral retinylpalmitat eller retinsyre korrigerer slimhinne-IgA-responser mot en intranasal influensavirusvaksine i mus med vitamin a-mangel. Retinoider hemmer inflammatoriske TH17 T-celleresponser, fremmer regulatoriske T-celle (Treg) responser og regulerer ekspresjon av tolllignende reseptorer (TLR).(57) In vitro-behandling av normale humane monocytter med all-trans retinoic acid (ATRA) nedregulerer TLR-2-ekspresjon (58), men denne effekten er ikke undersøkt hos pasienter behandlet med systemiske retinoider. Isotretinoin (13-cis retinsyre; 13-cis RA) er det eneste stoffet som er i stand til å indusere en langvarig eller permanent remisjon av akne; mekanismene som fører til denne varige responsen er imidlertid ukjente. Gitt rollen til TLR-2 i å initiere immunresponser mot P. acnes, antok vi at nedregulering av TLR-2 på monocytter og/eller induksjon av Treg-responser in vivo kan representere mekanismer som isotretinoin utøver sine langsiktige effekter på. .

Isotretinoin (13cis RA) kan være i stand til å hemme COVID 2019-inntreden via nedregulering av ACE2, AT1-protein og Ang II-mediert intracellulær kalsiumfrigjøring i stedet for hemming av interleukin-6 (IL-6), og dette diskuteres som følger:

Mange forfattere misforstår forskjellen mellom ARB-er, som blokkerer ATR1-reseptorer og det antatte stoffet som kan blokkere COVID-19-bindingsstedet på ACE2-reseptoren, som er totalt forskjellig fra ATR1 og 2.

COVID-19-pandemien forårsaket av SARS-COV-2 har infisert over 2 000 000 mennesker og forårsaket over 150 000 dødsfall.(59) Et sentralt vertscellulært protein som kreves for virusinntreden er angiotensin-konverterende enzym 2 (ACE2) hvis ekspresjon er påvist i mange vev inkludert alveolære epiteltype II-celler i lunger, munnslimhinne og tarm, hjerte, nyre, endotel og hud. ACE2-uttrykkende celler kan fungere som hjemmeceller og er utsatt for SARS-CoV-2-infeksjon da ACE2-reseptor letter cellulær virusinntrengning og replikasjon.(60) En studie viste at pasienter med hypertensjon og diabetes mellitus kan ha høyere risiko for SARS-CoV-2-infeksjon, da disse pasientene ofte behandles med ACE-hemmere (ACEI) eller angiotensin II type-I reseptorblokkere (ARB), som har blitt tidligere foreslått å øke ACE2-ekspresjonen.(61) I en annen studie av Sinha et al som analyserte et offentlig tilgjengelig Connectivity Map (CMAP) datasett av pre/post transkriptomiske profiler for medikamentell behandling i cellelinjer for over 20 000 små molekyler, var isotretinoin den sterkeste nedregulatoren av ACE 2-reseptorer. På den annen side fant de 6 legemidler i CMAP som for tiden undersøkes i kliniske studier for behandling av COVID-19 (klorokin, thalidomid, metylprednisolon, losartan, lopinavir og ritonavir, fra clinicaltrials.gov), ingen av dem ble funnet å signifikant endre ACE2-ekspresjon (P>0,1) Dessuten viste en annen studie at isotretinoin er en potensiell papain-lignende protease (PLpro)-hemmer som er et protein kodet av SARS-CoV-2-gener og betraktet som et av proteinene som bør målrettes i COVID-19-behandling ved å utføre målbasert virtuell ligandscreening.Som hovedetterforsker diskuterte før er (13cRA) den sterkeste nedregulatoren av ACE2.

Hovedetterforskeren forventer at 13cRA kan hemme eller nedbryte ACE2 ved direkte interaksjon og binding med den transmembrane ACE2, noe som tyder på dets terapeutiske potensiale for å forhindre inntreden av COVID 2019 til vertscellen.

Tidligere studier på det relaterte alvorlige akutte respiratoriske syndromet coronavirus (SARS-CoV) og SARS-CoV FP FP har vist at kalsium (Ca2+) spiller en viktig rolle for fusogen aktivitet via en Ca2+-bindingslomme med konservert glutaminsyre (E) og asparaginsyre (D) rester demonstrerte at intracellulær Ca2+ øker MERS-CoV WT PPs-infeksjon med omtrent det dobbelte og at E891 er en avgjørende rest for Ca2+-interaksjon. Elektronspinnresonans avslørte at denne forbedringen kan tilskrives Ca2+ økende MERS-CoV FP fusjonsrelevant membranbestilling. Interessant nok viste isotermisk kalorimetrititrering at MERS-CoV FP binder ett Ca2+, i motsetning til SARS-CoV FP som binder seg til to Ca2+ ioner.(62)

Angiotensin II øker den intracellulære kalsiumaktiviteten i podocytter i den intakte glomerulus. L-type Ca2+ kanalblokker nicardipin påvirket ikke den Ang II-mediert [Ca2+] økningen, og det har blitt postulert at SARS-CoV-2 binding til ACE2 kan svekke gjenværende ACE2 aktivitet, skjevt ACE/ACE2 balansen til en tilstand på økt angiotensin II-aktivitet som fører til pulmonal vasokonstriksjon og inflammatorisk og oksidativ organskade, noe som øker risikoen for akutt lungeskade (ALI). AngII via AT1-reseptorer oppregulerer mange proinflammatoriske gener, slik som vaskulært celleadhesjonsmolekyl-1 (VCAM-1), intercellulært adhesjonsmolekyl-1 (ICAM-1), interleukin-6 (IL-6).30 men 13cis RA nedregulerte spesifikt AT1-proteinet på en dose- og tidsavhengig måte. Nedregulering av AT1-ekspresjonen fører til redusert AngII-mediert intracellulær kalsiumfrigjøring På samme måte som reseptornedregulering, resulterte behandling med 13cRA i en signifikant reduksjon i AT1-mRNA.(63)

Til slutt forventer hovedetterforskeren at isotretinoin vil hjelpe til med antistoffinduksjon mot COVID-19 ved å indusere forskjellige typer antivirale immunfaktorer og også redusere COVID-19 hypermutasjon ved å blokkere ACE2-reseptorene og forhindre viruset fra celleinntrengning og replikasjon og dette vil gi immunsystemet tid til å gjenkjenne COVID-19.