Thérapie combinée par aérosol d'acide rétinoïque tout-trans et d'isotrétinoïne comme nouveau traitement pour induire des anticorps neutralisants chez les patients infectés par COVID -19 mieux que le vaccin : un traitement innovant (Antibodies)

Il s'agit d'une étude de preuve de concept de phase 2, randomisée (1:1:1), contrôlée par placebo, d'une durée de 2 semaines, visant à évaluer l'innocuité et la tolérabilité ainsi que l'effet mécaniste de l'administration orale d'un puissant inhibiteur des neutrophiles. élastase (acide tout trans rétinoïque inhalé et isotrétinoïne inhalée chez les sujets infectés par le COVID -19

Malheureusement, tous les singes vaccinés traités avec le vaccin d'Oxford, connu sous le nom de ChAdOx1 nCoV-19, font l'objet d'essais sur l'homme en Grande-Bretagne. infectés lorsqu'ils sont mis au défi, à en juger par la récupération de l'ARN génomique du virus à partir des sécrétions nasales », a déclaré le Dr William Haseltine, ancien professeur à la Harvard Medical School qui a joué un rôle central dans le développement des premiers traitements contre le VIH/sida. et en général, la future vaccination COVID-19 qui dépend d'un vaccin viral inactivé sera limitée aux personnes en bonne santé avec une forte immunité et elle ne sera pas administrée aux patients ayant des antécédents de contact avec une infection par le SRAS-CoV-2 (positif au test d'acide nucléique) . En plus des antigènes viraux COVID-19, ils stimulent la formation d'anticorps de type IgM en phase aiguë et de type IgG en phase chronique, ce qui facilite l'entrée virale et la fusion avec la cellule infectée par l'absorption du complexe virus-IgG via la famille de récepteurs Fc et fusion virale ultérieure avec des cellules présentatrices d'antigènes comme les macrophages, les cellules B, les monocytes via la famille FcR et l'endothélium vasculaire via le récepteur Fc néonatal (nFcR) au lieu d'une agglutination virale induite par des anticorps et ceci est connu sous le nom d'amélioration dépendante des anticorps (ADE)(2).

Il existe diverses hypothèses sur la façon dont l'ADE se produit et il est probable qu'il existe plus d'un mécanisme. Dans l'une de ces voies, certaines cellules du système immunitaire n'ont pas les récepteurs habituels à leur surface que le virus utilise pour pénétrer, mais elles ont des récepteurs Fc qui se lient à une extrémité des anticorps. Le virus se lie au site de liaison à l'antigène à l'autre extrémité et pénètre ainsi dans la cellule immunitaire et l'infecte. Le virus de la dengue peut utiliser ce mécanisme pour infecter les macrophages humains, s'il y a eu une infection précédente par une souche différente du virus, provoquant une infection virale normalement bénigne qui devient mortelle.(3) Une question permanente dans la pandémie de COVID-19 est de savoir si - et si oui, dans quelle mesure - le COVID-19 reçoit un ADE d'une infection antérieure par d'autres coronavirus.

L'ADE peut entraver le développement de vaccins : l'ADE peut entraver le développement de vaccins, car un vaccin peut provoquer la production d'anticorps qui, via l'ADE, aggravent la maladie contre laquelle le vaccin est conçu pour protéger. Les vaccins candidats contre le virus de la dengue et le virus de la péritonite infectieuse féline (un coronavirus du chat) ont dû être arrêtés car ils provoquaient des ADE.(4)

L'ADE dans l'infection à coronavirus peut être causée par un taux de mutation élevé du gène qui code pour la protéine de pointe (S). Une analyse approfondie de la variabilité des acides aminés dans les protéines du virus SARS-CoV-2, qui comprenait la protéine S, a révélé que les acides aminés les moins conservateurs se trouvent dans les fragments les plus exposés de la protéine S, y compris le domaine de liaison au récepteur (RBD). (5) La réponse et la sécrétion retardées des anticorps après l'apparition des symptômes du covid-19 sont responsables de l'amélioration dépendante des anticorps (ADE)

Une étude montre que le premier jour de séroconversion d'IgA était 2 jours après l'apparition des premiers symptômes, et le premier jour de séroconversion d'IgM et d'IgG était 5 jours après l'apparition. Le taux d'anticorps positifs dans les 183 échantillons était de 98,9 %, 93,4 % et 95,1 %, pour les IgA, IgM et IgG, respectivement. Le taux de séroconversion pour les IgA, IgM ou IgG était de 100 % 32 jours après l'apparition des symptômes. Selon la courbe de séroconversion cumulée, le temps de conversion médian pour les IgA, IgM et IgG était de 13, 14 et 14 jours, respectivement. (6)

Parce que cette réponse immunitaire prend un certain temps à se manifester, les tests d'anticorps seront négatifs pour les personnes nouvellement infectées par le COVID-19, c'est pourquoi ils ne sont pas utilisés pour le diagnostic.

"Si c'est le début de l'infection, vous ne la détectez pas, c'est quelque chose qui ne se développe que plus tard", a déclaré le Dr Melanie Ott, virologue et immunologiste aux instituts Gladstone et professeur à l'Université de Californie à San Francisco. (7)

Ainsi, le chercheur principal s'attend à ce que la réponse retardée des anticorps et le changement retardé de classe d'immunoglobuline soient la principale raison de l'infectivité et de la non-spécificité des anticorps dans l'infection covid-19 hautement mutée.

Les anticorps IgG de haute affinité peuvent résoudre efficacement l'infection à Covid -19

Les plus de 100 vaccins COVID-19 en développement se concentrent principalement sur une autre réponse immunitaire : les anticorps. Ces protéines sont fabriquées par les cellules B et idéalement se verrouillent sur le SRAS-CoV-2 et l'empêchent de pénétrer dans les cellules. Les cellules T, en revanche, contrecarrent les infections de deux manières différentes. Les lymphocytes T auxiliaires stimulent l'action des lymphocytes B et d'autres défenseurs du système immunitaire, tandis que les lymphocytes T tueurs ciblent et détruisent les cellules infectées. La gravité de la maladie peut dépendre de la force de ces réponses des lymphocytes T(1).

Les études sur les réponses humorales aux infections ont été principalement orientées vers la production d'anticorps IgG de haute affinité qui résolvent efficacement une infection. Il a été bien reconnu, cependant, que la réponse immunitaire humorale à l'infection peut être une arme à double tranchant qui soit sert de mécanisme de protection pour résoudre l'infection, soit aggrave la lésion tissulaire, par ex. La réponse IgG provoque des lésions pulmonaires aiguës mortelles en faussant la réponse de résolution de l'inflammation dans le SRAS.(8)

Dans le cas d'une infection respiratoire, alors que les isotypes IgM et IgG ont été le principal élément de caractérisation de l'immunité, les réponses IgA muqueuses et systémiques qui peuvent jouer un rôle critique dans la pathogenèse de la maladie ont reçu beaucoup moins d'attention.(9),(11)

Les neutrophiles élevés dans l'infection par le covid-19 peuvent être la raison d'une réponse anticorps retardée et de complications graves

La réponse immunitaire humorale, en particulier la production d'anticorps neutralisants, joue un rôle protecteur en limitant l'infection à une phase ultérieure et empêche la réinfection à l'avenir. Dans le SRAS-CoV, les épitopes des cellules T et B ont été largement cartographiés pour les protéines structurelles, les protéines S, N, M et E.(12) Des détails sérologiques limités du SRAS-CoV-2 ont été rapportés. Dans une étude préliminaire, un patient a montré un pic d'IgM spécifique au jour 9 après le début de la maladie et le passage à l'IgG à la semaine 2.25 Fait intéressant, les sérums de 5 patients atteints de COVID-19 confirmé montrent une certaine réactivité croisée avec le SRAS-CoV, mais pas avec d'autres coronavirus . De plus, tous les sérums de patients ont pu neutraliser le SRAS-CoV-2 dans un test de plaque in vitro, suggérant une éventuelle montée réussie des réponses humorales.(13) Il reste à déterminer si la cinétique/le titre d'un anticorps spécifique est corrélé à la gravité de la maladie.(14)

Dans les cas graves de maladie à coronavirus 2019 (COVID-19), la pneumonie virale évolue vers une insuffisance respiratoire. Les pièges extracellulaires des neutrophiles (NET) sont des toiles extracellulaires de chromatine, de protéines microbicides et d'enzymes oxydantes qui sont libérées par les neutrophiles pour contenir les infections. Cependant, lorsqu'elles ne sont pas correctement régulées, les TNE ont le potentiel de propager l'inflammation et la thrombose microvasculaire - y compris dans les poumons des patients atteints du syndrome de détresse respiratoire aiguë. Alors que des niveaux élevés de neutrophiles sanguins prédisent de pires résultats dans le COVID-19, le rôle des TNE n'a pas été étudié. Nous rapportons maintenant que les sérums de patients atteints de COVID-19 (n = 50 patients, n = 84 échantillons) ont des niveaux élevés d'ADN acellulaire, de myéloperoxydase (MPO) -ADN et d'histone H3 citrullinée (Cit-H3); les deux derniers sont des marqueurs hautement spécifiques des TNE.(15)

Les neutrophiles sont des cellules sophistiquées capables de s'adapter à l'évolution de l'inflammation

Les neutrophiles ne sont pas de simples sacs d'enzymes envoyés pour tuer les agents pathogènes avant que les cellules immunitaires adaptatives n'interviennent. En fait, ils sont capables de répondre à un état inflammatoire altéré ; les neutrophiles peuvent produire des cytokines, modifier leur expression génique pendant l'inflammation et tout au long du "vieillissement" et survivre beaucoup plus longtemps que ce que l'on pensait traditionnellement, une étude plaçant la durée de vie de la moelle osseuse à 5,4 jours. En conséquence, les neutrophiles sont capables de s'adapter à des conditions changeantes et de diriger le comportement d'autres cellules, une tâche qu'ils peuvent accomplir avec une certaine sophistication.

Il existe un certain nombre de modèles murins dans lesquels les réponses des lymphocytes T peuvent être exacerbées par l'épuisement des neutrophiles, ce qui implique qu'ils ont un rôle régulateur . Cette suppression des réponses des lymphocytes T par les neutrophiles nécessite un contact étroit et le développement d'une synapse immunologique - peut-être que les médiateurs supposés responsables, les espèces réactives de l'oxygène et H2O2 ne diffusent pas loin. L'absorption de neutrophiles apoptotiques ou nécrotiques inhibe également la présentation et la co-stimulation de l'antigène DC, ce qui entraîne une réduction des réponses des lymphocytes T - une situation qui peut être exploitée par des agents pathogènes. Par exemple, les neutrophiles capturent L. major et sont ensuite engloutis par les DC, supprimant la présentation de l'antigène et l'amorçage des lymphocytes T

Il a également été démontré que la NE inhibe la maturation et la fonction des cellules dendritiques, y compris l'expression des molécules costimulatrices CD40, CD80 et CD86. Les sécrétions pulmonaires inflammatoires inhibent la maturation et la fonction des cellules dendritiques via l'élastase neutrophile.(16)

Inhibiteur de l'élastase dans l'infection au covid-19 :

1. Alvelestat a été développé pour le traitement de maladies pulmonaires telles que la maladie pulmonaire obstructive chronique. Alevelestat agit en bloquant certaines protéines du corps qui sont responsables de l'inflammation et des dommages aux poumons pouvant entraîner des symptômes de MPOC.

   Alvelestat Inhibitor of elastase stimule la différenciation des lymphocytes B murins en cellules productrices d'IgG et d'IgA via la commutation de classe d'immunoglobulines et l'induction, également connue sous le nom de commutation d'isotype, de commutation isotypique ou de recombinaison par commutation de classe (CSR), est un mécanisme biologique qui modifie la production d'une cellule B d'immunoglobuline d'un type à un autre, par exemple de l'isotype IgM à l'isotype IgG

   Une étude a démontré que la déplétion des neutrophiles améliore la production d'IgA et d'IgG muqueuses après immunisation sublinguale avec la toxine de l'œdème de Bacillus anthracis comme adjuvant. Ces études antérieures ont également démontré qu'il existe une corrélation inverse entre le nombre de neutrophiles et la production d'IgA par les lymphocytes B. En utilisant des inhibiteurs spécifiques de l'élastase, nous avons examiné si l'activité élastase des neutrophiles pouvait être le facteur qui interfère avec la production d'IgA et éventuellement d'autres isotypes d'immunoglobuline. Nous avons constaté que les splénocytes murins et les cellules des ganglions lymphatiques mésentériques cultivés pendant 5 jours en présence d'inhibiteurs de l'élastase des neutrophiles sécrètent des niveaux plus élevés d'IgG et d'IgA que les cellules cultivées en l'absence d'inhibiteurs et aussi,Ce traitement a cependant augmenté la fréquence des cellules T CD4 + .(17) En tant que virus ciblé sur les muqueuses, le SRAS-CoV-2 devrait générer des IgA sécrétoires (sIgA) et induire une forte immunité muqueuse. En effet, il a été démontré que l'immunité antivirale muqueuse résulte en partie des interactions médiées par les IgA avec les micro-organismes pathogènes pour empêcher les agents pathogènes d'adhérer à la surface cellulaire.(17) La production d'IgA régulée à la hausse peut être le résultat de niveaux accrus de TGF-β et d'IL-10 qui favorisent la commutation d'anticorps dans l'infection par le SRAS-CoV-2.(17) Une étude a rapporté que la déplétion des neutrophiles avant l'injection systémique de vaccins augmentait l'ampleur des réponses des lymphocytes T CD4 + spécifiques à l'antigène et les niveaux de réponses IgG sériques spécifiques à l'antigène .(18)

   L'Alvelestat et le Sivelestat stimulent la synthèse de l'ARNm de l'AID. Les inhibiteurs de NE ont également induit l'expression des ARNm de BAFF, APRIL et IL-10 de manière dose-dépendante. Il a été démontré que l'élastase des neutrophiles et les protéases à sérine associées, la cathepsine G et la protéinase 3, régulent les réponses des cytokines par l'activation ou la dégradation des cytokines, des récepteurs des cytokines ou du récepteur de type péage.(18) Ceci est cohérent avec notre découverte selon laquelle les inhibiteurs de NE stimulent l'expression d'IL-10, mais également de BAFF et d'APRIL dans des cultures de splénocytes. Il a été rapporté que l'IL-10 régule l'expression de l'AID pour l'induction d'Ig CSR. (19) et il est bien établi que l'IL-10 facilite le changement de classe d'Ig pour la production d'IgA (20). Ainsi, ces données suggèrent que les inhibiteurs de NE stimulent la production d'anticorps par la stimulation de l'AID et l'inhibition de l'activation/dégradation des cytokines et des récepteurs de cytokines par l'élastase. Il a également été démontré que la NE inhibe la maturation et la fonction des cellules dendritiques, y compris l'expression des molécules costimulatrices CD40, CD80 et CD86.(21). Ainsi, la présence d'inhibiteurs de neutrophiles peut avoir favorisé la maturation des cellules dendritiques et leur expression BAFF et APRIL et peut-être des molécules costimulatrices (c'est-à-dire CD40) pour une production d'anticorps améliorée. Bien qu'Alvelestat et Sivelestat soient des inhibiteurs spécifiques de la NE, il convient de considérer qu'ils pourraient également inhiber des enzymes apparentées de type élastase. À cet égard, il a été rapporté que les lymphocytes B humains activés expriment une sérine protéase de type trypsine à la surface des cellules.(22) Remarques finales Il a été démontré précédemment que les défensines peptidiques des neutrophiles renforcent les réponses IgG, mais pas les réponses IgA contre les antigènes vaccinaux co-administrés par voie nasale .(23) Ici, l'étude a montré que l'activité sérine protéase de l'élastase neutrophile, et éventuellement d'autres sérine protéases telles que l'élastase des cellules B, participent également à la régulation de la biologie des cellules B et de l'immunité adaptative. Cependant, contrairement aux défensines peptidiques des neutrophiles, les NE régulent négativement la différenciation des lymphocytes B en cellules sécrétant des IgG et des IgA. La présence d'AID améliore généralement l'immunité basée sur les anticorps.(24).

   Les neutrophiles élevés chez les patients infectés par COVID -19 sont capables de causer de graves dommages au tissu pulmonaire en libérant des protéases toxiques et des espèces réactives de l'oxygène s'ils ne sont pas contrebalancés par les antiprotéases.

2. L'acide tout-trans rétinoïque (RA) a des effets bénéfiques lorsqu'il est utilisé dans une variété d'affections cutanées inflammatoires. Dans une étude, les auteurs ont découvert que l'AR inhibait la production d'anions superoxydes et la libération d'enzymes protéolytiques par les neutrophiles humains et de rat. Parallèlement, les auteurs ont découvert que les neutrophiles traités par RA étaient moins capables que les neutrophiles non traités de blesser les cellules endothéliales en culture, même si l'adhérence des neutrophiles traités par RA aux monocouches de cellules endothéliales n'était pas diminuée. L'inhibition de la cytotoxicité s'est produite sur la même plage de concentrations qui a inhibé la formation de radicaux oxygène et la libération de protéase. Dans des études supplémentaires, il a été observé que le prétraitement des cellules endothéliales avec la résistance induite par l'AR aux lésions ultérieures par les neutrophiles activés. Enfin, des études in vivo ont montré qu'un prétraitement de rats pendant 3 jours avec de la PR (1-10 mg/jour, IP) réduisait le degré de lésions dans les poumons et les sites cutanés après traitement avec de l'albumine sérique bovine et des anticorps contre l'albumine sérique bovine dans le réaction d'Arthus inverse-passive. Ainsi, la PR peut moduler la lésion des cellules endothéliales médiée par les neutrophiles par un effet à la fois sur les neutrophiles et leurs cellules cibles. Ensemble, ces effets peuvent sous-tendre la réduction des lésions médiées par les complexes immuns observées chez les animaux de laboratoire. Les effets bénéfiques des rétinoïdes dans diverses maladies cutanées inflammatoires peuvent également être le reflet de leurs effets sur la physiologie des neutrophiles et des cellules endothéliales.

Le palmitate de rétinyle oral ou l'acide rétinoïque corrige les réponses IgA muqueuses envers un vaccin intranasal contre le virus de la grippe chez des souris déficientes en vitamine a. Les rétinoïdes inhibent les réponses inflammatoires des lymphocytes T TH17, favorisent les réponses des lymphocytes T régulateurs (Treg) et régulent l'expression des récepteurs de type péage (TLR).(57)

Ainsi, l'investigateur principal s'attend à ce que l'acide rétinoïque soit plus efficace chez les patients covid -19 que l'autre inhibiteur de l'élastase neutrophile comme Alvelestat car Attia et al (2018) ont démontré que Sivelestat réduisait la sécrétion d'IgM de manière dose-dépendante, type IgM de des anticorps qui sont très importants dans la neutralisation virale et, d'autre part, l'acide rétinoïque arrête les lésions des cellules endothéliales médiées par les neutrophiles par un effet à la fois sur les neutrophiles et leurs cellules cibles.

Le médicament secondaire est l'isotrétinoïne (13cis RA) et l'ATRA peut être capable d'inhiber l'infection par COVID 2019 en induisant l'immunité antivirale et ceci est discuté comme suit :

Une étude a démontré que le 13 cis rétinoïque est utilisé dans le traitement de l'emphysème (l'emphysème est une affection pulmonaire qui provoque un essoufflement), puisqu'une réponse immunitaire efficace contre les infections virales dépend de l'activation des cellules T cytotoxiques qui peuvent éliminer l'infection en tuant les virus infectés. cellules , l'augmentation du nombre et de la fonction des cellules T chez les patients COVID-19 est essentielle pour une récupération réussie. Une étude récente a rapporté que 82,1 % des cas de COVID-19 affichaient un faible nombre de lymphocytes circulants. Un CoV infecte les macrophages, puis les macrophages présentent les antigènes du CoV aux cellules T. Ce processus conduit à l'activation et à la différenciation des lymphocytes T, y compris la production de cytokines associées aux différents sous-ensembles de lymphocytes T (Th17), suivie d'une libération massive de cytokines pour l'amplification de la réponse immunitaire. La production continue de ces médiateurs en raison de la persistance virale a un effet négatif sur l'activation des cellules NK et T CD8.(25)

Une étude récente portant sur 522 patients COVID et 40 témoins sains de deux hôpitaux de Wuhan, en Chine, a démontré que le nombre de lymphocytes T est négativement corrélé à la concentration sérique d'IL-6, d'IL-10 et de TNF-α, les patients en période de déclin montrant une IL-6 réduite , les concentrations d'IL-10 et de TNF-α et le nombre de cellules T restauré. Les cellules T des patients COVID-19 ont des niveaux significativement plus élevés de protéine de mort cellulaire programmée par marqueur épuisé (PD-1) par rapport aux témoins de santé. De plus, l'augmentation de l'expression de PD-1 et de Tim-3 sur les lymphocytes T a pu être observée au fur et à mesure que les patients progressaient des stades prodromiques aux stades manifestement symptomatiques, ce qui indique davantage l'épuisement des lymphocytes T. L'épuisement des lymphocytes T est une perte progressive de la fonction effectrice due à une stimulation antigénique prolongée, caractéristique des infections chroniques. L'inhibition des cellules dendritiques est liée à l'épuisement de la polyfonctionnalité des lymphocytes T CD8+ au cours de l'infection chronique par le virus de l'hépatite C. Les lymphocytes T CD8 produisent des médiateurs très efficaces pour éliminer le nCoV2019.(26)

Les cellules dendritiques (CD) jouent un rôle clé dans les réponses immunitaires innées et adaptatives. En tant que cellules présentatrices d'antigènes les plus puissantes de l'organisme, elles stimulent efficacement l'activation des lymphocytes T et des lymphocytes B, combinant ainsi immunité innée et adaptative. Les DC immatures ont une forte capacité de migration et les DC matures peuvent activer efficacement les lymphocytes T dans le lien central du démarrage, de la régulation et du maintien des réponses immunitaires. Ainsi, une fois que le processus de maturation des DC est bloqué, il affecte directement l'initiation de la réponse immunitaire adaptative ultérieure. Le MERS-CoV-2 est capable d'affecter les cellules dendritiques humaines et les macrophages in vitro. La réplication productive du coronavirus du syndrome respiratoire du Moyen-Orient dans les cellules dendritiques dérivées de monocytes module la réponse immunitaire innée.(27)

Une autre étude a proposé que le récepteur de chimiokine C-C de type 4 (CCR4) contribue à l'empreinte pulmonaire des lymphocytes T. Il a été constaté que les DC pulmonaires induisent l'expression de CCR4 sur les lymphocytes T. Les lymphocytes T activés par les DC pulmonaires circulent plus efficacement dans les poumons et protègent plus efficacement contre la grippe que les lymphocytes T activés par les DC d'autres tissus. Lim et ses collègues ont suggéré que CXCR4 joue un rôle dans la migration des lymphocytes T CD8+ vers les tissus des voies respiratoires.(28)

L'inhibition des cellules dendritiques est liée à l'épuisement de la polyfonctionnalité des lymphocytes T CD8+ au cours de l'infection chronique par le virus de l'hépatite C. Les lymphocytes T CD8 produisent des médiateurs très efficaces pour éliminer le nCoV2019.(29)

La présence de PR dans différents tissus est très importante pour l'induction immunitaire et la lutte contre les infections virales. Par exemple, la PR est présente à des concentrations élevées dans l'intestin grêle en raison de la métabolisation de la vitamine A alimentaire par les cellules épithéliales intestinales. Dans cet environnement local, RA active et prépare les cellules dendritiques (DC) à devenir des DC CD103+ qui produisent RA.3, 4CD103+ DC sont des cellules migratrices qui activent les lymphocytes T naïfs dans les ganglions lymphatiques mésentériques pour devenir des lymphocytes T effecteurs qui contribuent à la fois à l'homéostasie intestinale et immunité.et également RA est un signal important qui induit les cellules B productrices d'IgA. Les cellules T et les cellules B de l'intestin jouent un rôle essentiel dans la protection du tube digestif contre les agents pathogènes.(30) L'acide rétinoïque (atRA) peut inhiber l'apoptose spontanée des lymphocytes T humains activés in vitro. 13-cis RA active la production de cytokines Th2 Augmentation du nombre de cellules dendritiques circulantes.(40)

Ainsi, selon ces études précédentes, l'investigateur principal suggère que la lymphopénie et l'épuisement des lymphocytes T peuvent être dus à une infection et à une inhibition des cellules dendritiques (CD) par le MERS-CoV-2.

L'acide rétinoïque a des effets profonds sur la prolifération et la différenciation cellulaires. De plus, il a été rapporté que l'ATRA présente à la fois des effets anti-inflammatoires et immunorégulateurs. Des études récentes ont montré que l'expression de FOXP3 et la fonction immunitaire des cellules T régulatrices (Tregs) peuvent être améliorées par l'ATRA dans le système immunitaire des patients et du micro.13 L'acide rétinoïque (AR) est produit par un certain nombre de types de cellules, y compris les macrophages et les cellules dendritiques, qui expriment les déshydrogénases rétiniennes qui convertissent la vitamine A en son principal métabolite biologiquement actif, l'AR tout-trans. L'AR tout-trans se lie à ses récepteurs nucléaires d'acide rétinoïque qui sont exprimés dans les cellules lymphoïdes et agissent comme des facteurs de transcription pour réguler le homing et la différenciation cellulaire. La production de RA par les cellules dendritiques CD103+ et les macrophages alvéolaires fonctionne avec le TGF-b pour favoriser la conversion des lymphocytes T naïfs en lymphocytes T régulateurs Foxp3+ et, ainsi, maintenir la tolérance muqueuse.(50) Ainsi, le chercheur principal s'attend à une forte induction des cellules dendritiques (CD) par le traitement à l'acide rétinoïque, ce qui conduira à l'activation et à la migration des cellules T avec moins de phénomène d'épuisement.

Des chercheurs de Wenzhou, en Chine, ont examiné les caractéristiques des laboratoires cliniques, notamment les niveaux de lipides des patients atteints de COVID 19. Ils ont constaté des réductions spectaculaires des taux de cholestérol des patients infectés par le COVID 19, par rapport aux témoins sains. L'étude fournit des données suggérant que les taux de cholestérol diminuent assez rapidement au cours des premiers stades de l'infection et augmentent à mesure que le patient commence à se rétablir. Par conséquent, indiquant que le cholestérol peut avoir un rôle important à jouer dans la défense de l'organisme contre de telles infections Selon notre protocole en fonction d'études antérieures, l'investigateur principal a démontré qu'il existe une forte relation entre le système immunitaire et le taux de cholestérol. :-

Le cholestérol cellulaire est un composant de la membrane plasmique et est également essentiel à la prolifération cellulaire. La régulation des taux de cholestérol intracellulaire a été proposée comme mécanisme de régulation de la prolifération des lymphocytes T et des macrophages. Le taux de cholestérol intracellulaire est régulé par deux voies concurrentes, l'absorption et l'efflux du cholestérol, et ABCA1 joue un rôle majeur dans la voie d'efflux du cholestérol. L'ATRA induit l'expression d'ABCA1 et l'efflux de cholestérol dépendant d'ABCA1 dans les lymphocytes T CD4+ humains primaires activés, ce qui implique que la PR pourrait affecter les fonctions des lymphocytes T en régulant les taux de cholestérol cellulaire.(51) L'ATRA régule à la hausse l'expression d'ABCA1 uniquement dans les lymphocytes T CD4+ activés, ce qui indique que l'induction d'ABCA1 par l'ATRA et l'acide rétinoïque 13 cis peut jouer un rôle important dans la réponse immunitaire.

L'acide rétinoïque et l'agoniste des récepteurs X du foie inhibent de manière synergique l'infection par le VIH dans les lymphocytes T CD4+ en régulant à la hausse l'efflux de cholestérol médié par ABCA1.(52)(53)

La PR agit également directement sur les macrophages au niveau des sites muqueux et d'autres sites immunologiques. AtRA module l'activation des macrophages péritonéaux par l'endotoxine et l'IFN-γ en supprimant la production de TNF et la synthèse d'oxyde nitrique (NO). LPS) dans les macrophages péritonéaux murins.(54)

Une étude a rapporté récemment que la substance (ATRA) a des effets préventifs sur la fibrose pulmonaire en inhibant la prolifération dépendante de l'IL-6 et la différenciation trans dépendante du TGF-β1 des fibroblastes pulmonaires. En outre, une autre étude a démontré que l'acide 13-cis-rétinoïque et d'autres analogues de rétinoïdes inhibent la production d'IL-6 induite par l'IL-1 et que cet effet est spécifique de l'analogue et, au moins partiellement, médié par la transcription. Cet effet était dose-dépendant avec une IC50 de 10(-7) M RA et une inhibition significative étant notée avec des doses de RA aussi faibles que 10(-8) M. La production d'IL-10 était inhibée par l'administration d'ATRA.(55)

Une étude a démontré que les souris TLR3(-/-), TLR4(-/-) et TRAM(-/-) sont plus sensibles au SRAS-CoV que les souris de type sauvage, mais ne subissent qu'une perte de poids transitoire sans mortalité en réponse à infection. En revanche, les souris déficientes en TRIF adaptateur TLR3/TLR4 sont très sensibles à l'infection par le SRAS-CoV, montrant une perte de poids accrue, une mortalité, une fonction pulmonaire réduite, une pathologie pulmonaire accrue et des titres viraux plus élevés . De nouvelles études ont montré que le niveau élevé d'IFN-α/β produit à partir de la voie TLR3-IRF3/IRF7 et de l'IFN-β est la raison de l'inhibition de la réplication du DENV. L'acide 13Cis rétinoïque a induit une régulation à la hausse significative du récepteur de type péage 3 (TLR3), entraînant une réponse immunitaire à l'intermédiaire d'ARNdb qui peut être partiellement généré lors de la réplication du CoV-2. activé pour produire des IFN de type I.(56)

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Le palmitate de rétinyle oral ou l'acide rétinoïque corrige les réponses IgA muqueuses envers un vaccin intranasal contre le virus de la grippe chez des souris déficientes en vitamine a. Les rétinoïdes inhibent les réponses inflammatoires des lymphocytes T TH17, favorisent les réponses des lymphocytes T régulateurs (Treg) et régulent l'expression des récepteurs de type péage (TLR).(57) Le traitement in vitro de monocytes humains normaux avec de l'acide tout-trans rétinoïque (ATRA) régule à la baisse l'expression de TLR-2 (58), mais cet effet n'a pas été examiné chez les patients traités avec des rétinoïdes systémiques. L'isotrétinoïne (acide 13-cis rétinoïque ; 13-cis RA) est le seul médicament capable d'induire une rémission à long terme ou permanente de l'acné ; cependant, les mécanismes conduisant à cette réponse durable sont inconnus. Compte tenu du rôle du TLR-2 dans l'initiation des réponses immunitaires à P. acnes, nous avons émis l'hypothèse que la régulation négative du TLR-2 sur les monocytes et/ou l'induction de réponses Treg in vivo pourraient représenter des mécanismes par lesquels l'isotrétinoïne exerce ses effets à long terme. .

L'isotrétinoïne (13cis RA) peut être capable d'inhiber l'entrée de COVID 2019 via une régulation à la baisse de l'ACE2, de la protéine AT1 et de la libération de calcium intracellulaire médiée par l'Ang II plutôt que l'inhibition de l'interleukine-6 ​​(IL-6) et ceci est discuté comme suit :

De nombreux auteurs comprennent mal la différence entre les ARA, qui bloquent les récepteurs ATR1 et le médicament hypothétique qui pourrait bloquer le site de liaison COVID-19 sur le récepteur ACE2, qui est totalement différent des ATR1 et 2.

La pandémie de COVID-19 causée par le SRAS-COV-2 a infecté plus de 2 000 000 de personnes, causant plus de 150 000 décès.(59) Une protéine cellulaire clé de l'hôte requise pour l'entrée du virus est l'enzyme de conversion de l'angiotensine 2 (ACE2) dont l'expression a été démontrée dans de nombreux tissus, y compris les cellules épithéliales alvéolaires de type II dans les poumons, la muqueuse buccale et l'intestin, le cœur, les reins, l'endothélium et la peau. Les cellules exprimant l'ACE2 peuvent agir comme des cellules domestiques et sont sujettes à l'infection par le SRAS-CoV-2, car le récepteur ACE2 facilite l'entrée et la réplication virales cellulaires.(60) Une étude a démontré que les patients souffrant d'hypertension et de diabète sucré peuvent être plus à risque d'infection par le SRAS-CoV-2, car ces patients sont souvent traités avec des inhibiteurs de l'ECA (ACEI) ou des inhibiteurs des récepteurs de l'angiotensine II de type I (ARA), qui ont été suggéré précédemment pour augmenter l'expression de l'ACE2.(61) Dans une autre étude de Sinha et al qui ont analysé un ensemble de données de carte de connectivité (CMAP) accessible au public de profils pré/post transcriptomiques pour le traitement médicamenteux dans des lignées cellulaires pour plus de 20 000 petites molécules, l'isotrétinoïne était le plus puissant régulateur à la baisse des récepteurs ACE 2. D'autre part, ils ont trouvé 6 médicaments dans le CMAP qui sont actuellement à l'étude dans des essais cliniques pour le traitement du COVID-19 (chloroquine, thalidomide, méthylprednisolone, losartan, lopinavir et ritonavir, de clinictrials.gov), aucun d'entre eux ne s'est avéré altérer de manière significative l'expression de l'ACE2 (P> 0,1) De plus, une autre étude a démontré que l'isotrétinoïne est un inhibiteur potentiel de la protéase semblable à la papaïne (PLpro), qui est une protéine codée par les gènes du SRAS-CoV-2 et considérée comme l'une des protéines qui devrait être ciblée dans le traitement du COVID-19 en effectuant une simulation virtuelle basée sur la cible. dépistage des ligands. Comme l'investigateur principal l'a mentionné précédemment (13cRA) est le régulateur négatif le plus puissant de l'ACE2.

Le chercheur principal s'attend à ce que 13cRA puisse inhiber ou atténuer l'ACE2 par interaction directe et liaison avec l'ACE2 transmembranaire, suggérant son potentiel thérapeutique pour empêcher l'entrée de COVID 2019 dans la cellule hôte.

Des études antérieures sur le coronavirus du syndrome respiratoire aigu sévère (SARS-CoV) et le SARS-CoV FP FP ont montré que le calcium (Ca2+) joue un rôle important dans l'activité fusogénique via une poche de liaison Ca2+ avec de l'acide glutamique (E) et de l'acide aspartique conservés (D) les résidus ont démontré que le Ca2+ intracellulaire augmente l'infection par les MERS-CoV WT PPs d'environ deux fois et que E891 est un résidu crucial pour l'interaction Ca2+. La résonance de spin électronique a révélé que cette amélioration pouvait être attribuée à l'augmentation de l'ordre membranaire pertinent pour la fusion MERS-CoV FP de Ca2+. Curieusement, le titrage par calorimétrie isotherme a montré que le MERS-CoV FP se lie à un Ca2+, par opposition au SARS-CoV FP qui se lie à deux ions Ca2+.(62)

L'angiotensine II augmente l'activité calcique intracellulaire dans les podocytes du glomérule intact. La nicardipine, inhibiteur des canaux Ca2+ de type L, n'a pas influencé l'augmentation [Ca2+] médiée par l'Ang II et il a été postulé que la liaison du SRAS-CoV-2 à l'ACE2 pourrait atténuer l'activité résiduelle de l'ACE2, faussant l'équilibre ACE/ACE2 vers un état de une activité accrue de l'angiotensine II entraînant une vasoconstriction pulmonaire et des lésions organiques inflammatoires et oxydatives, ce qui augmente le risque de lésion pulmonaire aiguë (ALI). AngII via les récepteurs AT1 régule à la hausse de nombreux gènes pro-inflammatoires, tels que la molécule d'adhésion cellulaire vasculaire-1 (VCAM-1), la molécule d'adhésion intercellulaire-1 (ICAM-1), l'interleukine-6 ​​(IL-6).30 mais 13cis RA a spécifiquement régulé à la baisse la protéine AT1 de manière dépendante de la dose et du temps. La régulation à la baisse de l'expression de l'AT1 entraîne une réduction de la libération de calcium intracellulaire médiée par l'AngII.

Enfin, le chercheur principal s'attend à ce que l'isotrétinoïne aide à l'induction d'anticorps contre le COVID-19 en induisant différents types de facteurs immunitaires antiviraux et également en diminuant l'hyper mutation du COVID -19 en bloquant ses récepteurs ACE2 et en empêchant le virus d'entrer et de se répliquer dans les cellules et cela donnera au système immunitaire le temps de reconnaître le COVID -19.