IL-10-, IL-12- ja IL-18-tasot parodontiittia sairastavien potilaiden ienreuman nesteessä ja terveet kontrollit

Interleukiini-10 (IL-10) on yksi tehokkaimmista anti-inflammatorisista sytokiineista, koska se indusoi T-solujen anergiaa (ei vastetta antigeenille) ja vähentää joidenkin tulehdusta edistävien sytokiinien tuotantoa. IL-10:n muuttunut ilmentyminen, geneettinen taipumus ja spesifisten parodontaalibakteerien esiintyminen voivat kuitenkin vaikuttaa Th1/Th2-tasapainon häiriintymiseen ja aggressiivisen parodontiitin kehittymiseen.

Interleukiini-12 (IL-12) on heterodimeeri, joka koostuu p35- ja p40-alayksiköistä, jotka muodostavat bioaktiivisen IL-12:n (p70). IL-12 on välttämätön varhaisen synnynnäisen immuunivasteen välittäjä ja soluimmuniteetin keskeinen indusoija. Sen tärkein tehtävä on stimuloida T-soluja ja interferoni-y:n (IFN-y) tuotantoa luonnollisissa tappajasoluissa, mikä edistää Th1-vasteita. IL-12:n merkitys ei rajoitu immuunivasteen käynnistämiseen, vaan se voi edistää immuniteetin ylläpitämistä. Koska IL-12:n puuttuessa Th1-vasteet menetetään nopeasti.

Interleukiini-18 (IL-18) on tulehdusta edistävä sytokiini, joka kuuluu IL-1-sytokiiniperheeseen. Tämä sytokiini tunnistettiin alun perin luonnolliseksi tappajaksi ja sytokiiniksi, joka indusoi T-solujen tuottamaa IFN-y:ta. IL-18 toimii synergistisesti IL-12:n kanssa tukeakseen IFN-y:n tuotantoa ja Th1-solujen kasvua, mutta sen aktiivisuus ei ole riippuvainen IL-12:sta.

Kun nämä tiedot kootaan yhteen, tutkimuksemme tarkoituksena on ollut arvioida ikenen poimunesteen IL-10-, IL-12- ja IL-18-pitoisuuksien vaikutuksia parodontaaliin yhdessä kliinisten parametrien kanssa.

Suunnitelman mukaan otetaan mukaan 30 periodontaalisesti tervettä henkilöä, joilla on aste B-C vaiheen III-IV parodontiitti vuoden 2017 periodontaali- ja peri-implanttitautien ja -tilojen luokituksen mukaan ja jotka hakivat Istanbulin yliopiston hammaslääketieteen tiedekunnan parodontologian osastolle kliinisten ja röntgentutkimusten jälkeen. Kaikille mukana oleville henkilöille tiedotetaan tutkimuksen tarkoituksesta ja menetelmästä ja heidän suostumuksensa hankitaan.

Ennen tutkimusta varmistetaan, että henkilön suun tila ei johdu muusta tekijästä (tuntematon systeeminen sairaus, verisairaus tms.). Tutkimukseen osallistuneet henkilöt; systeeminen ja oraalinen anamneesi, tupakointitila, systeeminen sairaustila kirjataan ja tehdään seuraavat kliiniset mittaukset.

Tutkimusmalliin soveltuvilta henkilöiltä otetaan gingival crevicular neste (GCF) näytteet ja parodontaaliindeksit kirjataan. IL-10-, IL-12- ja IL-18-tasot määritetään otetuista GCF-näytteistä. Tutkija ei ota mukaan henkilöitä, jotka on otettu mukaan muihin eettisen toimikunnan läpäisseisiin tai hyväksymiin tutkimuksiin, eikä tähän tutkimukseen osallistuvia henkilöitä, sitoutuu olemaan sisällyttämättä sitä työhönsä.

Kliiniset mittaukset sisältävät plakkiindeksin (PI), ienindeksin (GI), verenvuoto koetuksella (BOP), mittaussyvyys (PD), vapaa ienmarginaali (FGM), kliinisen kiinnittymisen tason mittaus (CAL), liikkuvuusparametrit. Sama tutkija teki mittaukset kuudesta eri pisteestä kaikista hampaista: mesio-bukkaalinen, mid-buccal, disto-buccal, mesio-lingual/palatinal, mid-lingual/palatinal, disto-lingual/palatinal. Sen mittaa ja tallentaa yksi henkilö Williams (Hu-Friedy, USA) -tyyppisellä periodontaalisella anturin avulla. Nämä mittaukset ovat ei-invasiivisia ja niiden avulla voimme määrittää parodontaalin tilan. Sisällytämiskriteerit täyttäneiden ja vapaaehtoisen suostumuslomakkeen allekirjoittaneiden potilaiden kliinisen tutkimuksen ja mittausten jälkeen analysoidaan potilailta otettavat ienpoistonestenäytteet ja arvioidaan tulokset. Näytteet eristetään ienurasta imukykyisten paperiliuskojen avulla (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA) ja ELISA-menetelmällä saaduista näytteistä tehdään biokemialliset analyysit julkaisun sisältämien protokollien mukaisesti. pakki. Biokemialliset analyysit tehdään Istanbulin yliopiston Istanbulin lääketieteellisen tiedekunnan lääketieteellisen biokemian laitoksella.

Tutkimuksessa käytettävät kliiniset arviointimenetelmät on lueteltu alla:

1. Plakkiindeksi
2. Tutkimussyvyys
3. Verenvuoto koettimessa
4. Kliinisen kiintymyksen tason mittaus
5. Ilmainen ienmarginaali
6. Ienindeksi
7. Liikkuvuus Näytteet paperiliuskoista (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA), jotka on asetettu ienuraan, sijoitetaan eppendorf-putkiin laboratoriotutkimuksia varten istunnon aikana 1 viikko sen jälkeen, kun hampaiden tarkka tila on määritetty periodontaalisten mittausten avulla. Näytteet otetaan alueilta, joilla on suurin mahdollinen taskusyvyys. Ienpoistonestenäytteitä otettaessa alue eristetään vanulappuilla ja hampaan mikrobinen hammasplakki poistetaan vanupelleteillä, minkä jälkeen tehdään lyhytaikainen kuivaus ilmanraikastimella 20 cm etäisyydeltä klo. suora kulma. Sitten standardinmukaiset imukykyiset 2x8 mm paperinauhat asetetaan likimääräisiltä alueilta uran sisääntuloon kevyesti vastustaen ja 30 sekunnin odotuksen jälkeen jokainen paperiliuska asetetaan eppendorf-putkeen ja säilytetään -80 °C:ssa. (New Brunswick Scientific Ultra Low Temperature Freezer). Jokaiselta potilaalta otetaan näytteet 6 hampaasta.

Jos ienurasta vuotaa verta näytteenoton aikana, näytettä ei oteta tältä alueelta.

GCF-näytteet, jotka on otettu ja säilytetty -80 °C:ssa, analysoidaan Istanbulin yliopiston Istanbulin lääketieteellisen tiedekunnan lääketieteellisen biokemian laitoksella. GCF-näytteiden IL-10-, IL-12- ja IL-18-tasot määritetään ELISA-menetelmällä.

Aineiston valossa verrataan potilaiden kliinisiä tiloja ja biokemiallisia analyysejä sekä selvitetään niiden välistä suhdetta.

Vuoden 2017 periodontaalisten ja peri-implantaattien sairauksien ja tilojen luokituksen mukaan interleukiinibiomarkkereista saatujen tulosten välillä on keskimäärin 11 yksikköä eroa B-C vaiheen III-IV periodontiittia sairastavien henkilöiden ja terveiden yksilöiden ryhmässä sekä minimaalisen näytteen välillä. löydä arvioitu 15 yksikön keskihajonnan merkitsevä koko (olettaen tyypin I virhe 5 %, tyypin II virhe 20 % olettaen, että teho on 0,80): 30 henkilöä jokaisessa ryhmässä. Väärät näytteet huomioon ottaen kuhunkin ryhmään otetaan 30+30 henkilöä (30 tervettä kontrollia, 30 parodontiittitapausta) Tutkimuksemme tehdään systeemisesti terveillä 18-65-vuotiailla potilailla, joilla on diagnosoitu asteen B-C vaiheen III-IV parodontiitti. Istanbulin yliopiston hammaslääketieteellisen tiedekunnan parodontologian klinikan 2017 periodontaali- ja peri-implanttisairauksien ja -tilojen luokituksen mukaan.

Sisällytämiskriteerit täyttäneiden ja vapaaehtoisen suostumuslomakkeen allekirjoittaneiden potilaiden kliinisen tutkimuksen ja mittausten jälkeen analysoidaan potilailta otetut ienhaarukan nestenäytteet ja arvioidaan tulokset. Näytteet eristetään ikenen raosta imukykyisen periopaperin avulla ja analysoidaan biokemiallisesti ELISA-sarjoilla.

Parodontiittiryhmä:

• 18-65 vuotta vanha
• Ei mitään systeemistä sairautta (taudit, jotka eivät vaikuta parodontaaliin)
• Tupakoimaton
• Et ole saanut antibioottihoitoa ja/tai käyttänyt immunosuppressiivisia lääkkeitä viimeisen 6 kuukauden aikana
• En ole saanut parodontaalihoitoa viimeisen 6 kuukauden aikana
• Ei raskautta ja imetystä
• Ei käytä säännöllisesti mitään lääkkeitä
• Vähintään 20 hammasta
• Asteen B-C vaiheen III-IV periodontaalinen sairaus 2017 periodontaalisten ja peri-implantaattien sairauksien ja tilojen luokituksen mukaan

Terve ryhmä:

Istanbulin yliopiston hammaslääketieteellisen tiedekunnan parodontologian osastolle hakeneilla potilailla tutkimukseen otetaan parodontologisesti terveet henkilöt, jotka eivät täytä yllä mainittuja sairauden kriteerejä ja joilla ei ole millään tavalla esiintynyt parodontiittia. Koostui henkilöistä, joilla oli kliinisesti terve ikenen ehjällä parodontiumilla ja joiden BOP-pistemäärä oli alle 10 % ja PD ≤ 3 mm, ei osoittanut kiinnittymisen menetystä tai radiografista luun menetystä.