Niveaux d'IL-10, d'IL-12 et d'IL-18 dans le liquide créviculaire gingival de patients atteints de parodontite et de témoins sains

L'interleukine-10 (IL-10) est l'une des cytokines anti-inflammatoires les plus puissantes, car elle induit une anergie des lymphocytes T (non-réactivité à un antigène) et réduit la production de certaines cytokines pro-inflammatoires. Cependant, une expression altérée de l'IL-10, une prédisposition génétique et la présence de bactéries parodontales spécifiques peuvent contribuer à la perturbation de l'équilibre Th1/Th2 et au développement d'une parodontite agressive.

L'interleukine-12 (IL-12) est un hétérodimère composé de sous-unités p35 et p40, qui forment l'IL-12 bioactive (p70). L'IL-12 est un médiateur essentiel de la réponse immunitaire innée précoce et un inducteur clé de l'immunité cellulaire. Sa tâche la plus importante est de stimuler la production de lymphocytes T et d'interféron-γ (IFN-γ) par les cellules tueuses naturelles, favorisant ainsi les réponses Th1. L'importance de l'IL-12 ne se limite pas à initier une réponse immunitaire, elle peut contribuer au maintien de l'immunité. Parce qu'en l'absence d'IL-12, les réponses Th1 sont rapidement perdues.

L'interleukine-18 (IL-18) est une cytokine pro-inflammatoire appartenant à la famille des cytokines IL-1. Cette cytokine a été identifiée à l'origine comme un tueur naturel et une cytokine qui induit l'IFN-γ produit par les cellules T. L'IL-18 agit en synergie avec l'IL-12 pour soutenir la production d'IFN-γ et la croissance des cellules Th1, mais ne dépend pas de l'IL-12 pour son activité.

Lorsque ces informations sont réunies, l'évaluation des effets des concentrations d'IL-10, IL-12 et IL-18 dans le liquide créviculaire gingival sur la maladie parodontale ainsi que les paramètres cliniques ont été le point de notre étude.

Il est prévu d'inclure 30 personnes en bonne santé parodontale atteintes de parodontite de stade III-IV de grade B-C selon la classification 2017 des maladies et affections parodontales et péri-implantaires, qui ont postulé au département de parodontologie de la faculté de médecine dentaire de l'Université d'Istanbul, après des évaluations cliniques et radiographiques. Toutes les personnes à inclure seront informées du but et de la méthode de l'étude et leur consentement sera obtenu.

Avant l'étude, il sera assuré que l'état bucco-dentaire de l'individu n'est causé par aucun autre facteur (maladie systémique inconnue, maladie du sang, etc.). Les personnes incluses dans l'étude ; l'anamnèse systémique et orale, le statut tabagique, l'état de la maladie systémique seront enregistrés et les mesures cliniques suivantes seront effectuées.

Des échantillons de fluide créviculaire gingival (GCF) seront prélevés sur des individus adaptés au modèle d'étude, et les indices parodontaux seront enregistrés. Les niveaux d'IL-10, IL-12 et IL-18 seront déterminés dans les échantillons de GCF prélevés. Le chercheur n'inclura pas les individus qui ont été inclus dans d'autres études qui ont réussi ou seront approuvées par le comité d'éthique, et n'inclura pas les individus qui seront inclus dans cette étude, s'engage à ne pas l'inclure dans ses travaux.

Les mesures cliniques comprennent l'indice de plaque (PI), l'indice gingival (GI), le saignement au sondage (BOP), la profondeur de sondage (PD), la marge gingivale libre (FGM), la mesure du niveau d'attachement clinique (CAL), les paramètres de mobilité. Les mesures ont été effectuées par le même chercheur à partir de six points différents de toutes les dents : mésio-buccal, médio-buccal, disto-buccal, mésio-lingual/palatinal, médio-lingual/palatinal, disto-lingual/palatinal. Elle sera mesurée et enregistrée par une seule personne avec la sonde parodontale de type Williams (Hu-Friedy, USA). Ces mesures sont non invasives et nous permettront de déterminer l'état parodontal. Après l'examen clinique et les mesures des patients répondant aux critères d'inclusion et ayant signé le formulaire de consentement volontaire, les échantillons de liquide gingival à prélever sur les patients seront analysés et les résultats seront évalués. Des échantillons seront isolés du sillon gingival à l'aide de bandes de papier absorbant (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA) et des analyses biochimiques seront effectuées sur les échantillons obtenus par la méthode ELISA conformément aux protocoles inclus dans le trousse. Les analyses biochimiques seront effectuées à l'Université d'Istanbul, Faculté de médecine d'Istanbul, Département de biochimie médicale.

Les méthodes d'évaluation clinique qu'il est prévu d'appliquer dans l'étude sont énumérées ci-dessous :

1. Index des plaques
2. Profondeur de sondage
3. Saignement au sondage
4. Mesure du niveau d'attachement clinique
5. Marge gingivale libre
6. Index gingival
7. Mobilité Des échantillons de bandes de papier (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA) placés dans la rainure gingivale seront placés dans des tubes Eppendorf pour examen en laboratoire au cours de la session 1 semaine après que l'état parodontal exact aura été déterminé par des mesures parodontales. Les échantillons seront prélevés dans les zones présentant la profondeur de poche probable la plus profonde. Lors de l'obtention d'échantillons de fluide créviculaire gingival, la zone sera isolée avec des tampons de coton et la plaque dentaire microbienne sur la dent sera éliminée avec des boulettes de coton, puis un processus de séchage à court terme sera effectué avec un assainisseur d'air à une distance de 20 cm à un angle droit. Ensuite, des bandes de papier absorbant standard de 2x8 mm seront placées des régions proximales à l'entrée de la rainure avec une légère résistance et après avoir attendu 30 secondes, chaque bande de papier sera placée dans un tube eppendorf et stockée à -80°C. (Congélateur à ultra basse température New Brunswick Scientific). Des échantillons seront prélevés sur 6 dents chez chaque patient.

En cas de saignement de la rainure gingivale lors du prélèvement de l'échantillon, l'échantillon ne sera pas prélevé dans cette zone.

Les échantillons de GCF prélevés et stockés à -80 °C seront analysés à l'Université d'Istanbul, Faculté de médecine d'Istanbul, Département de biochimie médicale. Les niveaux d'IL-10, IL-12 et IL-18 des échantillons de GCF seront déterminés par la méthode ELISA.

À la lumière des données, les conditions cliniques et les analyses biochimiques des patients seront comparées et la relation entre elles sera examinée.

Selon la classification des maladies et affections parodontales et péri-implantaires de 2017, une différence moyenne de 11 unités entre les résultats obtenus à partir des biomarqueurs d'interleukine dans le groupe d'individus atteints de parodontite de stade III-IV de grade B-C et les individus sains, et un échantillon minimal pour trouver la taille significative estimée de l'écart type de 15 unités (en supposant une erreur de type I de 5 %, une erreur de type II de 20 % en supposant une puissance de 0,80) : 30 personnes pour chaque groupe. En considérant les mauvais échantillons, 30+30 personnes seront prises dans chaque groupe (30 témoins sains, 30 cas de parodontite) Notre étude sera menée sur des patients systémiquement sains âgés de 18 à 65 ans qui ont été diagnostiqués avec une parodontite de stade III-IV de grade B-C selon la classification 2017 des maladies et affections parodontales et péri-implantaires de la clinique de parodontologie de la faculté de médecine dentaire de l'université d'Istanbul.

Après l'examen clinique et les mesures des patients répondant aux critères d'inclusion et ayant signé le formulaire de consentement volontaire, les échantillons de liquide gingival créviculaire prélevés sur les patients seront analysés et les résultats seront évalués. Les échantillons seront isolés de la crevicule gingivale à l'aide du papier absorbant et analysés biochimiquement avec des kits ELISA.

Groupe parodontite :

• 18-65 ans
• Ne pas avoir de maladie systémique (maladies qui n'affectent pas l'état parodontal)
• Non fumeur
• N'ont pas reçu de traitement antibiotique et/ou utilisé de médicaments immunosuppresseurs au cours des 6 derniers mois
• N'avoir reçu aucun traitement parodontal au cours des 6 derniers mois
• Pas de grossesse et d'allaitement
• Ne pas utiliser de médicaments régulièrement
• Avoir au moins 20 dents
• Maladie parodontale de grade B-C stade III-IV selon la classification 2017 des maladies et affections parodontales et péri-implantaires

Groupe sain :

Chez les patients qui ont postulé à la Faculté de médecine dentaire de l'Université d'Istanbul, Département de parodontologie, les personnes en bonne santé parodontale qui ne répondent pas aux critères de la maladie ci-dessus, qui n'ont aucun antécédent de parodontite, seront incluses dans l'étude. Composé d'individus avec une gencive cliniquement saine sur un parodonte intact qui avaient un score BOP inférieur à 10 % et une PD ≤ 3 mm, n'ont montré aucune perte d'attache ou perte osseuse radiographique.