Niveles de IL-10, IL-12 e IL-18 en el líquido crevicular gingival de pacientes con periodontitis y controles sanos

La interleucina-10 (IL-10) es una de las citocinas antiinflamatorias más potentes, ya que induce la anergia de las células T (falta de respuesta a un antígeno) y reduce la producción de algunas citocinas proinflamatorias. Sin embargo, la expresión alterada de IL-10, la predisposición genética y la presencia de bacterias periodontales específicas pueden contribuir a la alteración del equilibrio Th1/Th2 y al desarrollo de periodontitis agresiva.

La interleucina-12 (IL-12) es un heterodímero compuesto por las subunidades p35 y p40, que forman la IL-12 bioactiva (p70). IL-12 es un mediador esencial de la respuesta inmune innata temprana y un inductor clave de la inmunidad celular. Su tarea más importante es estimular las células T y la producción de interferón-γ (IFN-γ) por parte de las células asesinas naturales, promoviendo así las respuestas Th1. La importancia de la IL-12 no se limita a iniciar una respuesta inmunitaria, sino que puede contribuir al mantenimiento de la inmunidad. Porque en ausencia de IL-12, las respuestas Th1 se pierden rápidamente.

La interleucina-18 (IL-18) es una citocina proinflamatoria que pertenece a la familia de citocinas IL-1. Esta citocina se identificó originalmente como un asesino natural y una citocina que induce el IFN-γ producido por las células T. IL-18 actúa sinérgicamente con IL-12 para apoyar la producción de IFN-γ y el crecimiento de células Th1, pero no depende de IL-12 para su actividad.

Cuando se reúne esta información, la evaluación de los efectos de las concentraciones de IL-10, IL-12 e IL-18 en el fluido crevicular gingival sobre la enfermedad periodontal junto con los parámetros clínicos ha sido el punto de nuestro estudio.

Está previsto incluir a 30 personas periodontalmente sanas con periodontitis grado B-C estadio III-IV de acuerdo con la Clasificación de enfermedades y afecciones periodontales y periimplantarias de 2017, que solicitaron al Departamento de Periodoncia de la Facultad de Odontología de la Universidad de Estambul, después de evaluaciones clínicas y radiográficas. Se informará a todas las personas que se incluirán sobre el propósito y el método del estudio y se obtendrá su consentimiento.

Previo al estudio, se asegurará que la condición bucal del individuo no esté provocada por ningún otro factor (enfermedad sistémica desconocida, enfermedad de la sangre, etc.). Las personas incluidas en el estudio; Se registrará la anamnesis sistémica y oral, el tabaquismo, el estado de la enfermedad sistémica y se realizarán las siguientes mediciones clínicas.

Se tomarán muestras de líquido crevicular gingival (GCF) de individuos adecuados para el modelo de estudio y se registrarán los índices periodontales. Los niveles de IL-10, IL-12 e IL-18 se determinarán en las muestras de GCF tomadas. El investigador no incluirá personas que hayan sido incluidas en otros estudios que hayan sido aprobados o serán aprobados por el comité de ética, y no incluirá personas que serán incluidas en este estudio, se compromete a no incluirlo en su trabajo.

Las mediciones clínicas incluyen índice de placa (PI), índice gingival (GI), sangrado al sondaje (BOP), profundidad de sondaje (PD), margen gingival libre (FGM), medición del nivel de inserción clínica (CAL), parámetros de movilidad. Las mediciones fueron realizadas por el mismo investigador en seis puntos diferentes de todos los dientes: mesio-bucal, medio-bucal, disto-bucal, mesio-lingual/palatino, medio-lingual/palatino, disto-lingual/palatino. Será medido y registrado por una sola persona con la sonda periodontal tipo Williams (Hu-Friedy, EE. UU.). Estas medidas no son invasivas y nos permitirán determinar el estado periodontal. Después del examen clínico y las mediciones de los pacientes que cumplieron con los criterios de inclusión y firmaron el consentimiento voluntario, se analizarán las muestras de líquido crevicular gingival a tomar de los pacientes y se evaluarán los resultados. Las muestras se aislarán del surco gingival con la ayuda de tiras de papel absorbente (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, EE. UU.) y se realizarán análisis bioquímicos en las muestras obtenidas por el método ELISA de acuerdo con los protocolos incluidos en el equipo. Los análisis bioquímicos se llevarán a cabo en la Universidad de Estambul, Facultad de Medicina de Estambul, Departamento de Bioquímica Médica.

Los métodos de evaluación clínica que se planea aplicar en el estudio se enumeran a continuación:

1. Índice de placa
2. Profundidad de sondeo
3. Sangrado al sondaje
4. Medición del nivel de apego clínico
5. Margen gingival libre
6. Índice gingival
7. Movilidad Las muestras de tiras de papel (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, EE. UU.) colocadas en el surco gingival se colocarán en tubos eppendorf para examen de laboratorio en la sesión 1 semana después de determinar el estado periodontal exacto mediante mediciones periodontales. Las muestras se tomarán de las áreas con la mayor profundidad probable de bolsa. Mientras se obtienen muestras de líquido crevicular gingival, se aislará la zona con algodón y se eliminará la placa dental microbiana del diente con bolitas de algodón, y luego se realizará un proceso de secado de corta duración con ambientador a una distancia de 20 cm. un ángulo recto Luego, se colocarán tiras de papel absorbente estándar de 2x8 mm desde las regiones proximales hasta la entrada del surco con una ligera resistencia y después de esperar 30 segundos, cada tira de papel se colocará en un tubo eppendorf y se almacenará a -80°C. (Congelador de ultra baja temperatura de New Brunswick Scientific). Se tomarán muestras de 6 dientes de cada paciente.

En caso de sangrado del surco gingival durante la toma de muestra, no se tomará la muestra de esa zona.

Las muestras de GCF tomadas y almacenadas a -80 °C se analizarán en la Universidad de Estambul, Facultad de Medicina de Estambul, Departamento de Bioquímica Médica. Los niveles de IL-10, IL-12 e IL-18 de las muestras de GCF se determinarán mediante el método ELISA.

A la luz de los datos, se compararán las condiciones clínicas y los análisis bioquímicos de los pacientes y se examinará la relación entre ellos.

Según la Clasificación de Enfermedades y Afecciones Periodontales y Periimplantarias de 2017, una diferencia media de 11 unidades entre los resultados obtenidos de biomarcadores de interleucina en el grupo de individuos con periodontitis grado B-C estadio III-IV e individuos sanos, y una muestra mínima para encuentre el tamaño significativo de la desviación estándar estimada de 15 unidades (suponiendo un error de tipo I del 5 %, un error de tipo II del 20 % suponiendo una potencia de 0,80): 30 personas para cada grupo. Teniendo en cuenta las muestras incorrectas, se tomarán 30+30 personas en cada grupo (30 controles sanos, 30 casos de periodontitis) Nuestro estudio se llevará a cabo en pacientes sistémicamente sanos de 18 a 65 años que fueron diagnosticados con periodontitis grado B-C estadio III-IV según la Clasificación de Enfermedades y Condiciones Periodontales y Periimplantarias de 2017 en la Clínica de Periodoncia de la Facultad de Odontología de la Universidad de Estambul.

Después del examen clínico y las mediciones de los pacientes que cumplieron con los criterios de inclusión y firmaron el consentimiento voluntario, se analizarán las muestras de líquido crevicular gingival tomadas de los pacientes y se evaluarán los resultados. Las muestras serán aisladas del crevicular gingival con la ayuda del papel perioabsorbente y analizadas bioquímicamente con kits ELISA.

Grupo de periodontitis:

• 18-65 años
• No tener ninguna enfermedad sistémica (enfermedades que no afectan el estado periodontal)
• No fumador
• No haber recibido tratamiento antibiótico y/o usado medicación inmunosupresora en los últimos 6 meses
• No haber recibido ningún tratamiento periodontal en los últimos 6 meses
• Sin embarazo y lactancia.
• No usar ningún medicamento regularmente
• Tener al menos 20 dientes
• Enfermedad periodontal grado B-C estadio III-IV según la Clasificación de Enfermedades y Condiciones Periodontales y Periimplantarias de 2017

Grupo Saludable:

En los pacientes que postularon a la Facultad de Odontología de la Universidad de Estambul, Departamento de Periodoncia, se incluirán en el estudio individuos periodontalmente sanos que no cumplan con los criterios de enfermedad anteriores, que no tengan antecedentes de periodontitis de ninguna manera. Consistió en individuos con encía clínicamente sana en un periodonto intacto que tenían una puntuación BOP inferior al 10 % y PD≤3 mm, sin pérdida de inserción ni pérdida ósea radiográfica.