IL-10, IL-12 og IL-18 niveauer i tandkødscrevikulær væske hos patienter med paradentose og sunde kontroller

Interleukin-10 (IL-10) er et af de mest potente anti-inflammatoriske cytokiner, da det inducerer T-celle-anergi (ikke-responsivitet over for et antigen) og reducerer produktionen af ​​nogle pro-inflammatoriske cytokiner. Ændret ekspression af IL-10, genetisk disposition og tilstedeværelsen af ​​specifikke periodontale bakterier kan imidlertid bidrage til forstyrrelsen af ​​Th1/Th2 balancen og udviklingen af ​​aggressiv parodontitis.

Interleukin-12 (IL-12) er en heterodimer bestående af p35- og p40-underenheder, som danner det bioaktive IL-12 (p70). IL-12 er en væsentlig mediator af det tidlige medfødte immunrespons og en nøgleinducer af cellulær immunitet. Dens vigtigste opgave er at stimulere T-celler og interferon-γ (IFN-γ) produktion af naturlige dræberceller og derved fremme Th1-reaktioner. Vigtigheden af ​​IL-12 er ikke begrænset til at initiere et immunrespons, det kan bidrage til opretholdelse af immunitet. Fordi i fravær af IL-12, går Th1-responser hurtigt tabt.

Interleukin-18 (IL-18) er et pro-inflammatorisk cytokin, der tilhører IL-1 cytokinfamilien. Dette cytokin blev oprindeligt identificeret som en naturlig dræber og et cytokin, der inducerer IFN-y produceret af T-celler. IL-18 virker synergistisk med IL-12 for at understøtte IFN-y-produktion og Th1-cellevækst, men er ikke afhængig af IL-12 for dets aktivitet.

Når denne information er samlet, har evalueringen af ​​virkningerne af IL-10, IL-12 og IL-18 koncentrationer i tandkødscrevikulær væske på parodontal sygdom sammen med kliniske parametre været pointen i vores undersøgelse.

Det er planlagt at inkludere 30 parodontalt raske individer med grad B-C stadium III-IV parodontitis i henhold til 2017-klassifikationen af ​​periodontale og peri-implantatsygdomme og tilstande, som søgte til Istanbul Universitets Odontologiske Fakultet Parodontologisk Afdeling efter kliniske og radiografiske evalueringer. Alle personer, der skal inkluderes, vil blive informeret om formålet og metoden med undersøgelsen, og deres samtykke vil blive indhentet.

Før undersøgelsen vil det blive sikret, at individets orale tilstand ikke er forårsaget af nogen anden faktor (ukendt systemisk sygdom, blodsygdom osv.). De personer, der indgår i undersøgelsen; systemisk og oral anamnese, rygestatus, systemisk sygdomsstatus vil blive registreret, og følgende kliniske målinger vil blive foretaget.

Gingival crevicular fluid (GCF) prøver vil blive taget fra personer, der er egnede til undersøgelsesmodellen, og periodontale indekser vil blive registreret. Niveauerne af IL-10, IL-12 og IL-18 vil blive bestemt i de udtagne GCF-prøver. Forskeren vil ikke medtage personer, der har indgået i andre undersøgelser, der har bestået eller vil blive godkendt af den etiske komité, og vil ikke inkludere personer, der vil indgå i denne undersøgelse, forpligter sig til ikke at inddrage det i sit arbejde.

Kliniske målinger omfatter Plaque Index (PI), Gingival Index (GI), Bleeding on Probing (BOP), Probing Depth (PD), Free Gingival Margin (FGM), Clinical Attachment Level Measurement (CAL), Mobilitetsparametre. Målingerne blev foretaget af den samme forsker fra seks forskellige punkter på alle tænder: mesio-bukkal, mid-bukkal, disto-bukkal, mesio-lingual/palatinal, midlingual/palatinal, disto-lingual/palatinal. Det vil blive målt og registreret af en enkelt person med Williams (Hu-Friedy, USA) type periodontal probe. Disse målinger er ikke-invasive og vil gøre os i stand til at bestemme den periodontale status. Efter den kliniske undersøgelse og målinger af de patienter, der opfyldte inklusionskriterierne og underskrev den frivillige samtykkeerklæring, vil de tandkødscrevikulære væskeprøver, der skal tages fra patienterne, blive analyseret, og resultaterne vil blive evalueret. Prøver vil blive isoleret fra tandkødsrillen ved hjælp af absorberende papirstrimler (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA), og der vil blive foretaget biokemiske analyser i prøverne opnået ved ELISA-metoden i overensstemmelse med protokollerne inkluderet i sæt. Biokemiske analyser vil blive udført på Istanbul Universitet, Istanbul Fakultet for Medicin, Institut for Medicinsk Biokemi.

De kliniske evalueringsmetoder, der er planlagt til at blive anvendt i undersøgelsen, er anført nedenfor:

1. Plaque Index
2. Sonderende dybde
3. Blødning ved sondering
4. Klinisk måling af tilknytningsniveau
5. Gratis tandkødsmargen
6. Gingival indeks
7. Mobilitet Prøver af papirstrimler (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA) placeret i tandkødsrillen vil blive placeret i eppendorf-rør til laboratorieundersøgelse i sessionen 1 uge efter, at den nøjagtige periodontale status er bestemt ved parodontale målinger. Der vil blive taget prøver fra områder med den dybeste sandsynlige lommedybde. Mens der tages tandkødsspaltevæskeprøver, vil området blive isoleret med vatrondeller, og den mikrobielle tandplak på tanden vil blive fjernet med bomuldspellets, og derefter vil der blive udført en kortvarig tørringsproces med luftfrisker fra 20 cm afstand kl. en ret vinkel. Derefter vil standard absorberende 2x8 mm papirstrimler blive placeret fra de omtrentlige områder til indgangen til rillen med let modstand, og efter at have ventet i 30 sekunder, vil hver papirstrimmel blive placeret i et eppendorf-rør og opbevaret ved -80°C. (New Brunswick Scientific Ultra Low Temperature Freezer). Der vil blive taget prøver fra 6 tænder i hver patient.

I tilfælde af blødning fra tandkødsrillen under prøvetagning, vil prøven ikke blive taget fra dette område.

GCF-prøver taget og opbevaret ved -80°C vil blive analyseret på Istanbul Universitet, Istanbul Medical Faculty, Institut for Medicinsk Biokemi. IL-10, IL-12 og IL-18 niveauer af GCF prøver vil blive bestemt ved ELISA metode.

I lyset af dataene vil de kliniske forhold og biokemiske analyser af patienterne blive sammenlignet, og sammenhængen mellem dem vil blive undersøgt.

Ifølge 2017-klassifikationen af ​​periodontale og periimplantatsygdomme og -tilstande er der i gennemsnit 11 enheder forskel mellem resultaterne opnået fra interleukin-biomarkører i gruppen af ​​individer med grad B-C stadium III-IV periodontitis og raske individer, og en minimal prøve til find den estimerede 15-enheder standardafvigelse signifikant størrelse (forudsat Type I fejl 5%, Type II fejl 20% under forudsætning af Power 0,80): 30 personer for hver gruppe. I betragtning af de forkerte prøver, vil 30+30 personer blive taget i hver gruppe (30 raske kontroller, 30 tilfælde af paradentose) Vores undersøgelse vil blive udført på systemisk raske patienter i alderen 18-65 år, som blev diagnosticeret med grad B-C stadium III-IV paradentose i henhold til 2017-klassificeringen af ​​periodontale og peri-implantatsygdomme og tilstande i parodontologisk klinik ved Istanbul University Fakultet for Tandlægevidenskab.

Efter den kliniske undersøgelse og målinger af de patienter, der opfyldte inklusionskriterierne og underskrev den frivillige samtykkeerklæring, vil tandkødscrevikulærvæskeprøverne fra patienterne blive analyseret, og resultaterne vil blive evalueret. Prøverne vil blive isoleret fra tandkødsspalten ved hjælp af det absorberende periopaper og biokemisk analyseret med ELISA-kits.

Parodontitis gruppe:

• 18-65 år
• Ikke at have nogen systemisk sygdom (sygdomme, der ikke påvirker den periodontale status)
• Ikke ryger
• Har ikke modtaget antibiotikabehandling og/eller brugt immunsuppressiv medicin inden for de sidste 6 måneder
• Har ikke modtaget paradentosebehandling inden for de sidste 6 måneder
• Ingen graviditet og amning
• Bruger ikke nogen medicin regelmæssigt
• At have mindst 20 tænder
• Grad B-C stadium III-IV periodontal sygdom i henhold til 2017-klassifikationen af ​​periodontale og peri-implantatsygdomme og tilstande

Sund gruppe:

Hos patienter, der har søgt ind på Istanbul Universitets Odontologiske Fakultet, Afdeling for Parodontologi, vil parodontalt raske personer, som ikke opfylder ovenstående sygdomskriterier, som ikke har en historie med parodontose på nogen måde, blive inkluderet i undersøgelsen. Bestod af individer med klinisk sund tandkød på et intakt parodontium, som havde en BOP-score på mindre end 10 % og PD≤3 mm, viste intet tilknytningstab eller radiografisk knogletab.