IL-10-, IL-12- og IL-18-nivåer i tannkjøttskrevikulærvæsken hos pasienter med periodontitt og friske kontroller

Interleukin-10 (IL-10) er et av de mest potente anti-inflammatoriske cytokinene, siden det induserer T-celle-anergi (ikke-respons på et antigen) og reduserer produksjonen av noen pro-inflammatoriske cytokiner. Endret ekspresjon av IL-10 kan imidlertid genetisk predisposisjon og tilstedeværelsen av spesifikke periodontale bakterier bidra til forstyrrelse av Th1/Th2-balansen og utvikling av aggressiv periodontitt.

Interleukin-12 (IL-12) er en heterodimer som består av p35- og p40-underenheter, som danner det bioaktive IL-12 (p70). IL-12 er en essensiell mediator for den tidlige medfødte immunresponsen og en nøkkelinduktor av cellulær immunitet. Dens viktigste oppgave er å stimulere T-celler og interferon-γ (IFN-γ) produksjon av naturlige dreperceller, og dermed fremme Th1-responser. Betydningen av IL-12 er ikke begrenset til å starte en immunrespons, den kan bidra til å opprettholde immunitet. Fordi i fravær av IL-12, går Th1-responser raskt tapt.

Interleukin-18 (IL-18) er et pro-inflammatorisk cytokin som tilhører IL-1 cytokinfamilien. Dette cytokinet ble opprinnelig identifisert som en naturlig morder og et cytokin som induserer IFN-γ produsert av T-celler. IL-18 virker synergistisk med IL-12 for å støtte IFN-y-produksjon og Th1-cellevekst, men er ikke avhengig av IL-12 for sin aktivitet.

Når denne informasjonen samles, har evalueringen av effektene av IL-10, IL-12 og IL-18 konsentrasjoner i tannkjøttskrevikulærvæsken på periodontal sykdom sammen med kliniske parametere vært poenget med vår studie.

Det er planlagt å inkludere 30 periodontalt friske individer med grad B-C stadium III-IV periodontitt i henhold til 2017-klassifiseringen av periodontale og peri-implantatsykdommer og tilstander, som søkte til Istanbul University Fakultet for Dentistry Periodontology Department, etter kliniske og radiografiske evalueringer. Alle individer som skal inkluderes vil bli informert om formålet og metoden for studien og deres samtykke vil bli innhentet.

Før studien vil det være sikret at den orale tilstanden til individet ikke er forårsaket av noen annen faktor (ukjent systemisk sykdom, blodsykdom, etc.). Personene som er inkludert i studien; systemisk og oral anamnese, røykestatus, systemisk sykdomsstatus vil bli registrert og følgende kliniske målinger vil bli utført.

Gingival crevicular fluid (GCF) prøver vil bli tatt fra individer som er egnet for studiemodellen, og periodontale indekser vil bli registrert. Nivåene av IL-10, IL-12 og IL-18 vil bli bestemt i GCF-prøvene som tas. Forskeren vil ikke inkludere personer som er inkludert i andre studier som har bestått eller skal godkjennes av etikkkomiteen, og vil ikke inkludere personer som skal inngå i denne studien, forplikter seg til ikke å inkludere den i sitt arbeid.

Kliniske målinger inkluderer plakkindeks (PI), Gingival Index (GI), Bleeding on Probing (BOP), Probing Depth (PD), Free Gingival Margin (FGM), Clinical Attachment Level Measurement (CAL), Mobilitetsparametere. Målingene ble gjort av samme forsker fra seks forskjellige punkter på alle tenner: mesio-bukkal, mid-bukkal, disto-bukkal, mesio-lingual/palatinal, midlingual/palatinal, disto-lingual/palatinal. Det vil bli målt og registrert av en enkelt person med Williams (Hu-Friedy, USA) type periodontal probe. Disse målingene er ikke-invasive og vil gjøre oss i stand til å bestemme periodontal status. Etter den kliniske undersøkelsen og målingene av pasientene som oppfylte inklusjonskriteriene og undertegnet det frivillige samtykkeskjemaet, vil tannkjøttprøvene som skal tas fra pasientene bli analysert og resultatene vil bli evaluert. Prøver vil bli isolert fra tannkjøttsporet ved hjelp av absorberende papirstrimler (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA) og biokjemiske analyser vil bli utført i prøvene oppnådd med ELISA-metoden i samsvar med protokollene inkludert i sett. Biokjemiske analyser vil bli utført ved Istanbul Universitet, Istanbul Det medisinske fakultet, Institutt for medisinsk biokjemi.

De kliniske evalueringsmetodene som er planlagt brukt i studien er listet opp nedenfor:

1. Plakettindeks
2. Undersøkende dybde
3. Blødning ved sondering
4. Klinisk måling av tilknytningsnivå
5. Gratis Gingival Margin
6. Gingivalindeks
7. Mobilitet Prøver av papirstrimler (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA) plassert i tannkjøttsporet vil bli plassert i eppendorf-rør for laboratorieundersøkelse i økten 1 uke etter at den nøyaktige periodontale status er bestemt ved periodontale målinger. Det vil bli tatt prøver fra områder med dypest sannsynlig lommedybde. Under innhenting av tannkjøttprøver vil området isoleres med bomullspads og det mikrobielle tannplakket på tannen fjernes med bomullspellets, og deretter vil det bli gjort en kortvarig tørkeprosess med luftfrisker fra 20 cm avstand kl. en rett vinkel. Deretter vil standard absorberende 2x8 mm papirstrimler plasseres fra de omtrentlige områdene til inngangen til sporet med lett motstand, og etter å ha ventet i 30 sekunder, vil hver papirstrimmel plasseres i et eppendorfrør og lagres ved -80°C. (New Brunswick Scientific Ultra Low Temperature Freezer). Det vil bli tatt prøver fra 6 tenner hos hver pasient.

Ved blødning fra tannkjøttsporet under prøvetaking vil prøven ikke tas fra det området.

GCF-prøver tatt og lagret ved -80 °C vil bli analysert ved Istanbul University, Istanbul Medical Fakultet, Institutt for medisinsk biokjemi. IL-10, IL-12 og IL-18 nivåer av GCF prøver vil bli bestemt ved ELISA metode.

I lys av dataene vil de kliniske forhold og biokjemiske analyser av pasientene bli sammenlignet og forholdet mellom dem vil bli undersøkt.

I henhold til 2017-klassifiseringen av periodontale og periimplantatsykdommer og tilstander, er det en gjennomsnittlig forskjell på 11 enheter mellom resultatene oppnådd fra interleukin-biomarkører i gruppen av individer med grad B-C stadium III-IV periodontitt og friske individer, og en minimal prøve til finn den estimerte 15-enheter standardavvik signifikant størrelse (forutsatt Type I feil 5%, Type II feil 20% forutsatt Power 0,80): 30 personer for hver gruppe. Med tanke på feil prøver, vil 30+30 personer bli tatt inn i hver gruppe (30 friske kontroller, 30 periodontitttilfeller) Vår studie vil bli utført på systemisk friske pasienter i alderen 18-65 år som ble diagnostisert med grad B-C stadium III-IV periodontitt i henhold til 2017-klassifiseringen av periodontale og peri-implantatsykdommer og tilstander i periodontologiklinikken ved Istanbul University Fakultet for odontologi.

Etter den kliniske undersøkelsen og målingene av pasientene som oppfylte inklusjonskriteriene og undertegnet det frivillige samtykkeskjemaet, vil tannkjøttprøvene tatt fra pasientene bli analysert og resultatene vil bli evaluert. Prøvene vil bli isolert fra tannkjøttspalten ved hjelp av det absorberende periopapiret og biokjemisk analysert med ELISA-sett.

Periodontitt gruppe:

• 18-65 år
• Ikke ha noen systemisk sykdom (sykdommer som ikke påvirker periodontalstatus)
• Ikke-røyker
• Har ikke fått antibiotikabehandling og/eller brukt immundempende medisin de siste 6 månedene
• Har ikke fått noen periodontal behandling de siste 6 månedene
• Ingen graviditet og amming
• Bruker ikke medisiner regelmessig
• Å ha minst 20 tenner
• Grad B-C stadium III-IV periodontal sykdom i henhold til 2017-klassifiseringen av periodontale og peri-implantatsykdommer og tilstander

Sunn gruppe:

Hos pasienter som søkte til Istanbul University Fakultet for odontologi, Institutt for periodontologi, vil periodontalt friske individer som ikke oppfyller de ovennevnte sykdomskriteriene, som ikke har en historie med periodontitt på noen måte, bli inkludert i studien. Bestod av individer med klinisk sunn gingiva på intakt periodontium som hadde en BOP-score på mindre enn 10 % og PD≤3 mm, viste ingen tap av feste eller radiografisk bentap.