Kolmen influenssarokotteen immunogeenisuuskoe

Influenssarokotteen tehokkuus vaihtelee vuosittain ja on yleensä heikoin A(H3N2) viruksen alatyyppiä vastaan, jonka geneettinen ja antigeeninen kehitys kiertävien kantojen joukossa on ollut suurinta. Vaikka rokotus voi stimuloida voimakkaita vasta-ainevasteita rokoteantigeenille, syntyneiden vasta-aineiden määrä ei ehkä riitä suojaamaan rokotettuja kaikkien kiertävien virusten aiheuttamilta infektioilta. Lisäksi rokotteen aiheuttamat vasta-ainevasteet voivat vaimentua toistuvien rokotusten jälkeen. Tähän mennessä tehdyt tutkimukset ovat kuitenkin suurelta osin tutkineet vain vasta-ainetiittereitä rokoteantigeeniä vastaan, eikä niissä ole enimmäkseen otettu huomioon rokotushistoriaa.

Viime vuosina munapohjaiseen rokotekantojen tuotantoon liittyvät ongelmat ovat pahentaneet näitä ongelmia. Influenssavirukset hankkivat yleensä substituutioita hemagglutiniini (HA) -proteiinissa mukautuakseen kananmunien kasvuun. A(H3N2)-virusten tapauksessa nämä mukautukset tekevät niistä usein antigeenisesti erilaisia ​​kuin villityypin virukset. Myöhemmin rokotteessa munasoluun mukautuneita epitooppeja vastaan ​​indusoidut vasta-aineet tarjoavat rajoitetun suojan kiertävien virusten aiheuttamaa infektiota vastaan, ja rokotteen tehokkuus on ollut hyvin alhainen. Solupohjaisia ​​rokotteita on kehitetty, joilla voidaan voittaa jotkin munanvalmistukseen liittyvät ongelmat, mutta sekä muna- että solupohjaiset rokotteet ovat riippuvaisia ​​elävien virusten kasvusta ja puhdistumisesta, jotka on inaktivoitava ja jaettava ennen kuin ne formuloidaan rokotteiksi. Kemiallinen inaktivointiprosessi häiritsee keskeisiä antigeenirakenteita ja muuttaa rokotteiden antigeenisyyttä ja siten todennäköisesti vaikuttaa rokotteen tehokkuuteen. Sanofi-yhdistelmärokote Flublok® käyttää rekombinanttiteknologiaa tuottamaan puhdistettua HA:ta pilkkoutumattomassa muodossa, joka ei pysty välittämään endosomaalista ja viruskalvofuusiota. Tärkeää on, että valmistusprosessi ei vaadi kemiallista inaktivointia, mikä tarkoittaa, että HA-proteiinit eivät ole alttiina mahdollisille silloittaville aineille, jotka voivat muuttaa rokotteen antigeenisyyttä. Lisäksi Flublok® sisältää korkeamman pitoisuuden antigeeniä kuin standardiannosrokotteet, joissa jokaista antigeeniä on 45 μg. Hiljattain tehdyssä terveiden aikuisten (18–49-vuotiaiden) vasta-ainevasteen vertailevassa analyysissä, jossa verrattiin munapohjaisia, solupohjaisia ​​ja rekombinanttisia (Flublok®) -rokotteita, havaittiin, että Flublok® johti merkittävästi korkeampiin neutraloivien vasta-aineiden tiittereihin ja että yhdistelmärokote. voi olla ominaisuuksia, jotka mahdollistavat paremman viruksen neutraloinnin perinteisiin solupohjaisiin rokotteisiin verrattuna. Sellaisenaan kliinisen tehon paraneminen voi liittyä eroihin eri rokotteiden HA:n välillä.

Tässä tutkimuksessa arvioidaan QIV-R:n (Flublok) immunogeenisyys QIV-E (Fluarix) ja QIV-C (Flucelvax) -rokotteita vastaan ​​ja tutkitaan aikaisemman rokotuksen heikentäviä vaikutuksia rokotteen immunogeenisyyteen. Kyseessä on satunnaistettu, muokattu kaksoissokkotutkimus, joka tehdään Singaporessa 360 21–49-vuotiaalla aikuisella. Satunnaistaminen ositetaan rokotushistorian mukaan, usein rokotetut (3+ rokotusta edellisten 5 vuoden aikana) vs. harvoin rokotetut (0-1 rokotus edellisten 5 vuoden aikana), jotta kunkin rokotteen vasteita verrataan. Tämän tutkimuksen tarkoituksena on ensisijaisesti arvioida QIV-R:n immunogeenisyys (arvioitu hemagglutinaation eston (HI) geometristen keskiarvojen (GMT) perusteella 14-21 päivää rokotuksen jälkeen) verrattuna QIV-E:hen ja QIV-C:hen. Rokotusta edeltävistä, rokotuksen jälkeisistä ja kauden jälkeisistä seeruminäytteistä testataan vasta-ainetiitterit neljää rokotekantaa vastaan ​​QIV-R-, QIV-C- ja QIV-E-rokotteissa HI-määrityksillä. Joillekin A(H3N2)- ja B-viruksille käytetään mikroneutralisaatiomääritystä (MN) vasta-aineiden kyvyn neutraloida viruksen tarttuvuutta arvioimiseksi. Yhden vuoden seurantajakson aikana osallistujilta, jotka ilmoittavat akuutin hengitystieinfektion (ARI) oireista, kerätään hengityspuikkoja ja testataan influenssa käyttämällä käänteistranskription reaaliaikaista polymeraasiketjureaktiota (RT-PCR). Influenssapositiiviset näytteet toimitetaan WHOCCRRI:lle viruksen karakterisointia varten. Viruksen alatyyppi (influenssa A) tai linja (influenssa B) tunnistetaan. Virukset eristetään ja testataan HI/MN- tai vastaavalla määrityksellä antigeenisen yhteensopivuuden arvioimiseksi rokotteen kanssa, ja sekvensoidaan geneettisen yhteensopivuuden arvioimiseksi rokotteen kanssa ja mahdollisten geneettisten klustereiden tunnistamiseksi. Perifeerisen veren mononukleaariset solut (PBMC:t) värjätään enintään neljällä fluoresoivalla leimatulla rekombinantti-HA-koettimella, jotka edustavat rokotekantaa ja aikaisempia A(H3N2)-rokotekantoja, sekä monoklonaalisia vasta-aineita B-solujen aktivaatio- ja erilaistumismarkkereita sekä isotyyppejä (Ig,G, Ig) vastaan. IgM, IgA, IgD) vertaillaksesi HA-reaktiivisten B-solujen kokonaisvasteen suuruutta ja HA-ristireaktiivisuusprofiileja.