Endometriumin D-vitamiinireseptori PCOS:ssä
Munasarjojen monirakkulaoireyhtymän fenotyyppiset komponentit määrittävät kohdun limakalvon D-vitamiinireseptorin mRNA-ilmentymiskuvion
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Ehdot
Interventio / Hoito
Yksityiskohtainen kuvaus
Tutkimuskysymys: Miten endometriumin D-vitamiinireseptorin ilmentyminen vaihtelee fenotyyppien mukaan naisilla, joilla on polykystinen munasarjaoireyhtymä (PCOS)?
Mitä jo tiedetään: VDR ilmentyy laajalti paitsi kalsiumin hemostaasista vastuussa olevissa kudoksissa, myös lisääntymiselimissä, mukaan lukien kohdun limakalvo. VDR, joka on alhainen proliferatiivisessa vaiheessa, alkaa nousta varhaisessa eritysvaiheessa ja laskee jälleen puolivälissä. VD:n tuotannosta ja aineenvaihdunnasta vastaavat entsyymit ilmentyvät paikallisesti kohdun limakalvossa. Aktiivisen VD:n sitoutuminen VDR:ään tuma- tai plasmakalvossa lisää vastaanoton geenin ilmentymistä ja immunomodulaattoreita aktivoimalla genomisia ja ei-genomisia reittejä. VDR-ilmentymisvika on raportoitu toistuvien keskenmenotapausten deciduaalisoluissa. Kohdun limakalvon VDR-ilmentymiskuviota PCOS:ssä ja sen fenotyypeissä ei ole tutkittu.
Tutkimuksen suunnittelu, koko, kesto: Tutkimusryhmään kuului 44 PCOS-potilasta, joille lähetettiin IVF/ICSI, koska he eivät reagoineet ensilinjan letrotsolilla tai klomifeenisitraatilla (CC). Kaksikymmentä potilasta, joille oli määrätty IVF/ICSI miesten hedelmättömyyden vuoksi ja jotka olivat iän ja BMI:n suhteen samanlaisia kuin tutkimusryhmä, otettiin mukaan kontrolliryhmään. PCOS:iksi katsottiin ne, jotka täyttivät vähintään kaksi hyperandrogenemian (HA), ovulaatiohäiriön (OD) ja munasarjojen monirakkulamorfologian (PCOM) kriteeriä, jotka European Society of Human Reproduction and Embryology / American Society for Reproductive Medicine on määrittänyt. Munasolujen keräämisen jälkeen kohdun limakalvon kudos kerättiin pipelle-kanyylillä, kun potilas oli anestesiassa. Kaikki molempien ryhmien hyvälaatuiset blastokystat lasitettiin.
Osallistujat/materiaalit, asetelma, menetelmät: PCOS-ryhmän 44 osallistujaa jaettiin neljään fenotyyppiseen ryhmään seuraavasti National Institutes of Healthin (NIH) konsensuspaneelin mukaan. Fenotyyppi A: HA+OD+PCOM (klassinen/täydellinen, n=17); fenotyyppi B: HA+OD (klassinen/ei-PCOM, n=10); fenotyyppi C: HA+PCOM (ovulaatio, n=9); ja fenotyyppi D: OD+PCOM (ei-hyperandrogeeninen, n=8). D-vitamiinireseptoritranskriptin 2 (VDR-X2) ja D-vitamiinireseptoritranskriptin 4 (VDR-X4) mRNA:n ilmentyminen määritettiin qPCR:llä. VDR-mRNA-ilmentymien välisten erojen laskemiseen käytettiin kvantitatiivista sykliyhtälömenetelmää. Endometriumin VDR ja progesteronireseptorin (PR) immunoreaktiivisuus määritettiin immunohistokemialla. Histologista pistemääräkaavaa käytettiin VDR- ja PR-immunoreaktiivisuuden kvantitatiiviseen arviointiin.
Rajoitukset, syyt varovaisuuteen: Jokaisen fenotyypin osallistujamäärän puuttuminen on ensimmäinen rajoituksemme. Koska kohdun limakalvonäytteitä kerättiin IVF/ICSI-syklissä, munasarjojen stimulaatiolääkkeiden mahdollista vaikutusta ja niihin liittyvää kohonnutta estrogeenitasoa endometriumissa ei ole suljettu pois. Muutoksia kohdun limakalvon VDR-mRNA:n ilmentymisessä ei voitu vahvistaa proteiinimittauksella.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Vaihe
- Ei sovellettavissa
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
-
Usak, Turkki, 64200
- Usak University Training and Research Hospital
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
- Aikuinen
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- PCOS:n kliininen diagnoosi
- Hyväksyntä IVF/ICSI:lle ja alkioiden täydelliselle jäädyttämiselle
- Suostumus endometriumin näytteenottoon
Poissulkemiskriteerit:
- Naiset, joilla on hyperandrogenismi tai ovulaatiohäiriö, joka johtuu muista kuin PCOS-etiologioista.
- Potilaat, jotka ovat käyttäneet D-vitamiinia, insuliiniherkistäviä aineita, rasva-arvoja alentavia tai muita hormonaalisia lääkkeitä viimeisen kolmen kuukauden aikana, eivät olleet mukana.
- Ne, joilla on ollut mekaaninen kohdun limakalvovaurio, polypektomia, hysteroskooppinen myomektomia, endometriooman resektio, dilataatio/kyretaatio, munasarjojen poraus ja salpingektomia, suljettiin myös pois.
- Osallistujia, joilla oli pahanlaatuinen tai pahanlaatuinen kohdun limakalvon patologia, ne, joilla on ollut munanjohdintekijän hedelmättömyys, synnynnäinen kohdun poikkeavuus tai mitä tahansa kroonista systeemistä sairautta, ei otettu mukaan.
- Azoospermiapotilaat suljettiin pois tutkimuksesta, koska suosimme ejakuloitunutta siittiöitä ICSI:lle kontrolliryhmän potilailla.
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Hoito
- Jako: Ei satunnaistettu
- Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
- Naamiointi: Ei mitään (avoin tarra)
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Active Comparator: PCOS
Hedelmättömät PCOS-potilaat (n=44)
|
Munasolujen talteenoton jälkeen potilaan ollessa anestesiassa, kohdun limakalvon kudosnäytteet otettiin pipelle-kanyylin avulla.
Osa kohdun limakalvon kudoksesta laitettiin RNA:n stabilointipuskuriin (RNAlater) käytettäväksi qPCR:ssä ja säilytettiin -20 °C:ssa analyysiin asti.
Jäljelle jäänyt kohdun limakalvokudos kiinnitettiin ensin 10 % formaliinilla, mitä seurasi parafiinisalpaus ja valmisteltiin immunohistokemiallista analyysiä varten.
|
|
Active Comparator: Ei-PCOS-hallinta
Ei-PCOS-hallinta miesten tekijän hedelmättömyyteen
|
Munasolujen talteenoton jälkeen potilaan ollessa anestesiassa, kohdun limakalvon kudosnäytteet otettiin pipelle-kanyylin avulla.
Osa kohdun limakalvon kudoksesta laitettiin RNA:n stabilointipuskuriin (RNAlater) käytettäväksi qPCR:ssä ja säilytettiin -20 °C:ssa analyysiin asti.
Jäljelle jäänyt kohdun limakalvokudos kiinnitettiin ensin 10 % formaliinilla, mitä seurasi parafiinisalpaus ja valmisteltiin immunohistokemiallista analyysiä varten.
|
|
Active Comparator: Fenotyyppi A
Fenotyyppi A: HA+OD+PCOM (klassinen/täydellinen, n=17)
|
Munasolujen talteenoton jälkeen potilaan ollessa anestesiassa, kohdun limakalvon kudosnäytteet otettiin pipelle-kanyylin avulla.
Osa kohdun limakalvon kudoksesta laitettiin RNA:n stabilointipuskuriin (RNAlater) käytettäväksi qPCR:ssä ja säilytettiin -20 °C:ssa analyysiin asti.
Jäljelle jäänyt kohdun limakalvokudos kiinnitettiin ensin 10 % formaliinilla, mitä seurasi parafiinisalpaus ja valmisteltiin immunohistokemiallista analyysiä varten.
|
|
Active Comparator: Fenotyyppi B
fenotyyppi B: HA+OD (klassinen/ei-PCOM, n=10)
|
Munasolujen talteenoton jälkeen potilaan ollessa anestesiassa, kohdun limakalvon kudosnäytteet otettiin pipelle-kanyylin avulla.
Osa kohdun limakalvon kudoksesta laitettiin RNA:n stabilointipuskuriin (RNAlater) käytettäväksi qPCR:ssä ja säilytettiin -20 °C:ssa analyysiin asti.
Jäljelle jäänyt kohdun limakalvokudos kiinnitettiin ensin 10 % formaliinilla, mitä seurasi parafiinisalpaus ja valmisteltiin immunohistokemiallista analyysiä varten.
|
|
Active Comparator: Fenotyyppi C
fenotyyppi C: HA+PCOM (ovulaatio, n=9)
|
Munasolujen talteenoton jälkeen potilaan ollessa anestesiassa, kohdun limakalvon kudosnäytteet otettiin pipelle-kanyylin avulla.
Osa kohdun limakalvon kudoksesta laitettiin RNA:n stabilointipuskuriin (RNAlater) käytettäväksi qPCR:ssä ja säilytettiin -20 °C:ssa analyysiin asti.
Jäljelle jäänyt kohdun limakalvokudos kiinnitettiin ensin 10 % formaliinilla, mitä seurasi parafiinisalpaus ja valmisteltiin immunohistokemiallista analyysiä varten.
|
|
Active Comparator: Fenotyyppi D
fenotyyppi D: OD+PCOM (ei-hyperandrogeeninen, n=8).
|
Munasolujen talteenoton jälkeen potilaan ollessa anestesiassa, kohdun limakalvon kudosnäytteet otettiin pipelle-kanyylin avulla.
Osa kohdun limakalvon kudoksesta laitettiin RNA:n stabilointipuskuriin (RNAlater) käytettäväksi qPCR:ssä ja säilytettiin -20 °C:ssa analyysiin asti.
Jäljelle jäänyt kohdun limakalvokudos kiinnitettiin ensin 10 % formaliinilla, mitä seurasi parafiinisalpaus ja valmisteltiin immunohistokemiallista analyysiä varten.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Tutkimuksen ensisijaisena tavoitteena oli selvittää, onko PCOS-potilaiden kohdun limakalvon VDR-ilmentymisessä eroa verrattuna qPCR- ja immunohistokemiallisilla menetelmillä tehtyihin kontrolleihin.
Aikaikkuna: ensimmäiset 3 kuukautta
|
VDR-ilmentymiskuvio PCOS-potilaiden endometriumissa, joille tehtiin IVF/ICSI ja alkion täydellinen jäädyttäminen, koska he eivät reagoineet ensimmäisen linjan ovulaatiostimulaatioon, analysoitiin sekä mRNA- että immunohistokemiallisilla tasoilla.
Endometriumin VDR-mRNA:n ilmentymistasot mitattiin qPCR-menetelmällä.
Lisäksi näytteet värjättiin immunohistokemiallisesti VDR:n jakautumisen ja intensiteetin määrittämiseksi kohdun limakalvokudoksessa.
Progesteronireseptorin (PR) jakautumisen ja VDR-jakauman välisen mahdollisen suhteen vertailemiseksi kohdun limakalvonäytteet värjättiin myös immunohistokemiallisesti PR-vasta-aineella.
|
ensimmäiset 3 kuukautta
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Paljastaa insuliiniresistenssin, HA:n, OD:n ja PCOM:n vaikutukset kohdun limakalvon VDR-mRNA:n ilmentymiseen käyttämällä korrelaatioanalyysejä.
Aikaikkuna: Ensimmäiset kolme kuukautta
|
PCOS-ryhmän osallistujat jaettiin neljään ryhmään: fenotyyppi A (HA+OD+PCOM), fenotyyppi B (HA+OD), fenotyyppi C (HA+PCOM) ja fenotyyppi D (OD+PCOM) ja mikä fenotyyppimuuttuja vaikutti VDR:ään. mRNA analysoitiin.
|
Ensimmäiset kolme kuukautta
|
|
Kliiniset raskaudet ja keskenmenot
Aikaikkuna: kolme kuukautta kolmen ensimmäisen kuukauden jälkeen
|
. Kliininen raskaus määriteltiin kohdunsisäisen raskauspussin läsnäoloksi transvaginaalisessa ultraäänitutkimuksessa (kliininen raskausaste (CPR) = kliinisten raskauksien kokonaismäärä / ET-syklien kokonaismäärä × 100 %).
Sikiön menetys ennen 12 raskausviikkoa määriteltiin keskenmenoksi (keskonmenojen määrä = keskenmenojen kokonaismäärä / kliinisten raskauksien kokonaismäärä × 100 %).
|
kolme kuukautta kolmen ensimmäisen kuukauden jälkeen
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Päätutkija: nur DE gungor, assoc. prof., BAU IVF-Center
- Päätutkija: aynur A ersahin, assoc. prof, BAU IVF-Center
- Päätutkija: arzu yurci, assoc. prof., Memorial IVF-Center
- Päätutkija: Ulun ulug, prof, Halic University
- Päätutkija: meltem yardım, specialist, Yerkoy State Hospital
- Päätutkija: nilufer celik, assoc. prof., Dr. Behcet Uz Children's Hospital
- Päätutkija: ahmet tektemur, assoc. prof, Firat University
- Päätutkija: Tuncay Kuloglu, Assoc. prof, Firat University
- Päätutkija: Kagan Gungor, Assoc. prof, Medeniyet University
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Arvioitu)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Arvioitu)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muut tutkimustunnusnumerot
- UsakUn
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .