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Receptor endometrial de vitamina D na SOP

22 de maio de 2023 atualizado por: Uşak University

Componentes fenotípicos da síndrome dos ovários policísticos determinam o padrão de expressão do mRNA do receptor endometrial de vitamina D

O receptor de vitamina D (VDR) é amplamente expresso não apenas nos tecidos responsáveis ​​pela hemostasia do cálcio, mas também nos órgãos reprodutivos, incluindo o endométrio. O VDR, que é baixo na fase proliferativa, começa a aumentar no início da fase secretora e diminui novamente no meio da fase secretora. As enzimas responsáveis ​​pela produção e metabolismo da vitamina d (VD) são expressas localmente no endométrio. A ligação de VD ativo a VDR na membrana nuclear ou plasmática aumenta a receptividade da expressão de genes e imunomoduladores ativando vias genômicas e não genômicas. Defeito de expressão VDR foi relatado nas células deciduais de abortos recorrentes. Não há estudos investigando o padrão de expressão endometrial do VDR na síndrome dos ovários policísticos (SOP) e seus fenótipos. O padrão de expressão de VDR no endométrio de pacientes com SOP submetidas a fertilização in vitro/injeção intracitoplasmática de espermatozoides (FIV/ICSI) e congelamento total de embriões foi analisado tanto no mRNA quanto na imuno-histoquímica. O grupo de estudo consistiu em 44 pacientes com SOP que foram encaminhadas para fertilização in vitro/ICSI porque não responderam ao tratamento de primeira linha com letrozol ou citrato de clomifeno (CC). Vinte pacientes agendados para fertilização in vitro/ICSI devido à infertilidade por fator masculino e que foram pareados com o grupo de estudo em termos de idade e índice de massa corporal (IMC) foram incluídos como grupo controle. Após a coleta de óvulos, o tecido endometrial foi coletado por cânula de pipeta enquanto a paciente estava sob anestesia. Todos os blastocistos de boa qualidade de ambos os grupos foram vitrificados. A expressão do mRNA do transcrito 2 do receptor de vitamina D (VDR-X2) e do transcrito 4 do receptor de vitamina D (VDR-X4) foi determinada por reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR). O método de equação de ciclo quantitativo foi usado para calcular as diferenças entre as expressões de VDR-mRNA. VDR endometrial e imunorreatividade do receptor de progesterona (PR) foram determinados por imuno-histoquímica.

Visão geral do estudo

Status

Concluído

Descrição detalhada

Questão do estudo: Como a expressão do receptor endometrial de vitamina D varia de acordo com os fenótipos em mulheres com síndrome dos ovários policísticos (SOP)?

O que já se sabe: o VDR é amplamente expresso não apenas nos tecidos responsáveis ​​pela hemostasia do cálcio, mas também nos órgãos reprodutivos, incluindo o endométrio. O VDR, que é baixo na fase proliferativa, começa a aumentar no início da fase secretora e diminui novamente no meio da fase secretora. As enzimas responsáveis ​​pela produção e metabolismo de VD são expressas localmente no endométrio. A ligação de VD ativo a VDR na membrana nuclear ou plasmática aumenta a receptividade da expressão de genes e imunomoduladores ativando vias genômicas e não genômicas. Defeito de expressão VDR foi relatado nas células deciduais de casos de abortos recorrentes. Não há estudos investigando o padrão de expressão endometrial do VDR na SOP e seus fenótipos.

Desenho do estudo, tamanho, duração: O grupo de estudo consistiu em 44 pacientes com SOP que foram encaminhadas para fertilização in vitro/ICSI porque não responderam ao tratamento de primeira linha com letrozol ou citrato de clomifeno (CC). Vinte pacientes agendados para fertilização in vitro/ICSI devido ao fator de infertilidade masculino e que foram pareados com o grupo de estudo em termos de idade e IMC foram incluídos como grupo controle. Foram consideradas SOP aquelas que preencheram pelo menos dois dos critérios para hiperandrogenemia (HA), disfunção ovulatória (DO) e morfologia ovariana policística (PCOM) determinados pela European Society of Human Reproduction and Embryology/American Society for Reproductive Medicine. Após a coleta de óvulos, o tecido endometrial foi coletado por cânula de pipeta enquanto a paciente estava sob anestesia. Todos os blastocistos de boa qualidade de ambos os grupos foram vitrificados.

Participantes/materiais, ambiente, métodos: Os 44 participantes do grupo SOP foram divididos em quatro grupos fenotípicos conforme a seguir, de acordo com o painel de consenso do National Institutes of Health (NIH). Fenótipo A: HA+OD+PCOM (clássica/completa, n=17); fenótipo B: HA+OD (clássica/não-PCOM, n=10); fenótipo C: HA+PCOM (ovulatório, n=9); e fenótipo D: OD+PCOM (não hiperandrogênico, n=8). A expressão de mRNA do transcrito 2 do receptor de vitamina D (VDR-X2) e do transcrito 4 do receptor de vitamina D (VDR-X4) foi determinada por qPCR. O método de equação de ciclo quantitativo foi usado para calcular as diferenças entre as expressões de VDR-mRNA. VDR endometrial e imunorreatividade do receptor de progesterona (PR) foram determinados por imuno-histoquímica. A fórmula do escore histológico foi utilizada para a avaliação quantitativa da imunorreatividade de VDR e PR.

Limitações, razões para cautela: A falta de um número igual de participantes para cada fenótipo é nossa primeira limitação. Devido à coleta de amostras endometriais no ciclo de fertilização in vitro/ICSI, o possível efeito de drogas de estimulação ovariana e o aumento associado dos níveis de estrogênio no endométrio não foi excluído. Alterações na expressão de VDR-mRNA endometrial não puderam ser confirmadas por medição de proteína.

Tipo de estudo

Intervencional

Inscrição (Real)

64

Estágio

  • Não aplicável

Contactos e Locais

Esta seção fornece os detalhes de contato para aqueles que conduzem o estudo e informações sobre onde este estudo está sendo realizado.

Locais de estudo

      • Usak, Peru, 64200
        • Usak University Training and Research Hospital

Critérios de participação

Os pesquisadores procuram pessoas que se encaixem em uma determinada descrição, chamada de critérios de elegibilidade. Alguns exemplos desses critérios são a condição geral de saúde de uma pessoa ou tratamentos anteriores.

Critérios de elegibilidade

Idades elegíveis para estudo

  • Adulto

Aceita Voluntários Saudáveis

Não

Descrição

Critério de inclusão:

  • Diagnóstico clínico da SOP
  • Aprovação para fertilização in vitro/ICSI e congelamento total de embriões
  • Consentimento para amostragem endometrial

Critério de exclusão:

  • Mulheres com hiperandrogenismo ou disfunção ovulatória devido a etiologias não SOP.
  • Pacientes em uso de vitamina D, sensibilizadores de insulina, hipolipemiantes ou outros medicamentos hormonais nos últimos três meses não foram incluídos.
  • Aqueles com história de lesão endometrial mecânica, polipectomia, miomectomia histeroscópica, ressecção de endometrioma, dilatação/curetagem, perfuração ovariana e salpingectomia também foram excluídos.
  • Participantes com patologia endometrial pré-maligna ou maligna, aqueles com história de infertilidade por fator tubário, anomalia uterina congênita ou quaisquer doenças sistêmicas crônicas não foram incluídos.
  • Os pacientes com azoospermia foram excluídos do estudo porque preferimos o esperma ejaculado para ICSI em pacientes do grupo controle.

Plano de estudo

Esta seção fornece detalhes do plano de estudo, incluindo como o estudo é projetado e o que o estudo está medindo.

Como o estudo é projetado?

Detalhes do projeto

  • Finalidade Principal: Tratamento
  • Alocação: Não randomizado
  • Modelo Intervencional: Atribuição Paralela
  • Mascaramento: Nenhum (rótulo aberto)

Armas e Intervenções

Grupo de Participantes / Braço
Intervenção / Tratamento
Comparador Ativo: SOP
Pacientes inférteis com SOP (n=44)
Após a coleta do oócito enquanto a paciente estava sob anestesia, a amostragem do tecido endometrial foi realizada com a ajuda de uma cânula de pipeta. Uma porção do tecido endometrial foi colocada em tampão de estabilização de RNA (RNAlater) para ser usado em qPCR e armazenado a -20°C até a análise. O tecido endometrial remanescente foi primeiro fixado com formol a 10%, seguido de bloqueio com parafina e preparado para análise imuno-histoquímica.
Comparador Ativo: Controle não SOP
Controle não SOP com infertilidade por fator masculino
Após a coleta do oócito enquanto a paciente estava sob anestesia, a amostragem do tecido endometrial foi realizada com a ajuda de uma cânula de pipeta. Uma porção do tecido endometrial foi colocada em tampão de estabilização de RNA (RNAlater) para ser usado em qPCR e armazenado a -20°C até a análise. O tecido endometrial remanescente foi primeiro fixado com formol a 10%, seguido de bloqueio com parafina e preparado para análise imuno-histoquímica.
Comparador Ativo: Fenótipo A
Fenótipo A: HA+OD+PCOM (clássico/completo, n=17)
Após a coleta do oócito enquanto a paciente estava sob anestesia, a amostragem do tecido endometrial foi realizada com a ajuda de uma cânula de pipeta. Uma porção do tecido endometrial foi colocada em tampão de estabilização de RNA (RNAlater) para ser usado em qPCR e armazenado a -20°C até a análise. O tecido endometrial remanescente foi primeiro fixado com formol a 10%, seguido de bloqueio com parafina e preparado para análise imuno-histoquímica.
Comparador Ativo: Fenótipo B
fenótipo B: HA+OD (clássico/não-PCOM, n=10)
Após a coleta do oócito enquanto a paciente estava sob anestesia, a amostragem do tecido endometrial foi realizada com a ajuda de uma cânula de pipeta. Uma porção do tecido endometrial foi colocada em tampão de estabilização de RNA (RNAlater) para ser usado em qPCR e armazenado a -20°C até a análise. O tecido endometrial remanescente foi primeiro fixado com formol a 10%, seguido de bloqueio com parafina e preparado para análise imuno-histoquímica.
Comparador Ativo: Fenótipo C
fenótipo C: HA+PCOM (ovulatório, n=9)
Após a coleta do oócito enquanto a paciente estava sob anestesia, a amostragem do tecido endometrial foi realizada com a ajuda de uma cânula de pipeta. Uma porção do tecido endometrial foi colocada em tampão de estabilização de RNA (RNAlater) para ser usado em qPCR e armazenado a -20°C até a análise. O tecido endometrial remanescente foi primeiro fixado com formol a 10%, seguido de bloqueio com parafina e preparado para análise imuno-histoquímica.
Comparador Ativo: Fenótipo D
fenótipo D: OD+PCOM (não hiperandrogênico, n=8).
Após a coleta do oócito enquanto a paciente estava sob anestesia, a amostragem do tecido endometrial foi realizada com a ajuda de uma cânula de pipeta. Uma porção do tecido endometrial foi colocada em tampão de estabilização de RNA (RNAlater) para ser usado em qPCR e armazenado a -20°C até a análise. O tecido endometrial remanescente foi primeiro fixado com formol a 10%, seguido de bloqueio com parafina e preparado para análise imuno-histoquímica.

O que o estudo está medindo?

Medidas de resultados primários

Medida de resultado
Descrição da medida
Prazo
O objetivo principal do estudo foi investigar se há diferença na expressão de VDR no endométrio de pacientes com SOP em comparação com controles por qPCR e métodos imuno-histoquímicos
Prazo: primeiros 3 meses
O padrão de expressão de VDR no endométrio de pacientes com SOP submetidas a fertilização in vitro/ICSI e congelamento total de embriões porque não responderam à estimulação de ovulação de primeira linha foi analisado em níveis de mRNA e imunohistoquímico. Os níveis de expressão endometrial de VDR mRNA foram medidos pelo método qPCR. Além disso, as amostras foram coradas imuno-histoquimicamente para determinar a distribuição e intensidade de VDR no tecido endometrial. A fim de comparar a possível relação entre a distribuição do receptor de progesterona (PR) e a distribuição do VDR, amostras endometriais também foram coradas imuno-histoquimicamente com anticorpo PR.
primeiros 3 meses

Medidas de resultados secundários

Medida de resultado
Descrição da medida
Prazo
Revelar os efeitos da resistência à insulina, HA, OD e PCOM na expressão de mRNA VDR endometrial usando análises de correlação.
Prazo: Primeiros três meses
As participantes do grupo SOP foram divididas em quatro grupos como fenótipo A (HA+OD+PCOM), fenótipo B (HA+OD), fenótipo C (HA+PCOM) e fenótipo D (OD+PCOM) e qual variável fenotípica afetou VDR mRNA foi analisado.
Primeiros três meses
Gravidez clínica e taxas de aborto espontâneo
Prazo: três meses após os primeiros três meses
. Gravidez clínica foi definida como a presença de saco gestacional intrauterino no exame ultrassonográfico transvaginal (Taxa de gravidez clínica (RCP) = número total de gestações clínicas/número total de ciclos de TE × 100%). A perda fetal antes de 12 semanas de gestação foi definida como aborto espontâneo (taxa de aborto espontâneo = número total de abortos espontâneos/número total de gestações clínicas × 100%).
três meses após os primeiros três meses

Colaboradores e Investigadores

É aqui que você encontrará pessoas e organizações envolvidas com este estudo.

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Investigadores

  • Investigador principal: nur DE gungor, assoc. prof., BAU IVF-Center
  • Investigador principal: aynur A ersahin, assoc. prof, BAU IVF-Center
  • Investigador principal: arzu yurci, assoc. prof., Memorial IVF-Center
  • Investigador principal: Ulun ulug, prof, Halic University
  • Investigador principal: meltem yardım, specialist, Yerkoy State Hospital
  • Investigador principal: nilufer celik, assoc. prof., Dr. Behcet Uz Children's Hospital
  • Investigador principal: ahmet tektemur, assoc. prof, Firat University
  • Investigador principal: Tuncay Kuloglu, Assoc. prof, Firat University
  • Investigador principal: Kagan Gungor, Assoc. prof, Medeniyet University

Publicações e links úteis

A pessoa responsável por inserir informações sobre o estudo fornece voluntariamente essas publicações. Estes podem ser sobre qualquer coisa relacionada ao estudo.

Datas de registro do estudo

Essas datas acompanham o progresso do registro do estudo e os envios de resumo dos resultados para ClinicalTrials.gov. Os registros do estudo e os resultados relatados são revisados ​​pela National Library of Medicine (NLM) para garantir que atendam aos padrões específicos de controle de qualidade antes de serem publicados no site público.

Datas Principais do Estudo

Início do estudo (Real)

21 de outubro de 2022

Conclusão Primária (Real)

25 de janeiro de 2023

Conclusão do estudo (Real)

29 de abril de 2023

Datas de inscrição no estudo

Enviado pela primeira vez

10 de maio de 2023

Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ

22 de maio de 2023

Primeira postagem (Estimado)

2 de junho de 2023

Atualizações de registro de estudo

Última Atualização Postada (Estimado)

2 de junho de 2023

Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade

22 de maio de 2023

Última verificação

1 de maio de 2023

Mais Informações

Termos relacionados a este estudo

Outros números de identificação do estudo

  • UsakUn

Plano para dados de participantes individuais (IPD)

Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?

INDECISO

Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo

Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA

Não

Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA

Não

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