Endometrialny receptor witaminy D w PCOS
Fenotypowe składniki zespołu policystycznych jajników determinują wzorzec ekspresji mRNA receptora witaminy D w endometrium
Przegląd badań
Status
Warunki
Interwencja / Leczenie
Szczegółowy opis
Pytanie badawcze: Jak ekspresja endometrialnego receptora witaminy D różni się w zależności od fenotypu u kobiet z zespołem policystycznych jajników (PCOS)?
Co już wiadomo: VDR jest szeroko eksprymowany nie tylko w tkankach odpowiedzialnych za hemostazę wapniową, ale także w narządach rozrodczych, w tym w endometrium. VDR, który jest niski w fazie proliferacyjnej, zaczyna wzrastać we wczesnej fazie sekrecyjnej i ponownie spada w fazie środkowej sekrecji. Enzymy odpowiedzialne za produkcję i metabolizm VD ulegają lokalnej ekspresji w endometrium. Wiązanie aktywnego VD z VDR w błonie jądrowej lub plazmatycznej zwiększa ekspresję genów receptywności i immunomodulatory poprzez aktywację szlaków genomowych i niegenomowych. Defekt ekspresji VDR odnotowano w komórkach doczesnych przypadków nawracających poronień. Nie ma badań dotyczących wzorca ekspresji VDR endometrium w PCOS i jego fenotypach.
Projekt badania, wielkość, czas trwania: Grupa badana składała się z 44 pacjentek z PCOS, które zostały skierowane do IVF/ICSI z powodu braku odpowiedzi na leczenie pierwszego rzutu letrozolem lub cytrynianem klomifenu (CC). Grupę kontrolną stanowiło 20 pacjentek, które zostały zakwalifikowane do IVF/ICSI z powodu niepłodności męskiej i dopasowane do grupy badanej pod względem wieku i BMI. Kobiety, które spełniły co najmniej dwa kryteria hiperandrogenemii (HA), zaburzeń owulacji (OD) i morfologii policystycznych jajników (PCOM) określone przez Europejskie Towarzystwo Rozrodu Człowieka i Embriologii / Amerykańskie Towarzystwo Medycyny Rozrodu, zostały uznane za PCOS. Po pobraniu komórek jajowych, podczas znieczulenia pacjentki, pobierano tkankę endometrium za pomocą kaniuli pipellowej. Wszystkie dobrej jakości blastocysty z obu grup poddano zeszkleniu.
Uczestnicy/materiały, otoczenie, metody: 44 uczestniczek w grupie PCOS podzielono na cztery grupy fenotypowe zgodnie z panelem konsensusu National Institutes of Health (NIH). Fenotyp A: HA+OD+PCOM (klasyczny/kompletny, n=17); fenotyp B: HA+OD (klasyczny/nie-PCOM, n=10); fenotyp C: HA+PCOM (owulacja, n=9); i fenotyp D: OD+PCOM (niehiperandrogenny, n=8). Ekspresję mRNA transkryptu 2 receptora witaminy D (VDR-X2) i transkryptu 4 receptora witaminy D (VDR-X4) określono metodą qPCR. Metodę równania cyklu ilościowego zastosowano do obliczenia różnic między ekspresjami VDR-mRNA. Immunoreaktywność endometrium VDR i receptora progesteronu (PR) określono metodą immunohistochemiczną. Do ilościowej oceny immunoreaktywności VDR i PR wykorzystano wzór wyniku histologicznego.
Ograniczenia, powody do ostrożności: Brak równej liczby uczestników dla każdego fenotypu jest naszym pierwszym ograniczeniem. Ze względu na pobieranie próbek endometrium w cyklu IVF/ICSI nie wykluczono możliwego wpływu leków stymulujących czynność jajników i związanego z tym zwiększonego stężenia estrogenów na endometrium. Zmiany w endometrialnej ekspresji VDR-mRNA nie mogły zostać potwierdzone przez pomiar białka.
Typ studiów
Zapisy (Rzeczywisty)
Faza
- Nie dotyczy
Kontakty i lokalizacje
Lokalizacje studiów
-
-
-
Usak, Indyk, 64200
- Usak University Training and Research Hospital
-
-
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
- Dorosły
Akceptuje zdrowych ochotników
Opis
Kryteria przyjęcia:
- Rozpoznanie kliniczne PCOS
- Zatwierdzenie do IVF/ICSI i całkowitego zamrożenia zarodków
- Zgoda na pobranie próbki endometrium
Kryteria wyłączenia:
- Kobiety z hiperandrogenizmem lub zaburzeniami owulacji z powodu etiologii innej niż PCOS.
- Nie uwzględniono pacjentów przyjmujących w ciągu ostatnich trzech miesięcy witaminę D, leki uwrażliwiające na insulinę, leki hipolipemizujące lub inne leki hormonalne.
- Wykluczono również osoby z historią mechanicznego uszkodzenia endometrium, polipektomii, histeroskopowej miomektomii, resekcji endometriozy, poszerzenia/łyżeczkowania, borowania jajników i salpingektomii.
- Nie uwzględniono uczestników z przednowotworową lub złośliwą patologią endometrium, osób z historią niepłodności z powodu czynnika jajowodowego, wrodzoną anomalią macicy lub innymi przewlekłymi chorobami ogólnoustrojowymi.
- Pacjenci z azoospermią zostali wykluczeni z badania, ponieważ preferowaliśmy nasienie wytrysku do ICSI u pacjentów z grupy kontrolnej.
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
- Główny cel: Leczenie
- Przydział: Nielosowe
- Model interwencyjny: Przydział równoległy
- Maskowanie: Brak (otwarta etykieta)
Broń i interwencje
Grupa uczestników / Arm |
Interwencja / Leczenie |
|---|---|
|
Aktywny komparator: PCOS
Niepłodne pacjentki z PCOS (n=44)
|
Po pobraniu oocytów w znieczuleniu pacjentki pobrano próbkę tkanki endometrium za pomocą kaniuli pipelle.
Część tkanki endometrium umieszczono w buforze stabilizującym RNA (RNAlater) do użycia w qPCR i przechowywano w temperaturze -20°C do czasu analizy.
Pozostałą tkankę endometrium najpierw utrwalono 10% formaliną, a następnie blokowano parafiną i przygotowano do analizy immunohistochemicznej.
|
|
Aktywny komparator: Kontrola bez PCOS
Kontrola bez PCOS z niepłodnością typu męskiego
|
Po pobraniu oocytów w znieczuleniu pacjentki pobrano próbkę tkanki endometrium za pomocą kaniuli pipelle.
Część tkanki endometrium umieszczono w buforze stabilizującym RNA (RNAlater) do użycia w qPCR i przechowywano w temperaturze -20°C do czasu analizy.
Pozostałą tkankę endometrium najpierw utrwalono 10% formaliną, a następnie blokowano parafiną i przygotowano do analizy immunohistochemicznej.
|
|
Aktywny komparator: Fenotyp A
Fenotyp A: HA+OD+PCOM (klasyczny/kompletny, n=17)
|
Po pobraniu oocytów w znieczuleniu pacjentki pobrano próbkę tkanki endometrium za pomocą kaniuli pipelle.
Część tkanki endometrium umieszczono w buforze stabilizującym RNA (RNAlater) do użycia w qPCR i przechowywano w temperaturze -20°C do czasu analizy.
Pozostałą tkankę endometrium najpierw utrwalono 10% formaliną, a następnie blokowano parafiną i przygotowano do analizy immunohistochemicznej.
|
|
Aktywny komparator: Fenotyp B
fenotyp B: HA+OD (klasyczny/nie-PCOM, n=10)
|
Po pobraniu oocytów w znieczuleniu pacjentki pobrano próbkę tkanki endometrium za pomocą kaniuli pipelle.
Część tkanki endometrium umieszczono w buforze stabilizującym RNA (RNAlater) do użycia w qPCR i przechowywano w temperaturze -20°C do czasu analizy.
Pozostałą tkankę endometrium najpierw utrwalono 10% formaliną, a następnie blokowano parafiną i przygotowano do analizy immunohistochemicznej.
|
|
Aktywny komparator: Fenotyp C
fenotyp C: HA+PCOM (owulacja, n=9)
|
Po pobraniu oocytów w znieczuleniu pacjentki pobrano próbkę tkanki endometrium za pomocą kaniuli pipelle.
Część tkanki endometrium umieszczono w buforze stabilizującym RNA (RNAlater) do użycia w qPCR i przechowywano w temperaturze -20°C do czasu analizy.
Pozostałą tkankę endometrium najpierw utrwalono 10% formaliną, a następnie blokowano parafiną i przygotowano do analizy immunohistochemicznej.
|
|
Aktywny komparator: Fenotyp D
fenotyp D: OD+PCOM (niehiperandrogenny, n=8).
|
Po pobraniu oocytów w znieczuleniu pacjentki pobrano próbkę tkanki endometrium za pomocą kaniuli pipelle.
Część tkanki endometrium umieszczono w buforze stabilizującym RNA (RNAlater) do użycia w qPCR i przechowywano w temperaturze -20°C do czasu analizy.
Pozostałą tkankę endometrium najpierw utrwalono 10% formaliną, a następnie blokowano parafiną i przygotowano do analizy immunohistochemicznej.
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Głównym celem pracy było zbadanie, czy istnieje różnica w ekspresji VDR w endometrium pacjentek z PCOS w porównaniu z grupą kontrolną metodą qPCR i immunohistochemiczną
Ramy czasowe: pierwsze 3 miesiące
|
Wzorzec ekspresji VDR w endometrium pacjentek z PCOS, które przeszły IVF/ICSI i całkowite zamrożenie zarodka z powodu braku odpowiedzi na stymulację owulacji pierwszego rzutu, analizowano zarówno na poziomie mRNA, jak i immunohistochemicznym.
Poziomy ekspresji mRNA VDR endometrium mierzono metodą qPCR.
Ponadto próbki barwiono immunohistochemicznie w celu określenia rozmieszczenia i intensywności VDR w tkance endometrium.
W celu porównania możliwej zależności między dystrybucją receptora progesteronu (PR) a dystrybucją VDR, próbki endometrium barwiono również immunohistochemicznie przeciwciałem PR.
|
pierwsze 3 miesiące
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Aby ujawnić wpływ oporności na insulinę, HA, OD i PCOM na ekspresję mRNA VDR endometrium za pomocą analiz korelacji.
Ramy czasowe: Pierwsze trzy miesiące
|
Uczestników grupy PCOS podzielono na cztery grupy według fenotypu A (HA+OD+PCOM), fenotypu B (HA+OD), fenotypu C (HA+PCOM) i fenotypu D (OD+PCOM) oraz która zmienna fenotypowa wpłynęła na VDR analizowano mRNA.
|
Pierwsze trzy miesiące
|
|
Kliniczne wskaźniki ciąż i poronień
Ramy czasowe: trzech miesięcy następujących po pierwszych trzech miesiącach
|
. Ciążę kliniczną zdefiniowano jako obecność wewnątrzmacicznego pęcherzyka ciążowego w badaniu ultrasonograficznym przezpochwowym (wskaźnik ciąż klinicznych (CPR) = całkowita liczba ciąż klinicznych/całkowita liczba cykli ET × 100%).
Utratę płodu przed 12. tygodniem ciąży zdefiniowano jako poronienie (wskaźnik poronień = całkowita liczba poronień/całkowita liczba ciąż klinicznych × 100%).
|
trzech miesięcy następujących po pierwszych trzech miesiącach
|
Współpracownicy i badacze
Sponsor
Śledczy
- Główny śledczy: nur DE gungor, assoc. prof., BAU IVF-Center
- Główny śledczy: aynur A ersahin, assoc. prof, BAU IVF-Center
- Główny śledczy: arzu yurci, assoc. prof., Memorial IVF-Center
- Główny śledczy: Ulun ulug, prof, Halic University
- Główny śledczy: meltem yardım, specialist, Yerkoy State Hospital
- Główny śledczy: nilufer celik, assoc. prof., Dr. Behcet Uz Children's Hospital
- Główny śledczy: ahmet tektemur, assoc. prof, Firat University
- Główny śledczy: Tuncay Kuloglu, Assoc. prof, Firat University
- Główny śledczy: Kagan Gungor, Assoc. prof, Medeniyet University
Publikacje i pomocne linki
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów (Rzeczywisty)
Zakończenie podstawowe (Rzeczywisty)
Ukończenie studiów (Rzeczywisty)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (Szacowany)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Szacowany)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Słowa kluczowe
Inne numery identyfikacyjne badania
- UsakUn
Plan dla danych uczestnika indywidualnego (IPD)
Planujesz udostępniać dane poszczególnych uczestników (IPD)?
Informacje o lekach i urządzeniach, dokumenty badawcze
Bada produkt leczniczy regulowany przez amerykańską FDA
Bada produkt urządzenia regulowany przez amerykańską FDA
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .