DNA-metylaatiotestauksen kliininen hyödyllisyys potilaan kerätyissä virtsassa ja emättimen näytteissä endometriumisyövän havaitsemiseksi: tapauskontrollitutkimus

TAUSTA:

Endometriumsyövän (EC) esiintyvyys on kasvava ja se on naisten neljäs yleisin syöpätyyppi ympäri maailmaa noin 417 000 uutta tapausta ja 90 000 kuolemaa vuodessa. Lisäksi EC on yleisin gynekologinen syöpä kehittyneissä maissa, mukaan lukien Tanska, jossa on noin 800 uutta tapausta ja 90 kuolemaa vuosittain. Varhainen diagnoosi on välttämätöntä, koska naisten ennuste, jolla on pitkälle edennyt EY -vaihe, on huono. EC: lle ei ole seulontaa, ja yleisimmin havaittu kliininen oire on postmenopausaalinen verenvuoto (PMB), mikä on yleinen tila, joka vaikuttaa noin 11% postmenopausaalisista naisista. Koska 90% EC-tapauksista edeltää PMB, erikoistuneen gynekologisen hoidon lähettäminen syöpäpotilasreittien kautta on osoitettu kaikille tanskalaisille naisille, joilla on PMB, aiheuttaen ahdistusta naisten keskuudessa ja korkeat terveydenhuollon kustannukset. Vain 5-10 prosentilla PMB: n naisista on kuitenkin EC.

Maailmanlaajuisesti, transvaginaalista ultraääni (TVUS) endometriumin arviointia (raja: paksuus ≥4 mm ja/tai kohdun onkalon epäsäännöllistä vuorausta) käytetään tunnistamaan naisia, joilla on suurin syöpäriski ja vaativat siksi endometriumin biopsian hysteroskopialla tai ilman hysteroskopiaa. Vaikka TVUS -arviointi on erittäin herkkä (94,8%), se kärsii alhaisesta spesifisyydestä (51%), joka aiheuttaa suuren määrän tarpeetonta invasiivista toimenpidettä terveillä naisilla. Lisäksi diagnostinen ohjelma riippuu ammattitaitoisista asiantuntijoista ultraäänien arviointiin, endometriuminäytteisiin sekä histopatologiseen tutkimukseen. Tämä vahvistaa kliinistä kiireellistä ja tyydyttämätöntä tarvetta yksinkertaisemmalle, ei-invasiiviselle, käyttäjän toimittamalle ja tarkemmalle testille EC-diagnoosin helpottamiseksi.

Tämän tutkimuksen tavoitteena on selvittää, onko DNA-metylaatiotestaus potilaan kerätyissä virtsassa ja emättimen näytteissä kliinisesti turvallinen ei-invasiivinen vaihtoehto EC-riskin määrittämiseksi. Syöpäspesifisten geenien kohonneiden DNA-hypermetylaatiotasojen testaaminen on osoitettu tarjoavan lupaavan biomarkkerin varhaisen vaiheen syöpien havaitsemiseksi, mukaan lukien kohdunkaulan ja endometriumin syöpä. DNA -hypermetylaatio on liitetty tuumorin suppressorigeenien hiljentymiseen, mikä myötävaikuttaa syövän kehitykseen. Biologisesti kyky käyttää emättimen ja virtsan materiaalia EC: n havaitsemiseen DNA-metylaatiotesteillä selitetään EC-johdettujen DNA: n ja solufragmenttien paikallisella irtoamalla emättimen roskia ja virtsaa sekä tuskin kuoritun kiertävän DNA: n transrenal-erittymistä virtsaan.

Pääasiassa pienet konseptit ja tapauskontrollien tutkimukset ovat osoittaneet toteutettavuuden EC: n havaitsemiseksi käyttämällä DNA-metylaatiotestausta plasmassa, itse kerätyissä emättimen näytteissä ja kliinikoiden kerääneet kohdunkaulan naarmut. Kuitenkin ensimmäinen paperi, joka raportoi DNA-metylaatioanalyysin diagnostista arvoa emättimen näytteissä ja virtsan nestemäisenä biopsiana EC: lle, julkaisi kuitenkin viime vuonna viime vuonna Co-Supervisor Prof. Steenbergen. Tässä tapauskontrollitiedot paljastivat EC-spesifisten DNA-metylaatiomarkkereiden erinomaisen diagnostisen suorituskyvyn potilaan kerätyissä virtsassa ja emättimen näytteissä, joiden herkkyys oli 89-90% ja spesifisyydet 90-92% EC: n havaitsemiseksi käyttämällä markkereita paneeleja, mukaan lukien: CDH13, GHSR, SST, CDO1 ja ZIC1.

Materiaalit ja menetelmät Emättimen ja virtsanäytteet säilytetään biopankissa patologian osastolla, Randersin alueellisessa sairaalassa (RHR), kunnes DNA-metylaatiotestausanalyysi lähetetään kvantitatiivisessa metylaatiospesifisessä PCR: ssä (QMSP) prof. Steenbergensin laboratoriossa Amsterdamin yliopiston lääketieteellisessä keskuksessa, Alankomaissa. Kaikki näytteet testataan metylaatiomarkkereiden suhteen, kolme emättimen näytteille (CDO1, GHSR, ZIC1) ja kolme virtsaa varten (GHSR, CDH13, SST). Endometriumin biopsioiden ja hysterektomioiden tulokset, mukaan lukien molekyyliset biomarkkerit ja histologinen tyyppi, haetaan Pancenwide Tanskan patologiatietokankista ja potilaaseen linkitettyjen elektronisen potilaslehden Tanskan siviilirekisteröintijärjestelmän kautta, johon kaikilla asukkailla on yksilöivä 10-lippulainen koodi (CPR-numero), johon kaikki terveystiedot ovat yhteydessä.

Tavoite:

1) DNA-metylaatiotestauksen diagnostisen tarkkuuden määrittämiseksi potilaan kerätyissä täyden voidien virtsan ja emättimen näytteissä EC: n havaitsemiseksi syöpätapauksissa ja terveissä kontrolleissa

Tutkimussuunnitelma ja toteutettavuus Tutkimus tehdään syövän seulonnan yliopiston tutkimusklinikan, kansanterveysohjelmien, patologian, RHR: n ja Keski -Tanskan (Randers ja Aarhus) ja Etelä -Tanskan alueen (OLENSE) gynekologisten osastojen välissä. Huipputekniset laboratoriolaitokset ovat paikallaan prof. Steenbergenin Amsterdamin UMC: n laboratoriossa, mikä tukee tutkimusten toteutettavuutta.

Perspektiivit ja viestintä, jos se on onnistunut, tutkimuksella on kansainvälisiä vaikutuksia ja se johtaa uuteen diagnostiikkatyökaluun, joka erottaa PMB: n naiset, jotka tekevät tai eivät tarvitse asiantuntijan lähettämistä syöpäpotilaiden reittien kautta invasiivisten endometriumin biopsioiden avulla. Tämä helpottaa ajoissa diagnoosia, vähentää potilaiden ahdistusta ja vähentää paineen terveydenhuoltojärjestelmään. Tulokset julkaistaan ​​kansainvälisissä vertaisarvioiduissa lehdissä ja esitetään konferensseissa, ja ne tehdään väitöskirja. Tulokset jaetaan asiaankuuluville kliinisille foorumeille ja toteutetaan sekä kansallisissa että kansainvälisissä ohjeissa.