A utilidade clínica do teste de metilação do DNA em urina coletada pelo paciente e amostras vaginais para detectar câncer endometrial: um estudo de caso-controle

FUNDO:

A incidência de câncer endometrial (CE) está aumentando e é o quarto tipo de câncer mais comum em mulheres em todo o mundo, com cerca de 417.000 novos casos e 90.000 mortes anualmente. Além disso, a CE é o câncer ginecológico mais comum em países desenvolvidos, incluindo a Dinamarca, com cerca de 800 novos casos e 90 mortes anualmente. O diagnóstico precoce é essencial, pois o prognóstico para mulheres com um estágio avançado da CE é ruim. Não existe triagem para a CE e o sintoma clínico mais comumente observado é o sangramento na pós-menopausa (PMB), que é uma condição comum que afeta cerca de 11% das mulheres na pós-menopausa. Como 90% dos casos de CE são precedidos pelo PMB, a indicação para cuidados ginecológicos especializados por meio de vias de pacientes com câncer é indicada para todas as mulheres dinamarquesas com PMB, causando ansiedade entre mulheres e altos custos de assistência médica. No entanto, apenas 5 a 10% das mulheres que apresentam PMB têm CE.

A avaliação mundial de ultrassom transvaginal (TVUS) do endométrio (corte: espessura ≥4 mm e/ou revestimento irregular da cavidade uterina) é usado para identificar mulheres com PMB que têm o maior risco de câncer e, portanto, requerem uma biópsia endometrial com ou sem histeroscopia. Embora a avaliação da TVUS seja altamente sensível (94,8%), sofre de baixa especificidade (51%), causando um grande número de procedimentos invasivos desnecessários em mulheres saudáveis. Além disso, o programa de diagnóstico depende de especialistas qualificados para avaliação de ultrassom, amostragem endometrial e exame histopatológico. Isso reforça a necessidade urgente e não atendida clínica de um teste mais simples, não invasivo, fornecido pelo usuário e mais específico para ajudar no diagnóstico da CE.

Este estudo tem como objetivo determinar se o teste de metilação do DNA em amostras de urina e vaginal coletadas pelo paciente é uma alternativa não invasiva clinicamente segura para determinar o risco de CE. Foi demonstrado que os níveis elevados de hipermetilação de DNA de genes específicos do câncer fornecem um biomarcador promissor para a detecção de câncer de estágio inicial, incluindo câncer cervical e endometrial. A hipermetilação do DNA tem sido associada ao silenciamento de genes supressores de tumores, contribuindo assim para o desenvolvimento do câncer. Biologicamente, a capacidade de usar material vaginal e de urina para detecção de CE por teste de metilação do DNA é explicada pelo derramamento local de DNA derivado da CE e fragmentos de células nos detritos vaginais e na urina, bem como excreção transrenal do DNA circulante de tumor na urina.

Principalmente pequenos estudos de prova de conceito e controlos de caso mostraram viabilidade para detectar a CE usando testes de metilação do DNA no plasma, amostras vaginais auto-coletadas e arranhões cervicais coletados ao clínico. No entanto, o primeiro artigo que relata o valor diagnóstico da análise de metilação do DNA em amostras vaginais e urina como biópsia líquida para CE foi publicada pelo co-supervisor Prof. Steenbergen no ano passado. Aqui, os dados de controle de casos revelaram excelente desempenho diagnóstico de marcadores de metilação de DNA específicos de CE em amostras de urina coletada por pacientes e vaginais com sensibilidades de 89-90% e especificidades de 90-92% para detecção de CE usando painéis de marcadores, incluindo: CDH13, GHSR, SST, SST, CDO e ZIC1.

MATERIAIS E MÉTODOS As amostras vaginais e de urina serão armazenadas em um biobank no Departamento de Patologia, Hospital Regional Randers (RHR) até o envio para análise de teste de metilação de DNA usando PCR quantitativo específico para metilação (QMSP) em Laboratory do Prof. Steenbergens no Laboratório Amsterdames, o Netraland. Todas as amostras serão testadas para marcadores de metilação, três para amostras vaginais (CDO1, GHSR, ZIC1) e três para urina (GHSR, CDH13, SST). Resultados em biópsias endometriais e histerectomias, incluindo biomarcadores moleculares e tipo histológico, serão recuperados do banco de dados de patologia dinamarquês em todo o país e do diário de pacientes eletrônicos vinculados ao paciente através do sistema de registro civil na minhoca, onde todos os residentes têm um código de 10 cifras exclusivo (CPR-Number), a que todos os dados de saúde estão vinculados.

MIRAR:

1) Para determinar a precisão diagnóstica dos testes de metilação do DNA em urina cheia coletada pelo paciente e amostras vaginais para detectar CE entre casos de câncer e controles saudáveis

Plano de pesquisa e viabilidade O estudo será realizado em colaboração entre a clínica de pesquisa universitária para triagem de câncer, Departamento de Programas de Saúde Pública, Departamento de Patologia, RHR e departamentos ginecológicos na Dinamarca Central (Randers e Aarhus) e na região do sul da Dinamarca (Odense), trabalhando como sites de inclusão. As instalações de laboratório de ponta estão em vigor no laboratório do Prof. Steenbergen em Amsterdã UMC, apoiando a viabilidade dos estudos.

Perspectivas e comunicação Se for bem -sucedido, a pesquisa terá impacto internacional e resultará em uma nova ferramenta de diagnóstico que diferenciará as mulheres com o PMB que precisam ou não precisar de encaminhamento especializado por meio de vias de pacientes com câncer para ter biópsias endometriais invasivas. Isso facilitará o diagnóstico oportuno, reduzirá a ansiedade entre os pacientes e reduzindo a pressão no sistema de saúde. Os resultados serão publicados em periódicos internacionais revisados ​​por pares e apresentados em conferências e serão concluídos com uma dissertação de doutorado. Os resultados serão distribuídos a fóruns clínicos relevantes e implementados nas diretrizes nacionais e internacionais.