Den kliniske bruken av DNA-metyleringstesting i pasientinnsamlet urin og vaginale prøver for å oppdage endometrial kreft: en casekontrollstudie

BAKGRUNN:

Endometrial kreft (EC) forekomst øker og er den fjerde vanligste krefttypen i kvinner over hele verden med rundt 417 000 nye tilfeller og 90 000 dødsfall årlig. Dessuten er EC den vanligste gynekologiske kreften i utviklede land inkludert Danmark med rundt 800 nye tilfeller og 90 dødsfall årlig. Tidlig diagnose er viktig siden prognosen for kvinner med et avansert EC -stadium er dårlig. Det finnes ingen screening for EC, og det mest observerte kliniske symptomet er blødning etter menopausal (PMB), som er en vanlig tilstand som påvirker omtrent 11% av kvinnene etter menopausale. Fordi 90% av EF-tilfellene er gitt av PMB, er henvisning for spesialisert gynekologisk pleie gjennom kreftpasientveier indikert for alle danske kvinner med PMB, noe som forårsaker angst blant kvinner og høye helseomsorgskostnader. Imidlertid har bare 5-10% av kvinnene som presenterer PMB.

Verdensomspennende, transvaginal ultralyd (TVUS) evaluering av endometrium (avskjæring: tykkelse ≥4mm og/eller uregelmessig foring av livmorhulen) brukes til å identifisere kvinner med PMB som har den høyeste kreftrisiko og krever derfor en endometrial biopsi med eller uten hysteroskopi. Mens TVUS -evaluering er svært følsom (94,8%) lider den av lav spesifisitet (51%) som forårsaker høyt antall unødvendige invasive prosedyrer hos friske kvinner. Dessuten avhenger diagnostikkprogrammet av dyktige spesialister for ultralydevaluering, endometrial prøvetaking samt histopatologisk undersøkelse. Dette forsterker det kliniske presserende og uoppfylte behovet for en enklere, ikke-invasiv, bruker-levert og mer spesifikk test for å hjelpe EC-diagnose.

Denne studien tar sikte på å avgjøre om DNA-metyleringstesting i pasientinnsamlede urin- og vaginale prøver er et klinisk trygt ikke-invasivt alternativ for å bestemme EC-risiko. Testing for forhøyede DNA-hypermetyleringsnivåer av kreftspesifikke gener har blitt vist å gi en lovende biomarkør for påvisning av kreft i tidlig stadium, inkludert livmorhals- og endometrial kreft. DNA -hypermetylering har blitt koblet til lyddemping av tumorundertrykkende gener, og bidrar dermed til kreftutvikling. Biologisk blir evnen til å bruke vaginal og urinmateriale for EC-deteksjon ved DNA-metyleringstesting forklart ved lokal kassering av EC-avledede DNA- og cellefragmenter i vaginal rusk og urin, samt transrenal utskillelse av tumour-skåret sirkulerende DNA til urinen.

Hovedsakelig små bevis-av-konsept og casekontrollstudier har vist muligheten til å oppdage EC ved bruk av DNA-metyleringstesting i plasma, selvinnsamlede vaginale prøver og klinikerinnsamlede livmorhalsskrap. Imidlertid ble den første papirrapportering om diagnostisk verdi av DNA-metyleringsanalyse i vaginale prøver og urin som en flytende biopsi for EC nettopp publisert av co-supervisor prof. Steenbergen i fjor. Her avslørte casekontrolldata utmerket diagnostisk ytelse av EC-spesifikke DNA-metyleringsmarkører i pasientinnsamlede urin- og vaginale prøver med følsomhet på 89-90% og spesifisiteter på 90-92% for EC-deteksjon ved bruk av markørpaneler inkludert: CDH13, GHSR, SST, CDO1 og Zic1.

MATERIALER OG METODER Vaginal- og urinprøvene vil bli lagret i en biobank ved avd. Patologi, Randers Regional Hospital (RHR) inntil forsendelse for DNA-metyleringstestinganalyse ved bruk av kvantitativ metyleringsspesifikk PCR (QMSP) i Prof. Steenbergens 'laboratorium ved Amsterdam University Medical Medical, Netherlands. Alle prøver vil bli testet for metyleringsmarkører, tre for vaginale prøver (CDO1, GHSR, ZIC1) og tre for urin (GHSR, CDH13, SST). Resultater om endometriale biopsier og hysterektomier, inkludert molekylære biomarkører og histologisk type, vil bli hentet fra den landsomfattende danske patologidatabanken og den elektroniske pasientjournalen knyttet til pasienten gjennom det sivile registreringssystemet i Danmark, hvor alle innbyggere har en unik 10-knepelkode (CPR-nære), som alle helsedata er knyttet til 10-knepne.

MÅL:

1) For å bestemme den diagnostiske nøyaktigheten av DNA-metyleringstesting i pasientinnsamlede urin og vaginale prøver for full vagin for å oppdage EC blant krefttilfeller og sunne kontroller

Forskningsplan og gjennomførbarhet Studien vil bli utført i samarbeid mellom universitetsforskningsklinikk for kreftscreening, avd. For folkehelseprogrammer, avd. For patologi, RHR og med gynekologiske avdelinger i Central Danmark (Randers og Aarhus) og Sør -Danmark -regionen (Odense) som jobber som inkluderingssteder. Avanserte laboratoriefasiliteter er på plass ved Prof. Steenbergens laboratorium ved Amsterdam UMC, og støtter gjennomførbarheten av studiene.

Perspektiver og kommunikasjon Hvis vellykket, vil forskningen ha internasjonal innvirkning og resultere i et nytt diagnostisk verktøy som vil skille mellom kvinner med PMB som gjør eller ikke trenger spesialisthenvisning gjennom kreftpasienters veier for å ha invasive endometriale biopsier. Dette vil lette rettidig diagnose, senke angsten blant pasienter og redusere presset på helsevesenet. Resultatene vil bli publisert i internasjonale fagfellevurderte tidsskrifter og presentert på konferanser og vil bli avsluttet med en doktorgradsavhandling. Resultatene vil bli distribuert til relevant klinisk fora og implementert i nasjonale så vel som internasjonale retningslinjer.