Het klinische nut van DNA-methylatietests bij door de patiënt verzamelde urine- en vaginale monsters om endometriumkanker te detecteren: een case-control onderzoek

ACHTERGROND:

Endometriumkanker (EC) incidentie verhoogt en is het vierde meest voorkomende type kanker bij vrouwen wereldwijd met ongeveer 417.000 nieuwe gevallen en 90.000 doden per jaar. Bovendien is EC de meest voorkomende gynaecologische kanker in ontwikkelde landen, waaronder Denemarken met ongeveer 800 nieuwe gevallen en 90 doden jaarlijks. Vroege diagnose is essentieel, omdat de prognose voor vrouwen met een geavanceerd EC -stadium slecht is. Er bestaat geen screening op EC en het meest waargenomen klinische symptoom is post-menopauzale bloedingen (PMB), wat een veel voorkomende aandoening is die ongeveer 11% van de postmenopauzale vrouwen treft. Omdat 90% van de EC-gevallen wordt voorafgegaan door PMB, is verwijzing voor gespecialiseerde gynaecologische zorg via kankerpatiëntpaden aangegeven voor alle Deense vrouwen met PMB, wat angst veroorzaakt bij vrouwen en hoge gezondheidszorgkosten. Slechts 5-10% van de vrouwen met PMB heeft echter EC.

Wereldwijde, transvaginale echografie (TVU's) evaluatie van het endometrium (afsnijding: dikte ≥4 mm en/of onregelmatige voering van de baarmoederholte) wordt gebruikt om vrouwen met PMB te identificeren die het hoogste risico op kanker hebben en daarom een ​​endometrische biopsie met of zonder hysteroscopie vereisen. Hoewel TVUS -evaluatie zeer gevoelig is (94,8%), lijdt het aan een lage specificiteit (51%) en veroorzaakt het een hoge aantallen onnodige invasieve procedures bij gezonde vrouwen. Bovendien hangt het diagnostische programma af van bekwame specialisten voor ultrasone evaluatie, endometriumbemonstering en histopathologisch onderzoek. Dit versterkt de klinische dringende en onvervulde behoefte aan een eenvoudiger, niet-invasieve, door de gebruiker geleverde en meer specifieke test om de EC-diagnose te ondersteunen.

Deze studie beoogt te bepalen of DNA-methylatietests bij door de patiënt verzamelde urine- en vaginale monsters een klinisch veilig niet-invasief alternatief is om het EC-risico te bepalen. Het testen op verhoogde DNA-hypermethyleringsniveaus van kankerspecifieke genen is aangetoond dat ze een veelbelovende biomarker bieden voor het detecteren van kankers in een vroeg stadium, waaronder cervicale en endometriumkanker. DNA -hypermethylering is gekoppeld aan het zwijgen van tumorsuppressoren, waardoor bijdraagt ​​aan de ontwikkeling van kanker. Biologisch gezien wordt het vermogen om vaginaal en urinemateriaal te gebruiken voor EC-detectie door DNA-methylatietests verklaard door lokaal afstoten van EC-afgeleid DNA- en celfragmenten in het vaginale puin en urine, evenals transrenale uitscheiding van tumour-geschoolde circulerende DNA in de urine.

Voornamelijk kleine proof-of-concepts en case-controlestudies hebben aangetoond haalbaarheid om EC te detecteren met behulp van DNA-methylatietests bij plasma, zelf verzamelde vaginale monsters en door artsen verzamelde cervicale krassen. De eerste papieren rapportage over de diagnostische waarde van DNA-methylatieanalyse in vaginale monsters en urine als vloeibare biopsie voor EC werd vorig jaar zojuist gepubliceerd door co-supervisor Prof. Steenbergen. Hier onthulden case-control gegevens uitstekende diagnostische prestaties van EC-specifieke DNA-methyleringsmarkers in door de patiënt verzamelde urine- en vaginale monsters met gevoeligheden van 89-90% en specificiteiten van 90-92% voor EC-detectie met behulp van markerspanels waaronder: CDH13, GHSR, SST, CDO1 en ZIC1.

Materialen en methoden De vaginale en urinemonsters worden opgeslagen in een biobank op het Dept. of Pathology, Randers Regional Hospital (RHR) tot verzending voor DNA-methylatietestanalyse met behulp van kwantitatieve methyleringsspecifieke PCR (QMSP) in Prof. Steenbergens 'Laboratory in Amsterdam University Medical Center, The Netland. Alle monsters worden getest op methylatiemarkers, drie voor vaginale monsters (CDO1, GHSR, ZIC1) en drie voor urine (GHSR, CDH13, SST). Resultaten over endometriumbiopsieën en hysterectomieën, waaronder moleculaire biomarkers en histologisch type, zullen worden opgehaald uit de landelijke Deense Pathology Databank en het elektronische patiëntboek gekoppeld aan de patiënt via het civiele registratiesysteem in Denemarken, waar alle bewoners een uniek 10-cipher code (CPR-nummer) hebben, waaraan alle gezondheidsgegevens gekoppeld zijn.

DOEL:

1) Om de diagnostische nauwkeurigheid van DNA-methylatietests te bepalen bij door de patiënt verzamelde volledige urine en vaginale monsters om EC te detecteren bij gevallen van kanker en gezonde controles

Onderzoeksplan en haalbaarheid De studie zal worden uitgevoerd in samenwerking tussen University Research Clinic for Cancer Screening, Dept. of Public Health Programs, Dept. of Pathology, RHR en met gynaecologische afdelingen in Central Denemarken (Randers en Aarhus) en Southern Denemarken Region (Odense) die werken als inclusielites. State-of-the-art laboratoriumfaciliteiten zijn aanwezig in het laboratorium van prof. Steenbergen in Amsterdam UMC, ter ondersteuning van de haalbaarheid van de studies.

Perspectieven en communicatie Indien succesvol, zal het onderzoek internationale impact hebben en resulteren in een nieuw diagnostisch hulpmiddel dat onderscheid maakt tussen vrouwen met PMB die al dan niet specialistische verwijzing nodig hebben via kankerpatiënten om invasieve endometriumbiopsieën te hebben. Dit zal tijdige diagnose vergemakkelijken, de angst bij patiënten verlagen en de druk op het gezondheidszorgsysteem verminderen. De resultaten zullen worden gepubliceerd in internationale peer-reviewed tijdschriften en gepresenteerd op conferenties en zullen worden gesloten met een proefschrift. De resultaten zullen worden verspreid onder relevante klinische fora en worden geïmplementeerd in zowel nationale als internationale richtlijnen.