L'utilità clinica dei test di metilazione del DNA nelle urine raccolte dal paziente e nei campioni vaginali per rilevare il carcinoma endometriale: uno studio di caso-controllo

SFONDO:

L'incidenza del carcinoma endometriale (EC) si sta aumentando ed è il quarto tipo di cancro più comune nelle donne in tutto il mondo con circa 417.000 nuovi casi e 90.000 decessi all'anno. Inoltre, la CE è il cancro ginecologico più comune nei paesi sviluppati, tra cui la Danimarca con circa 800 nuovi casi e 90 decessi ogni anno. La diagnosi precoce è essenziale poiché la prognosi per le donne con una fase avanzata della CE è scarsa. Non esiste uno screening per la CE e il sintomo clinico più comunemente osservato è il sanguinamento post-menopausa (PMB), che è una condizione comune che colpisce circa l'11% delle donne postmenopausa. Poiché il 90% dei casi CE è preceduto da PMB, è indicato il rinvio per cure ginecologiche specializzate attraverso percorsi di pazienti tumorali per tutte le donne danesi con PMB, causando ansia tra donne e alti costi di assistenza sanitaria. Tuttavia, solo il 5-10% delle donne che presentano PMB ha EC.

La valutazione ecografica transvaginale in tutto il mondo (TVUS) dell'endometrio (cut-off: spessore ≥4mm e/o rivestimento irregolare della cavità uterina) viene utilizzata per identificare le donne con PMB che hanno il rischio di cancro più alto e quindi richiedono una biopsia endometriale con o senza isteroscopia. Mentre la valutazione TVUS è altamente sensibile (94,8%), soffre di bassa specificità (51%) causando un numero elevato di procedure invasive inutili nelle donne sane. Inoltre, il programma diagnostico dipende da specialisti qualificati per la valutazione degli ultrasuoni, il campionamento endometriale e l'esame istopatologico. Ciò rafforza la necessità clinica urgente e insoddisfatta di un test più semplice, non invasivo, fornito dall'utente e più specifico per aiutare la diagnosi della CE.

Questo studio mira a determinare se i test di metilazione del DNA nelle urine raccolte dal paziente e nei campioni vaginali sono un'alternativa clinicamente sicura non invasiva per determinare il rischio CE. È stato dimostrato un test per elevati livelli di ipermetilazione del DNA di geni specifici del cancro per fornire un biomarcatore promettente per la rilevazione di tumori in stadio iniziale, incluso il carcinoma cervicale ed endometriale. L'ipermetilazione del DNA è stata collegata al silenziamento dei geni soppressori del tumore, contribuendo così allo sviluppo del cancro. Biologicamente, la capacità di utilizzare il materiale vaginale e delle urine per il rilevamento di CE mediante test di metilazione del DNA è spiegata mediante lo spargimento locale di DNA derivato da EC e frammenti di cellule nei detriti vaginali e nelle urine, nonché l'escrezione transrenale del DNA circolante a tegoro nelle urine.

Principalmente piccoli prove di concetti e studi di caso di controllo hanno dimostrato la fattibilità per rilevare EC utilizzando i test di metilazione del DNA in plasma, campioni vaginali auto-raccolti e graffi cervicali raccolti dal medico. Tuttavia, il primo riferimento cartaceo sul valore diagnostico dell'analisi della metilazione del DNA nei campioni vaginali e nelle urine come biopsia liquida per EC è stato appena pubblicato dal co-supervisor Prof. Steenbergen l'anno scorso. Qui, i dati caso-controllo hanno rivelato eccellenti prestazioni diagnostiche dei marcatori di metilazione del DNA specifici per CE nei campioni di urina e vaginali raccolti con i pazienti con i pannelli di marcatori tra cui pannelli tra cui: CDH13, GHSR, SST, CDO1 e ZIC1.

Materiali e metodi I campioni vaginali e di urina saranno immagazzinati in una biobanca presso il dipartimento di patologia, Randers Regional Hospital (RHR) fino alla spedizione per l'analisi del test di metilazione del DNA usando la PCR quantitativa specifica per metilazione (QMSP) nel Prof. Steenbergens di Amsterdam University Center, i Nerveni. Tutti i campioni saranno testati per marcatori di metilazione, tre per campioni vaginali (CDO1, GHSR, ZIC1) e tre per urina (GHSR, CDH13, SST). I risultati sulle biopsie e endometriali e le isterectomie, compresi i biomarcatori molecolari e il tipo istologico, saranno recuperati dalla banca di patologia danese nazionale e dal diario elettronico dei pazienti collegati al paziente attraverso il sistema di registrazione civile in Danimarca, dove tutti i residenti hanno un codice unico a 10 cifre (CPR-Number), a cui tutti i dati sanitari sono collegati.

SCOPO:

1) Per determinare l'accuratezza diagnostica dei test di metilazione del DNA nelle urine a vuoto pieno raccolto dal paziente e nei campioni vaginali per rilevare CE tra i casi di cancro e i controlli sani

Piano di ricerca e fattibilità Lo studio sarà condotto in collaborazione tra la clinica di ricerca universitaria per lo screening del cancro, il dipartimento dei programmi di sanità pubblica, il dipartimento di patologia, RHR e con i dipartimenti ginecologici in Danimarca centrale (Randers e Aarhus) e la regione della Danimarca meridionale (Odense) che lavora come siti di inclusione. Sono in atto strutture di laboratorio all'avanguardia presso il laboratorio del Prof. Steenbergen presso Amsterdam UMC, a sostegno della fattibilità degli studi.

Prospettive e comunicazione In caso di successo, la ricerca avrà un impatto internazionale e comporterà un nuovo strumento diagnostico che differenzierà tra donne con PMB che fanno o non hanno bisogno di referral specializzati attraverso i percorsi dei malati di cancro per avere biopsie endometriali invasive. Ciò faciliterà una diagnosi tempestiva, abbasserà l'ansia tra i pazienti e riducendo la pressione sul sistema sanitario. I risultati saranno pubblicati su riviste internazionali peer-reviewed e presentati a conferenze e si concluderanno con una tesi di dottorato. I risultati saranno distribuiti a pertinenti clinici e implementati nelle linee guida nazionali e internazionali.