Den kliniske anvendelighed af DNA-methyleringstest i patientindsamlet urin og vaginale prøver for at påvise endometrial kræft: En case-control-undersøgelse

BAGGRUND:

Endometrial kræft (EC) -forekomst hæver og er den fjerde mest almindelige kræfttype hos kvinder over hele verden med ca. 417.000 nye tilfælde og 90.000 dødsfald årligt. Desuden er EF den mest almindelige gynækologiske kræft i udviklede lande, herunder Danmark med omkring 800 nye sager og 90 dødsfald årligt. Tidlig diagnose er vigtig, da prognosen for kvinder med en avanceret EC -fase er dårlig. Der findes ingen screening for EC, og det mest almindeligt observerede kliniske symptom er postmenopausal blødning (PMB), hvilket er en almindelig tilstand, der påvirker ca. 11% af kvinder efter menopausal. Fordi 90% af EF-sager er forudgående af PMB, er henvisning til specialiseret gynækologisk pleje gennem kræftpatientveje indikeret for alle danske kvinder med PMB, hvilket forårsager angst blandt kvinder og høje sundhedsomkostninger. Imidlertid har kun 5-10% af kvinder, der præsenterer for PMB, EC.

På verdensplan er transvaginal ultralyd (TVUS) evaluering af endometrium (afskæring: tykkelse ≥4 mm og/eller uregelmæssig foring af livmoderhulen) brugt til at identificere kvinder med PMB, der har den højeste kræftrisiko og derfor kræver en endometrial biopsi med eller uden hysteroskopi. Mens TVUS -evaluering er meget følsom (94,8%), lider den af ​​lav specificitet (51%), der forårsager et stort antal unødvendige invasive procedurer hos raske kvinder. Derudover afhænger det diagnostiske program af dygtige specialister til ultralydvaluering, endometrial prøveudtagning samt histopatologisk undersøgelse. Dette styrker det kliniske presserende og uopfyldte behov for et enklere, ikke-invasivt, bruger-leveret og mere specifikt test for at hjælpe EC-diagnosen.

Denne undersøgelse har til formål at bestemme, om DNA-methyleringstest i patientindsamlet urin og vaginale prøver er et klinisk sikkert ikke-invasivt alternativ til at bestemme EC-risiko. Testning for forhøjede DNA-hypermethyleringsniveauer af kræftspecifikke gener er blevet påvist at tilvejebringe en lovende biomarkør til påvisning af kræft i tidlige stadier, herunder cervikal og endometrial kræft. DNA -hypermethylering er blevet knyttet til lyddæmpning af tumorundertrykkende gener, hvilket har bidraget til kræftudvikling. Biologisk forklares evnen til at anvende vaginal og urinmateriale til EC-detektion ved DNA-methyleringstest ved lokal udgydelse af EC-afledt DNA og cellefragmenter i det vaginale affald og urin såvel som transrenal udskillelse af tumour-kastet cirkulerende DNA i urinen.

Hovedsageligt små proof-of-concepts og case-controls-undersøgelser har vist gennemførlighed til at detektere EC ved anvendelse af DNA-methyleringstest i plasma, selvindsamlede vaginale prøver og klinikerindsamlede cervikale skrammer. Imidlertid blev den første papirrapportering om den diagnostiske værdi af DNA-methyleringsanalyse i vaginale prøver og urin som en flydende biopsi for EC netop offentliggjort af co-supervisor-prof. Steenbergen sidste år. Her afslørede casekontroldata fremragende diagnostisk ydeevne af EC-specifikke DNA-methyleringsmarkører i patientindsamlet urin og vaginale prøver med følsomhed på 89-90% og specificiteter på 90-92% til EC-detektion ved anvendelse af markørerpaneler inklusive: CDH13, GHSR, SST, CDO1 og ZIC1.

Materialer og metoder Vaginal- og urinprøverne opbevares i en Biobank ved Dept. of Pathology, Randers Regional Hospital (RHR), indtil forsendelse til DNA-methyleringstestanalyse ved hjælp af kvantitativt methyleringsspecifikke PCR (QMSP) i prof. Steenbergens 'laboratorium ved Amsterdam University Medical Center, Netherlands. Alle prøver vil blive testet for methyleringsmarkører, tre for vaginale prøver (CDO1, GHSR, ZIC1) og tre for urin (GHSR, CDH13, SST). Resultaterne af endometriale biopsier og hysterektomier, herunder molekylære biomarkører og histologisk type, hentes fra den landsdækkende danske patologidatabank og det elektroniske patientjournal, der er knyttet til patienten gennem civile registreringssystem i Danmark, hvor alle beboere har en unik 10-cipher-kode (CPR-nummer), hvor alle sundhedsdata er knyttet til.

SIGTE:

1) For at bestemme den diagnostiske nøjagtighed af DNA-methyleringstest i patientindsamlet urin og vaginale prøver med fuld ulykke for at detektere EC blandt kræftsager og sunde kontroller

Forskningsplan og gennemførlighed Undersøgelsen vil blive gennemført i samarbejde mellem universitetsforskningsklinik for kræftscreening, afd. For folkesundhedsprogrammer, afd. For patologi, RHR og med gynækologiske afdelinger i det centrale Danmark (Randers og Aarhus) og det sydlige Danmark -region (Odense), der arbejder som inklusionssteder. De avancerede laboratoriefaciliteter er på plads på prof. Steenbergens laboratorium i Amsterdam UMC, der understøtter gennemførligheden af ​​undersøgelserne.

Perspektiver og kommunikation Hvis det lykkes, vil forskningen have international indflydelse og resultere i et nyt diagnostisk værktøj, der vil skelne mellem kvinder med PMB, der gør eller ikke har brug for specialiserede henvisning gennem kræftpatienters veje for at have invasive endometriale biopsier. Dette vil lette rettidig diagnose, sænke angsten blandt patienter og reducere presset på sundhedsvæsenet. Resultaterne vil blive offentliggjort i internationale peer-reviewede tidsskrifter og præsenteret på konferencer og vil blive afsluttet med en ph.d.-afhandling. Resultaterne vil blive distribueret til relevant klinisk fora og implementeret i nationale såvel som internationale retningslinjer.