Kliniczna użyteczność testów metylacji DNA w próbkach moczu i pochwy w celu wykrycia raka endometrium: badanie kontroli przypadków

TŁO:

Częstość występowania raka endometrium (EC) rośnie i jest czwartym najczęstszym rodzajem raka u kobiet na całym świecie z około 417 000 nowych przypadków i 90 000 zgonów rocznie. Ponadto EC jest najczęstszym rakiem ginekologicznym w krajach rozwiniętych, w tym Danii z około 800 nowymi przypadkami i 90 zgonami rocznie. Wczesna diagnoza jest niezbędna, ponieważ rokowanie dla kobiet o zaawansowanym stadium WE są słabe. Nie istnieje badania przesiewowe w kierunku EC, a najczęściej obserwowanym objawem klinicznym jest krwawienie po menopauzie (PMB), co jest częstym stanem dotykającym około 11% kobiet po menopauzie. Ponieważ 90% przypadków EC jest poprzedzone PMB, skierowanie do wyspecjalizowanej opieki ginekologicznej poprzez szlaki pacjentów z rakiem jest wskazane dla wszystkich duńskich kobiet z PMB, powodując lęk wśród kobiet i wysokie koszty opieki zdrowotnej. Jednak tylko 5-10% kobiet prezentujących PMB ma EC.

Na całym świecie ocena ultrasonografii transpochwowej (TVUS) endometrium (odcięcie: grubość ≥4 mm i/lub nieregularna podszewka jamy macicy) jest wykorzystywana do identyfikacji kobiet z PMB, które mają najwyższe ryzyko raka, a zatem wymagają biopsji endometrium z hysteroskopią lub bez hysteroskopii. Podczas gdy ocena TVUS jest bardzo wrażliwa (94,8%), cierpi na niską swoistość (51%), powodując dużą liczbę niepotrzebnych procedur inwazyjnych u zdrowych kobiet. Ponadto program diagnostyczny zależy od wykwalifikowanych specjalistów do oceny ultradźwięków, pobierania próbek endometrium i badania histopatologicznego. To wzmacnia kliniczną pilną i niezaspokojoną potrzebę prostszego, nieinwazyjnego, dostarczanego przez użytkownika i bardziej szczegółowego testu w celu ułatwienia diagnozy EC.

To badanie ma na celu ustalenie, czy testy metylacji DNA w gromadzonych przez pacjenta próbki moczu i pochwy jest klinicznie bezpieczną nieinwazyjną alternatywą w celu ustalenia ryzyka EC. Wykazano, że testowanie podwyższonego hipermetylacji genów hipermetylacji DNA specyficznych dla raka stanowi obiecujący biomarker do wykrywania nowotworów wczesnego stadium, w tym raka szyjki macicy i endometrium. Hipermetylacja DNA została powiązana z wyciszeniem genów supresorowych nowotworów, tym samym przyczyniając się do rozwoju raka. Biologicznie zdolność do stosowania materiału pochwy i moczu do wykrywania EC przez testowanie metylacji DNA jest wyjaśniane przez miejscowe zrzucanie DNA pochodzącego z EC i fragmentów komórek do resztek pochwy i moczu, a także transnerczenie wydalania krążącego DNA krążącego nowotworu do moczu.

Głównie niewielkie badania dowodowe i kontrolne przypadki wykazały wykonalność wykrywania EC za pomocą testów metylacji DNA w osoczu, samodzielnych próbkach pochwy i zatrukanych klinicystą skrobi szyjki macicy. Jednak pierwsze zgłoszenie artykułu na temat wartości diagnostycznej analizy metylacji DNA w próbkach pochwy i moczu jako płynnej biopsji dla EC została właśnie opublikowana przez współzależności prof. Steenbergen w zeszłym roku. Tutaj dane dotyczące kontroli przypadków ujawniły doskonałą wydajność diagnostyczną specyficznych dla EC markerów metylacji DNA w pobranych przez pacjenta próbkach moczu i pochwy o wrażliwości 89-90% i specyficzności 90-92% w wykryciu EC przy użyciu paneli markerów, w tym: CDH13, GHSR, SST, CDO1 i ZIC1.

Materiały i metody Próbki pochwy i moczu będą przechowywane w biobank w Departamencie Patologii, Randers Regional Hospital (RHR) do wysyłki do analizy testowania metylacji DNA przy użyciu ilościowej PCR (QMSP) w laboratorium prof. Steenbergensa w Amsterdam University Medical Center, w Netherlands. Wszystkie próbki zostaną przetestowane pod kątem markerów metylacji, trzech dla próbek pochwy (CDO1, GHSR, ZIC1) i trzech dla moczu (GHSR, CDH13, SST). Wyniki biopsji endometrium i histerektomii, w tym biomarkerów molekularnych i typu histologicznego, zostaną odzyskane z ogólnokrajowego duńskiego patologii, a elektroniczny czasopismo pacjentów powiązane z pacjentem za pomocą systemu rejestracji cywilnej w Danii, gdzie wszyscy mieszkańcy mają unikalny kodeks 10-wycofania (Numer CPR), z którym wszystkie dane zdrowotne są powiązane.

CEL:

1) W celu ustalenia dokładności diagnostycznej testowania metylacji DNA w pełnym uwadze moczu i próbkach pochwy w celu wykrycia EC wśród przypadków raka i zdrowych kontroli

Plan badań i wykonalność Badanie zostanie przeprowadzone we współpracy między uniwersytecką kliniką badawczą w zakresie badań przesiewowych raka, Departament Programów Zdrowia Publicznego, Departament Patologii, RHR oraz z działami ginekologicznymi w Danii środkowej (Randers i Aarhus) i regionem Danii południowej (Odense) działający jako miejsca włączenia. Najnowocześniejsze zakłady laboratoryjne występują w laboratorium prof. Steenbergen w Amsterdamie UMC, potwierdzając wykonalność badań.

Perspektywy i komunikacja, jeśli się powiedzie, badania będą miały wpływ międzynarodowy i spowoduje nowe narzędzie diagnostyczne, które rozróżni kobiety z PMB, które robią lub nie będą potrzebować specjalistycznego skierowania przez szlaki pacjentów z rakiem, aby mieć inwazyjne biopsje endometrium. Ułatwi to terminową diagnozę, obniży lęk wśród pacjentów i zmniejszy presję na system opieki zdrowotnej. Wyniki zostaną opublikowane w międzynarodowych czasopismach recenzowanych i przedstawione na konferencjach i zostaną zakończone rozprawą doktorancką. Wyniki zostaną rozpowszechnione na odpowiednią kliniczną forę i wdrożone w wytycznych krajowych i międzynarodowych.