Klinická užitečnost testování methylace DNA v moči shromážděných pacientem a vaginálních vzorcích k detekci rakoviny endometria: případová kontrola studie

POZADÍ:

Incidence rakoviny endometria (EC) zvyšuje a je čtvrtým nejběžnějším typem rakoviny u žen po celém světě s asi 417 000 novými případy a 90 000 úmrtími ročně. Kromě toho je EC nejběžnější gynekologickou rakovinou ve vyspělých zemích, včetně Dánska s asi 800 novými případy a 90 úmrtí ročně. Včasná diagnóza je nezbytná, protože prognóza pro ženy s pokročilým stádiem EC je špatná. Neexistuje žádný screening pro EC a nejčastěji pozorovaným klinickým symptomem je po menopauzálním krvácení (PMB), což je běžný stav postihující asi 11% postmenopauzálních žen. Protože 90% případů ES předchází PMB, doporučení specializované gynekologické péče prostřednictvím cest pacientů s rakovinou je indikováno u všech dánských žen s PMB, což způsobuje úzkost mezi ženami a vysoké náklady na zdravotní péči. Pouze 5-10% žen prezentujících s PMB však má EC.

Celosvětově se hodnocení transvaginálního ultrazvuku (TVUS) endometria (mezní hodnota: tloušťka ≥ 4 mm a/nebo nepravidelné obložení děložní dutiny) používá k identifikaci žen s PMB, které mají nejvyšší riziko rakoviny, a proto vyžadují endometriální biopsii s hysteroskopií nebo bez hysteroskopie. Zatímco hodnocení televize je vysoce citlivé (94,8%) trpí nízkou specificitou (51%) a způsobuje u zdravých žen vysoký počet zbytečných invazivních postupů. Diagnostický program navíc závisí na kvalifikovaných odbornících pro hodnocení ultrazvuku, vzorkování endometria a histopatologickém vyšetření. To posiluje klinickou naléhavou a neuspokojenou potřebu jednodušší, neinvazivní, uživatelsky poskytované a konkrétnější test pro napomáhání diagnózy EC.

Cílem této studie je zjistit, zda testování methylace DNA v moči shromážděné pacientem a vaginálních vzorcích je klinicky bezpečná neinvazivní alternativa k určení rizika EC. Bylo prokázáno, že testování na zvýšenou hypermethylační hladinu DNA hypermethylace v rakovině poskytuje slibný biomarker pro detekci rakovin v rané fázi, včetně rakoviny děložního čípku a endometria. Hypermethylace DNA byla spojena s umlčením genů potlačení nádoru, čímž přispívá k vývoji rakoviny. Biologicky je schopnost používat vaginální a močový materiál pro detekci EC pomocí testování methylace DNA lokálním uvolňováním DNA odvozených od EC a fragmentů buněk do vaginálních zbytků a močí a také pro transenální vylučování cirkulující DNA do moči.

Hlavně malé důkazy o koncepcích a případových kontrolních studiích prokázaly proveditelnost pro detekci EC pomocí testování methylace DNA v plazmě, samoobslužných vaginálních vzorcích a lékařského děložního čípku. První článek hlášení o diagnostické hodnotě analýzy methylace DNA ve vaginálních vzorcích a moči jako kapalinové biopsii pro EC však byl v loňském roce právě publikován spoluzakladatelem prof. Steenbergenem. Zde údaje o kontrole případu odhalily vynikající diagnostický výkon methylačních markerů DNA specifických pro EC v moči a vaginálních vzorcích s citlivostí 89-90% a specifik 90-92% pro detekci EC pomocí markerů, včetně: CDH13, SST, SST, CDO1 a ZIC1.

Materiály a metody Vzorky vaginálních a moči budou uloženy v biobank na oddělení patologie, Randers Regional Hospital (RHR) až do odeslání pro analýzu testování methylace DNA pomocí kvantitativní methylace specifické PCR (QMSP) v prof. Steenbergensově laboratoři v Amsterdam University Medical Center, Netheronds. Všechny vzorky budou testovány na methylační markery, tři pro vaginální vzorky (CDO1, GHSR, ZIC1) a tři pro moč (GHSR, CDH13, SST). Výsledky endometriálních biopsií a hysterektomií včetně molekulárních biomarkerů a histologického typu budou získány z celostátní dánské patologické databanky a elektronického deníku pacientů spojených s pacientem prostřednictvím systému civilního registrace v Dánsku, kde všichni obyvatelé mají jedinečný 10-cifer kód (CPR-Nurm), ke kterému jsou všechny zdravotní údaje).

CÍL:

1) Chcete-li stanovit diagnostickou přesnost testování methylace DNA u pacientového plného moči a vaginálních vzorků pro detekci EC mezi případy rakoviny a zdravé kontroly

Plán výzkumu a proveditelnost Studie bude prováděna ve spolupráci mezi univerzitním výzkumným klinikou pro screening rakoviny, oddělením programů veřejného zdraví, odbor patologie, RHR a gynekologickými odděleními v centrálním Dánsku (Randers a Aarhus) a jižním denem (Onsense) pracujícím jako místa inkluze. Nejmodernější laboratorní zařízení jsou zavedena v laboratoři prof. Steenbergena v Amsterdamu UMC, což podporuje proveditelnost studií.

Perspektivy a komunikace, pokud bude úspěšný, bude mít výzkum mezinárodní dopad a bude mít za následek nový diagnostický nástroj, který rozlišuje mezi ženami s PMB, které dělají nebo nepotřebují specializované doporučení prostřednictvím cest pacientů s rakovinou, aby měly invazivní biopsie endometria. To usnadní včasnou diagnózu, sníží úzkost mezi pacienty a sníží tlak na systém zdravotní péče. Výsledky budou zveřejněny v mezinárodních recenzovaných časopisech a představeny na konferencích a budou uzavřeny disertací PhD. Výsledky budou distribuovány na relevantní klinické fólie a prováděny do národních i mezinárodních pokynů.