MiARN circulants.

Objectifs principaux:

1. Identifier un panel de miARN, détectables dans la circulation, qui sont altérés chez les patientes atteintes d'un cancer du sein
2. Identifier des combinaisons spécifiques de miARN ("signatures") qui s'associent aux sous-types intrinsèques du cancer du sein, et pourraient ainsi contribuer au pronostic et à la planification du traitement sur une base individuelle.

Objectif secondaire :

1. Déterminer si l'analyse systémique des miARN peut être utilisée comme biomarqueur pour surveiller la réponse à la chimiothérapie, dans le cadre néoadjuvant et chez les patientes qui présentent une récidive du cancer du sein et qui sont traitées par chimiothérapie initiale et/ou hormonothérapie.

   Il s'agit d'une étude de cohorte prospective, impliquant trois cohortes d'étude :

   Cohorte 1 : Toutes les patientes atteintes d'un cancer du sein nouvellement diagnostiqué qui doivent subir une chimiothérapie néoadjuvante.

   Cohorte 2 : Toutes les patientes atteintes d'un cancer du sein qui présentent une maladie métastatique, une récidive ou une progression de la maladie, qui commencent une chimiothérapie initiale +/- une hormonothérapie.

   Cohorte 3 : Toutes les patientes atteintes d'un cancer du sein qui présentent une maladie métastatique et qui commencent uniquement un traitement hormonal.

   Échantillon de sang

   Prélèvement sanguin - Cohorte 1 :

   - Prélèvement sanguin 1 : à la présentation avant le début du traitement néoadjuvant.

   - Prélèvement sanguin 2 : à mi-chemin de leur traitement de chimiothérapie (après le 2e cycle s'ils sont inscrits dans un régime de 4 cycles, ou après le 4e cycle s'ils sont prescrits pour un régime de 8 semaines).

   - Prélèvement sanguin 3 : post-chimiothérapie (avant chirurgie le cas échéant).

   - Prise de sang 4 : 2 à 4 semaines après l'intervention, ou 2 à 4 semaines après la 3e prise de sang si les patients ne sont pas opérés.

   - Prélèvement sanguin 5 : une fois au cours du suivi de 12 à 18 mois après la chirurgie ou 12 à 18 mois après la 3e prise de sang si les patients ne sont pas opérés.

   Prélèvement sanguin - Cohorte 2 :

   - Prélèvement sanguin avant traitement : lors de la présentation avant le début du traitement.

   - Sur les échantillons de sang de l'étude : prélevés tous les mois (± 1 semaine) pendant une période de 6 mois à compter de la date de l'échantillon de sang avant le traitement, que le patient soit sous traitement ou qu'il ait terminé le traitement.

   Sur l'échantillon de sang de l'étude 1 : 1 mois (± 1 semaine) à compter de la date de l'échantillon de sang avant le traitement

   Sur l'échantillon de sang de l'étude 2 : 2 mois (± 1 semaine) à compter de la date de l'échantillon de sang avant le traitement

   Sur l'échantillon de sang de l'étude 3 : 3 mois (± 1 semaine) à compter de la date de l'échantillon de sang avant le traitement

   Sur l'échantillon de sang de l'étude 4 : 4 mois (± 1 semaine) à compter de la date de l'échantillon de sang avant le traitement

   Sur l'échantillon de sang de l'étude 5 : 5 mois (± 1 semaine) à compter de la date de l'échantillon de sang avant le traitement

   Sur l'échantillon de sang de l'étude 6 : 6 mois (± 1 semaine) à compter de la date de l'échantillon de sang avant le traitement

   - Prélèvement sanguin à la fin de l'étude : une fois au cours du suivi de 12 à 18 mois à compter de la date du prélèvement sanguin avant le traitement ou au moment de la progression de la maladie.

   Prélèvement sanguin - Cohorte 3 :

   - Prélèvement sanguin avant traitement : lors de la présentation avant le début du traitement.

   - Sur les échantillons sanguins de l'étude : prélevés aux moments suivants, que le patient soit sous traitement ou qu'il ait terminé son traitement.

   Sur l'échantillon de sang de l'étude 1 : 3 mois (± 2 semaines) à compter de la date de l'échantillon de sang de pré-traitement Sur l'échantillon de sang de l'étude 2 : 6 mois (± 2 semaines) à compter de la date de l'échantillon de sang de pré-traitement Sur l'échantillon de sang de l'étude 3 : 12 mois (± 2 semaines) à compter de la date du prélèvement sanguin avant le traitement

   - Prélèvement sanguin à la fin de l'étude : 18 mois (± 2 semaines) à compter de la date du prélèvement sanguin avant le traitement ou au moment de la progression de la maladie.

   Des échantillons de sang seront traités pour l'analyse des miARN, ce qui implique :

1. Lyse à l'aide de Trizol 2. Isolement de l'ARN 3. Évaluation de la concentration et de l'intégrité de l'ARN à l'aide de la spectrophotométrie Nanodrop 4. Synthèse d'ADNc (à l'aide d'amorces de boucles spécifiques aux miARN) 5. Amplification par PCR et quantification relative (à l'aide de sondes spécifiques aux miARN)