Zirkulierende miRNAs.

Hauptziele:

1. Identifizierung eines Panels von im Kreislauf nachweisbaren miRNAs, die bei Brustkrebspatientinnen verändert sind
2. Spezifische Kombinationen von miRNAs („Signaturen“) zu identifizieren, die mit intrinsischen Untertypen von Brustkrebs assoziiert sind, und dadurch bei der Prognose und Behandlungsplanung auf individueller Patientenbasis helfen könnten.

Sekundäres Ziel:

1. Um zu bestimmen, ob die systemische miRNA-Analyse als Biomarker zur Überwachung des Ansprechens auf eine Chemotherapie im neoadjuvanten Setting und bei Patientinnen mit Brustkrebsrezidiv verwendet werden kann und vorab mit einer Chemotherapie und/oder Hormontherapie behandelt wird.

   Dies ist eine prospektive Kohortenstudie, an der drei Studienkohorten beteiligt sind:

   Kohorte 1: Alle Patientinnen mit neu diagnostiziertem Brustkrebs, die sich einer neoadjuvanten Chemotherapie unterziehen sollen.

   Kohorte 2: Alle Brustkrebspatientinnen mit metastasierter Erkrankung, Wiederauftreten oder Fortschreiten der Erkrankung, die mit einer Chemotherapie +/- Hormontherapie beginnen.

   Kohorte 3: Alle Brustkrebspatientinnen mit metastasierter Erkrankung, die nur mit einer Hormontherapie beginnen.

   Blutprobe

   Blutentnahme - Kohorte 1:

   - Blutprobe 1: bei Vorstellung vor Beginn der neoadjuvanten Behandlung.

   - Blutprobe 2: Mitte ihrer Chemotherapiebehandlung (nach dem 2. Zyklus, wenn sie in ein 4-Zyklen-Regime aufgenommen wurden, oder nach dem 4. Zyklus, wenn ihnen ein 8-Wochen-Regime verschrieben wurde).

   - Blutprobe 3: nach der Chemotherapie (ggf. vor der Operation).

   - Blutentnahme 4: 2 bis 4 Wochen nach der Operation oder 2 bis 4 Wochen nach der 3. Blutentnahme, wenn Patienten nicht operiert werden.

   - Blutprobe 5: einmal während der Nachsorge von 12 bis 18 Monaten nach der Operation oder 12 bis 18 Monate nach der 3. Blutentnahme, wenn Patienten nicht operiert werden.

   Blutentnahme - Kohorte 2:

   - Blutprobe vor der Behandlung: bei Vorstellung vor Beginn der Behandlung.

   - Blutproben aus der Studie: Entnahme in monatlichen (± 1 Woche) Abständen für einen Zeitraum von 6 Monaten ab dem Datum der Blutprobe vor der Behandlung, unabhängig davon, ob der Patient eine Behandlung erhält oder die Behandlung abgeschlossen hat.

   Bei Studienblutprobe 1: 1 Monat (± 1 Woche) ab dem Datum der Blutprobe vor der Behandlung

   Bei Studienblutprobe 2: 2 Monate (± 1 Woche) ab dem Datum der Blutprobe vor der Behandlung

   Bei Studienblutprobe 3: 3 Monate (± 1 Woche) ab dem Datum der Blutprobe vor der Behandlung

   Bei Studienblutprobe 4: 4 Monate (± 1 Woche) ab dem Datum der Blutprobe vor der Behandlung

   Bei Studienblutprobe 5: 5 Monate (± 1 Woche) ab dem Datum der Blutprobe vor der Behandlung

   Bei Studienblutprobe 6: 6 Monate (± 1 Woche) ab dem Datum der Blutprobe vor der Behandlung

   - Blutprobe am Ende der Studie: einmal während der Nachbeobachtung von 12 bis 18 Monaten ab dem Datum der Blutprobe vor der Behandlung oder zum Zeitpunkt des Fortschreitens der Krankheit.

   Blutentnahme - Kohorte 3:

   - Blutprobe vor der Behandlung: bei Vorstellung vor Beginn der Behandlung.

   - Blutproben zu Studienzwecken: Entnahme zu den folgenden Zeitpunkten, unabhängig davon, ob sich der Patient in Behandlung befindet oder die Behandlung abgeschlossen hat.

   An Studienblutprobe 1: 3 Monate (± 2 Wochen) ab Datum der Blutprobe vor der Behandlung An Studienblutprobe 2: 6 Monate (± 2 Wochen) ab Datum der Blutprobe vor der Behandlung An Studienblutprobe 3: 12 Monate (± 2 Wochen) ab dem Datum der Blutprobe vor der Behandlung

   - Blutentnahme am Ende der Studie: 18 Monate (± 2 Wochen) ab dem Datum der Blutentnahme vor der Behandlung oder zum Zeitpunkt des Fortschreitens der Krankheit.

   Blutproben werden für die miRNA-Analyse verarbeitet, die Folgendes umfasst:

1. Lyse mit Trizol 2. RNA-Isolierung 3. Beurteilung der Konzentration und Integrität der RNA mit Nanodrop-Spektrophotometrie 4. cDNA-Synthese (unter Verwendung von miRNA-spezifischen Stem-Loop-Primern) 5. PCR-Amplifikation und relative Quantifizierung (unter Verwendung von miRNA-spezifischen Sonden)