Циркулирующие микроРНК.

Основные цели:

1. Определить панель микроРНК, обнаруживаемых в кровотоке, которые изменены у пациентов с раком молочной железы.
2. Выявить специфические комбинации микроРНК («сигнатуры»), которые связаны с внутренними подтипами рака молочной железы и, таким образом, могут помочь в прогнозировании и планировании лечения для каждого отдельного пациента.

Второстепенная цель:

1. Определить, можно ли использовать системный анализ миРНК в качестве биомаркера для мониторинга ответа на химиотерапию в неоадъювантных условиях и у пациентов с рецидивом рака молочной железы, получающих предварительную химиотерапию и/или гормональную терапию.

   Это проспективное когортное исследование с участием трех исследовательских когорт:

   Когорта 1: все пациенты с недавно диагностированным раком молочной железы, которым запланировано проведение неоадъювантной химиотерапии.

   Когорта 2: все пациенты с раком молочной железы с метастазами, рецидивом или прогрессированием заболевания, которые начинают предварительную химиотерапию +/- гормональную терапию.

   Когорта 3: все больные раком молочной железы с метастазами, которые только начинают гормональную терапию.

   Образец крови

   Забор крови - когорта 1:

   - Образец крови 1: при поступлении до начала неоадъювантного лечения.

   - Образец крови 2: в середине химиотерапевтического лечения (после 2-го цикла, если они зачислены на 4-цикловую схему, или после 4-го цикла, если им назначена 8-недельная схема).

   - Образец крови 3: после химиотерапии (до операции, если применимо).

   - Образец крови 4: через 2–4 недели после операции или через 2–4 недели после третьего забора крови, если пациенту не проводят операцию.

   - Образец крови 5: один раз во время последующего наблюдения в течение 12–18 месяцев после операции или через 12–18 месяцев после третьего забора крови, если пациенты не подвергаются хирургическому вмешательству.

   Забор крови - Когорта 2:

   - Образец крови перед лечением: при поступлении перед началом лечения.

   - Образцы крови для исследования: берутся ежемесячно (± 1 неделя) в течение 6 месяцев с даты взятия образца крови до лечения, независимо от того, находится ли пациент на лечении или завершил лечение.

   На исследуемом образце крови 1: 1 месяц (± 1 неделя) с даты взятия образца крови до лечения

   На образце крови для исследования 2: 2 месяца (± 1 неделя) с даты взятия образца крови до лечения.

   На образце крови для исследования 3: 3 месяца (± 1 неделя) с даты взятия образца крови до лечения.

   На исследуемом образце крови 4: 4 месяца (± 1 неделя) с даты взятия образца крови до лечения.

   На образце крови для исследования 5: 5 месяцев (± 1 неделя) с даты взятия образца крови до лечения.

   На исследуемом образце крови 6: 6 месяцев (± 1 неделя) с даты взятия образца крови до лечения.

   - Образец крови в конце исследования: один раз в течение периода наблюдения от 12 до 18 месяцев с даты взятия образца крови до лечения или во время прогрессирования заболевания.

   Забор крови - когорта 3:

   - Образец крови перед лечением: при поступлении перед началом лечения.

   - Образцы крови для исследования: берутся в следующие моменты времени, независимо от того, находится ли пациент на лечении или завершил лечение.

   На образце крови для исследования 1: 3 месяца (± 2 недели) с даты взятия образца крови до лечения На образце крови для исследования 2: 6 месяцев (± 2 недели) с даты взятия образца крови до лечения На образце крови для исследования 3: 12 месяцев (± 2 недели) с даты забора крови до лечения

   - Образец крови в конце исследования: 18 месяцев (± 2 недели) с даты взятия образца крови до лечения или во время прогрессирования заболевания.

   Образцы крови будут обработаны для анализа миРНК, который включает:

1. Лизис с использованием тризола 2. Выделение РНК 3. Оценка концентрации и целостности РНК с помощью спектрофотометрии Nanodrop 4. Синтез кДНК (с использованием праймеров стволовой петли, специфичных для микроРНК) 5. ПЦР-амплификация и относительная количественная оценка (с использованием зондов, специфичных для микроРНК)