MiRNAs circulantes.

Objetivos primários:

1. Identificar um painel de miRNAs, detectáveis ​​na circulação, que estão alterados em pacientes com câncer de mama
2. Identificar combinações específicas de miRNAs ('assinaturas') que se associam a subtipos intrínsecos de câncer de mama e, portanto, podem auxiliar no prognóstico e no planejamento do tratamento para cada paciente.

Objetivo Secundário:

1. Determinar se a análise sistêmica de miRNA pode ser usada como um biomarcador para monitorar a resposta à quimioterapia, no cenário neoadjuvante e em pacientes que apresentam recorrência de câncer de mama e são tratados com quimioterapia inicial e/ou terapia hormonal.

   Este é um estudo de coorte prospectivo, envolvendo três coortes de estudo:

   Coorte 1: Todos os pacientes recém-diagnosticados com câncer de mama que estão agendados para quimioterapia neoadjuvante.

   Coorte 2: Todos os pacientes com câncer de mama que apresentam doença metastática, recorrência ou progressão da doença, que estão iniciando quimioterapia inicial +/- terapia hormonal.

   Coorte 3: Todos os pacientes com câncer de mama que apresentam doença metastática que estão iniciando apenas terapia hormonal.

   Amostra de sangue

   Amostragem de sangue - Coorte 1:

   - Amostra de sangue 1: na apresentação antes de iniciar o tratamento neoadjuvante.

   - Amostra de sangue 2: no meio do tratamento quimioterápico (após o 2º ciclo, se estiver inscrito em um regime de 4 ciclos, ou após o 4º ciclo, se for prescrito um regime de 8 semanas).

   - Amostra de sangue 3: pós-quimioterapia (antes da cirurgia, conforme aplicável).

   - Amostra de sangue 4: 2 a 4 semanas após a cirurgia, ou 2 a 4 semanas após a 3ª coleta de sangue, se os pacientes não forem submetidos à cirurgia.

   - Amostra de sangue 5: uma vez durante o acompanhamento de 12 a 18 meses após a cirurgia ou 12 a 18 meses após a 3ª coleta de sangue, se os pacientes não forem submetidos à cirurgia.

   Amostragem de sangue - Coorte 2:

   - Amostra de sangue pré-tratamento: na apresentação antes de iniciar o tratamento.

   - Amostras de sangue no estudo: coletadas mensalmente (± 1 semana) em intervalos por um período de 6 meses a partir da data da amostra de sangue pré-tratamento, independentemente de o paciente estar em tratamento ou em tratamento concluído.

   Na amostra de sangue do estudo 1: 1 mês (± 1 semana) a partir da data da amostra de sangue pré-tratamento

   Na amostra de sangue do estudo 2: 2 meses (± 1 semana) a partir da data da amostra de sangue pré-tratamento

   Na amostra de sangue do estudo 3: 3 meses (± 1 semana) a partir da data da amostra de sangue pré-tratamento

   Na amostra de sangue do estudo 4: 4 meses (± 1 semana) a partir da data da amostra de sangue pré-tratamento

   Na amostra de sangue do estudo 5: 5 meses (± 1 semana) a partir da data da amostra de sangue pré-tratamento

   Na amostra de sangue do estudo 6: 6 meses (± 1 semana) a partir da data da amostra de sangue pré-tratamento

   - Amostra de sangue no final do estudo: uma vez durante o acompanhamento de 12 a 18 meses a partir da data da amostra de sangue pré-tratamento ou no momento da progressão da doença.

   Amostragem de sangue - Coorte 3:

   - Amostra de sangue pré-tratamento: na apresentação antes de iniciar o tratamento.

   - Amostras de sangue do estudo: coletadas nos seguintes pontos de tempo, independentemente de o paciente estar em tratamento ou em tratamento concluído.

   Na amostra de sangue do estudo 1: 3 meses (± 2 semanas) a partir da data da amostra de sangue pré-tratamento Na amostra de sangue do estudo 2: 6 meses (± 2 semanas) a partir da data da amostra de sangue pré-tratamento Na amostra de sangue do estudo 3: 12 meses (± 2 semanas) a partir da data da amostra de sangue pré-tratamento

   - Amostra de sangue no final do estudo: 18 meses (± 2 semanas) a partir da data da amostra de sangue pré-tratamento ou no momento da progressão da doença.

   Amostras de sangue serão processadas para análise de miRNA, que envolve:

1. Lise usando Trizol 2. Isolamento de RNA 3. Avaliação da concentração e integridade do RNA usando espectrofotometria Nanodrop 4. Síntese de cDNA (usando iniciadores de haste-loop específicos de miRNA) 5. Amplificação de PCR e quantificação relativa (usando sondas específicas de miRNA)