N2-(1-carboxyethyl)-2'Deoxyguanosine (CEdG) un biomarqueur potentiel du diabète

L'objectif principal est de répliquer et de valider le test CEdG à utiliser chez des sujets humains. Un test entièrement automatisé pour le CEdG urinaire a été développé. les chercheurs valideront les observations faites dans des modèles animaux diabétiques chez des sujets humains avec et sans diabète sucré de type 2 (T2DM). Plus précisément, les chercheurs étudieront et établiront les coefficients de variabilité inter- et intra-essai chez les sujets humains.

L'objectif secondaire est de déterminer la corrélation entre les niveaux de CEdG et l'hémoglobuline A1c (HbA1c) chez les sujets humains atteints de DT2 et la réponse au traitement du diabète et de définir la relation entre les CEdG et les complications diabétiques. Les chercheurs examineront la relation entre le CEdG et le contrôle glycémique, basé sur l'HbA1c, qui est l'étalon-or actuel, chez les patients atteints de diabète de type 1 et de type 2. Les enquêteurs comparent également les modifications des taux de CEdG et d'Hb1Ac en réponse au traitement du diabète chez les patients diabétiques. La relation entre le CEdG et les complications diabétiques sera également étudiée chez les patients diabétiques.

Considérations statistiques pour l'objectif principal :

Taille de l'échantillon : Parce qu'il y a beaucoup plus de variables chez les sujets humains, les enquêteurs ont calculé la taille de l'échantillon sur la base d'une hypothèse beaucoup plus prudente que ce que les enquêteurs ont observé à partir de modèles animaux diabétiques. Les chercheurs prévoient une étude d'une variable de réponse continue à partir de sujets témoins et expérimentaux indépendants avec 1 témoin par sujet expérimental. Sur la base des données animales, les enquêteurs s'attendent à ce que les résultats au sein de chaque groupe de sujets soient normalement distribués avec un écart type de 0,3. Si la véritable différence de moyenne entre les groupes diabétiques et non diabétiques est de 0,5, les enquêteurs devront étudier 9 sujets diabétiques et 9 sujets non diabétiques pour pouvoir rejeter l'hypothèse nulle selon laquelle la population moyenne des groupes expérimental et témoin sont égaux avec probabilité (puissance) 0,9. La probabilité d'erreur de type I associée à ce test de cette hypothèse nulle est de 0,05. Pour tenir compte d'un taux d'attrition possible de 30 %, les enquêteurs ajouteront 12 sujets diabétiques et 12 sujets non diabétiques à l'étude.

Analyse statistique : L'effet du statut diabétique sur les niveaux urinaires de CEdG sera comparé à l'aide d'un test t de Student. Les différences de variables continues entre les groupes de sujets seront testées avec une ANOVA unidirectionnelle ou le test t de Student, le cas échéant. Les différences de proportions seront évaluées par un test du chi carré. Les variables continues qui échouent au test de normalité seront transformées logarithmiquement avant l'analyse. Pour examiner l'influence des variables confusionnelles, une analyse de régression pas à pas sera utilisée. Une valeur de p inférieure à 0,05 sera considérée comme statistiquement significative.

Selon les directives du NIH pour la validation des méthodes analytiques pour les biomarqueurs utilisés dans le développement de médicaments, pour les petites molécules, les essais bioanalytiques où l'analyse est acceptée comme valide lorsqu'au moins 67 % (4/6) des contrôles de qualité se situent à moins de 15 % de leur valeur nominale. La cohérence de 6 exécutions répétées sera évaluée par le test de Grubbs pour la répétabilité au sein de chaque sujet. La cohérence globale des mesures CEdG peut être quantifiée par la proportion de sujets avec 1+ valeurs aberrantes identifiées parmi les 6 séries répétées. Pour obtenir une estimation de base de la cohérence du test CEdG, les enquêteurs prendront le nombre de ces six mesures qui se situent à moins de 15 % de la moyenne comme notre mesure de résultat. La validation définitive d'un biomarqueur nécessitera des approches d'analyse quantitatives définitives ou quantitatives relatives.

Considérations statistiques pour l'objectif secondaire :

Les chercheurs régresseront les valeurs de y-var (HbA1c) des participants à l'étude par rapport à x-var (CEdG). Les données antérieures indiquent que l'écart type de x-var est de 0,15 et que l'écart type des erreurs de régression sera de 0,15. Si la vraie pente de la ligne obtenue en régressant y-var contre x-var est de 0,3, les enquêteurs devront étudier 89 sujets pour pouvoir rejeter l'hypothèse nulle selon laquelle cette pente est égale à zéro avec une probabilité (puissance) de 0,8. La probabilité d'erreur de type I associée à ce test de cette hypothèse nulle est de 0,05. Par conséquent, 100 sujets seront recrutés pour l'étude afin de tenir compte de l'attrition potentielle des sujets.

Les caractéristiques démographiques et cliniques des patients seront tabulées à l'aide de statistiques de moyenne, d'écart type, de médiane, de plage, de nombre et de pourcentage, le cas échéant. Les données CEdG seront analysées comme une variable continue ou transformée pour le niveau d'expression mesuré. La corrélation univariée entre l'expression du CEdG et chaque mesure clinique quantitative sera évaluée à l'aide de la corrélation de Pearson et de son intervalle de confiance à 95 %. La tendance temporelle des données longitudinales et son interaction possible avec d'autres facteurs de risque seront explorées à l'aide de boîtes à moustaches, de courbes ajustées, de modèles linéaires généralisés et d'équations d'estimation généralisées, le cas échéant. Les corrélations estimées entre les données CEdG et les paramètres cliniques, et ses tendances temporelles possibles au cours de la période de 12 mois fourniront des informations précieuses pour choisir le critère principal et la taille de l'échantillon dans une future étude de corrélation à plus grande échelle.