N2-(1-karboksietyyli)-2'-deoksiguanosiini (CEdG) on mahdollinen diabeteksen biomarkkeri

Ensisijainen tavoite on replikoida ja validoida CEdG-määritys ihmisillä käytettäväksi. Virtsan CEdG:lle on kehitetty täysin automatisoitu määritys. tutkijat validoivat diabeettisissa eläinmalleissa tehdyt havainnot ihmisillä, joilla on tyypin 2 diabetes mellitus (T2DM) tai ei. Erityisesti tutkijat tutkivat ja määrittävät kokeiden väliset ja sisäiset vaihtelukertoimet ihmisillä.

Toissijaisena tavoitteena on määrittää korrelaatio CEdG-tasojen ja hemoglobuliini A1c:n (HbA1c) välillä ihmisillä, joilla on T2DM, ja vaste diabeteksen hoitoon sekä määrittää CEdG:n suhde diabeteksen komplikaatioihin. Tutkijat tutkivat CEdG:n suhdetta glukoositasapainoon perustuen HbA1c:hen, joka on nykyinen kultastandardi, sekä tyypin 1 että tyypin 2 diabetespotilailla. Tutkijat vertailevat myös muutoksia CEdG- ja Hb1Ac-tasoissa vasteena diabeettiseen hoitoon diabeettisilla potilailla. CEdG:n yhteyttä diabeettisiin komplikaatioihin tutkitaan myös diabeetikoilla.

Ensisijaisen tavoitteen tilastolliset näkökohdat:

Näytteen koko: Koska ihmisillä on paljon enemmän muuttujia, tutkijat laskivat otoskoon paljon konservatiivisemman oletuksen perusteella kuin mitä tutkijat havaitsivat diabeettisista eläinmalleista. Tutkijat suunnittelevat jatkuvan vastemuuttujan tutkimusta riippumattomista verrokkeista ja koehenkilöistä 1 kontrollilla koehenkilöä kohden. Eläintietojen perusteella tutkijat odottavat tulosten olevan kunkin kohderyhmän sisällä normaalijakauman keskihajonnan ollessa 0,3. Jos keskiarvon todellinen ero diabeettisten ja ei-diabeettisten ryhmien välillä on 0,5, tutkijoiden on tutkittava 9 diabeetikkoa ja 9 ei-diabeettista koehenkilöä voidakseen hylätä nollahypoteesin, jonka mukaan populaatio tarkoittaa koe- ja kontrolliryhmiä. ovat yhtä suuria todennäköisyydellä (teholla) 0,9. Tämän nollahypoteesin testiin liittyvä tyypin I virhetodennäköisyys on 0,05. Mahdollisen 30 %:n poistumisasteen huomioon ottamiseksi tutkijat keräävät tutkimukseen 12 diabeetikkoa ja 12 ei-diabeettista henkilöä.

Tilastollinen analyysi: Diabeettisen tilan vaikutusta virtsan CEdG-tasoihin verrataan Studentin t-testillä. Koehenkilöryhmien välisten jatkuvien muuttujien erot testataan joko yksisuuntaisella ANOVAlla tai Studentin t-testillä tarvittaessa. Suhteiden erot arvioidaan khin neliötestillä. Jatkuvat muuttujat, jotka eivät läpäise Normaliteettitestiä, muunnetaan logaritmisesti ennen analysointia. Hämmentävien muuttujien vaikutuksen tutkimiseksi käytetään vaiheittaista regressioanalyysiä. P-arvoa alle 0,05 pidetään tilastollisesti merkitsevänä.

Lääkekehityksessä käytettävien biomarkkerien analyyttisten menetelmien validointia koskevien NIH:n ohjeiden mukaan pienille molekyyleille, bioanalyyttisille määrityksille, joissa analyysiajo hyväksytään päteväksi, kun vähintään 67 % (4/6) laatukontrollista on 15 %:n sisällä niiden nimellisarvo. Kuuden toistetun ajon johdonmukaisuus arvioidaan Grubbsin testillä toistettavuuden suhteen kunkin kohteen sisällä. CEdG-mittausten yleinen johdonmukaisuus voidaan kvantifioida niiden koehenkilöiden osuudella, joilla on yli 1 tunnistettu poikkeava arvo kuuden toistetun ajon joukossa. Saadakseen perusarvion CEdG-määrityksen johdonmukaisuudesta tutkijat ottavat tulosmittaksemme niiden kuuden mittauksen määrän, jotka ovat 15 %:n sisällä keskiarvosta. Biomarkkerin lopullinen validointi edellyttää lopullisia kvantitatiivisia tai suhteellisia kvantitatiivisia määritysmenetelmiä.

Toissijaisen tavoitteen tilastolliset näkökohdat:

Tutkijat regressoivat tutkimukseen osallistuneiden y-var (HbA1c) -arvot x-var (CEdG) -arvoja vastaan. Aikaisemmat tiedot osoittavat, että x-var:n keskihajonta on 0,15 ja regressiovirheiden keskihajonta on 0,15. Jos y-varin ja x-muuttujan regressiolla saadun suoran todellinen kaltevuus on 0,3, tutkijoiden on tutkittava 89 koehenkilöä voidakseen hylätä nollahypoteesin, jonka mukaan tämä kulmakerroin on yhtä suuri kuin nolla todennäköisyydellä (potenssilla) 0,8. Tämän nollahypoteesin testiin liittyvä tyypin I virhetodennäköisyys on 0,05. Siksi tutkimukseen rekrytoidaan 100 koehenkilöä, jotta voidaan ottaa huomioon koehenkilöiden mahdollinen poistuminen.

Potilaiden demografiset ja kliiniset ominaisuudet taulukoidaan käyttämällä tilastotietoja keskiarvosta, keskihajonnasta, mediaanista, vaihteluvälistä, lukumäärästä ja prosenttiosuudesta tarvittaessa. CEdG-tiedot analysoidaan jatkuvana tai muunnetuna muuttujana mitatulle ilmentymistasolle. Yksimuuttujakorrelaatio CEdG-ekspression ja kunkin kvantitatiivisen kliinisen mittauksen välillä arvioidaan käyttämällä Pearson-korrelaatiota ja sen 95 %:n luottamusväliä. Pitkittäistietojen aikatrendiä ja sen mahdollista vuorovaikutusta muiden riskitekijöiden kanssa tutkitaan käyttämällä laatikkokaavioita, sovitettuja käyriä, yleistettyjä lineaarisia malleja ja yleistettyjä estimointiyhtälöitä tarvittaessa. Arvioidut korrelaatiot CEdG-tietojen ja kliinisten päätepisteiden välillä sekä sen mahdolliset aikatrendit 12 kuukauden aikana tarjoavat arvokasta tietoa ensisijaisen päätepisteen ja otoskoon valinnassa tulevassa laajemmassa korrelaatiotutkimuksessa.