N2-(1-karboxietyl)-2'deoxiguanosin (CEdG) en potentiell biomarkör för diabetes

Primärt mål är att replikera och validera CEdG-analysen som ska användas i människor. En helt automatiserad analys för urin-CEdG har utvecklats. utredarna kommer att validera de observationer som gjorts i diabetiska djurmodeller hos människor med och utan typ 2-diabetes mellitus (T2DM). Specifikt kommer utredarna att undersöka och fastställa inter- och intra-analyskoefficienterna för variabilitet hos människor.

Sekundärt mål är att fastställa korrelationen mellan CEdG-nivåer och hemoglobulin A1c (HbA1c) hos människor med T2DM och svaret på diabetesbehandling och att definiera sambandet mellan CEdG och diabetiska komplikationer. Utredarna kommer att undersöka sambandet mellan CEdG och glykemisk kontroll, baserat på HbA1c, som är den nuvarande guldstandarden, hos både patienter med typ 1- och typ 2-diabetes. Utredarna jämför också förändringarna i CEdG- och Hb1Ac-nivåer som svar på diabetesbehandling hos diabetespatienter. Förhållandet mellan CEdG och diabeteskomplikationer kommer också att undersökas hos diabetespatienter.

Statistiska överväganden för det primära målet:

Provstorlek: Eftersom det finns många fler variabler i mänskliga försökspersoner, beräknade forskarna provstorleken baserat på ett mycket mer konservativt antagande än vad utredarna observerade från diabetiska djurmodeller. Utredarna planerar en studie av en kontinuerlig responsvariabel från oberoende kontroll- och försökspersoner med 1 kontroll per försöksperson. Baserat på djurdata förväntar sig forskarna att resultaten inom varje ämnesgrupp är normalfördelade med en standardavvikelse på 0,3. Om den sanna skillnaden i medelvärdet mellan diabetiker och icke-diabetiker är 0,5, kommer forskarna att behöva studera 9 diabetiker och 9 icke-diabetiker för att kunna förkasta nollhypotesen att populationen betyder för experiment- och kontrollgrupperna är lika med sannolikhet (potens) 0,9. Sannolikheten för typ I-fel associerad med detta test av denna nollhypotes är 0,05. För att ta hänsyn till en möjlig utslitningsgrad på 30 %, kommer utredarna att samla in 12 diabetiker och 12 icke-diabetiker till studien.

Statistisk analys: Effekten av diabetesstatus på CEdG-nivåer i urin kommer att jämföras med hjälp av ett Students t-test. Skillnader i kontinuerliga variabler mellan grupperna av ämnen kommer att testas med antingen envägs ANOVA eller Students t-test när så är lämpligt. Skillnader i proportioner kommer att utvärderas genom ett chi-kvadrattest. De kontinuerliga variablerna som inte klarar normalitetstestet kommer att transformeras logaritmiskt före analys. För att undersöka påverkan av störande variabler kommer en stegvis regressionsanalys att användas. Ett p-värde mindre än 0,05 kommer att betraktas som statistiskt signifikant.

Enligt NIH:s riktlinjer för validering av analysmetoder för biomarkörer som används vid läkemedelsutveckling, för små molekyler, bioanalytiska analyser där analyskörningen accepteras som giltig när minst 67 % (4/6) av kvalitetskontrollerna faller inom 15 % av deras nominella värde. Konsistensen av 6 upprepade körningar kommer att utvärderas med Grubbs test för repeterbarhet inom varje ämne. Den övergripande konsekvensen av CEdG-mått kan kvantifieras genom andelen försökspersoner med 1+ identifierade extremvärden bland de 6 upprepade körningarna. För att få en baslinjeuppskattning av konsistensen av CEdG-analysen kommer utredarna att ta antalet av dessa sex mätningar som faller inom 15 % av medelvärdet som vårt resultatmått. Definitiv validering av en biomarkör kommer att kräva definitiva kvantitativa eller relativa kvantitativa analysmetoder.

Statistiska överväganden för det sekundära målet:

Utredarna kommer att regressera studiedeltagarnas värden på y-var (HbA1c) mot x-var (CEdG). Tidigare data indikerar att standardavvikelsen för x-var är 0,15 och standardavvikelsen för regressionsfelen kommer att vara 0,15. Om den sanna lutningen av linjen som erhålls genom att regressera y-var mot x-var är 0,3, kommer forskarna att behöva studera 89 försökspersoner för att kunna förkasta nollhypotesen att denna lutning är lika med noll med sannolikhet (potens) 0,8. Sannolikheten för typ I-fel associerad med detta test av denna nollhypotes är 0,05. Därför kommer 100 försökspersoner att rekryteras till studien för att ta hänsyn till potentiell förslitning av försökspersoner.

Patientdemografiska och klinikegenskaper kommer att tabuleras med hjälp av statistik över medelvärde, standardavvikelse, median, intervall, antal och procent när så är lämpligt. CEdG-data kommer att analyseras som en kontinuerlig eller transformerad variabel för den uppmätta uttrycksnivån. Den univariata korrelationen mellan CEdG-uttrycket och varje kvantitativt kliniskt mått kommer att utvärderas med Pearson-korrelation och dess 95 % konfidensintervall. Tidstrenden i longitudinella data och dess möjliga interaktion med andra riskfaktorer kommer att undersökas med hjälp av boxplots, anpassade kurvor, generaliserade linjära modeller och generaliserade skattningsekvationer som är lämpligt. Uppskattade korrelationer mellan CEdG-data och kliniska endpoints och dess möjliga tidstrender under 12-månadersperioden kommer att ge värdefull information för att välja primär endpoint och urvalsstorlek i en framtida större korrelationsstudie.