N2-(1-karboxi-etil)-2'-dezoxiguanozin (CEdG) a cukorbetegség lehetséges biomarkere

Elsődleges cél a CEdG-teszt megismétlése és validálása emberi alanyoknál. Kifejlesztettek egy teljesen automatizált vizelet CEdG vizsgálatot. a kutatók validálni fogják a 2-es típusú diabetes mellitusban (T2DM) szenvedő és nem szenvedő humán alanyokon végzett diabéteszes állatmodelleken végzett megfigyeléseket. Pontosabban, a vizsgálók megvizsgálják és megállapítják az inter- és intra-assay variabilitási együtthatókat humán alanyokban.

Másodlagos cél a CEdG szint és a hemoglobulin A1c (HbA1c) közötti összefüggés meghatározása T2DM-ben szenvedő humán alanyokban és a diabéteszes kezelésre adott válasz között, valamint a CEdG és a diabéteszes szövődmények közötti kapcsolat meghatározása. A kutatók megvizsgálják a CEdG és a glikémiás kontroll közötti kapcsolatot a HbA1c alapján, amely jelenleg az aranystandard, mind 1-es, mind 2-es típusú cukorbetegségben szenvedő betegeknél. A kutatók összehasonlítják a CEdG- és Hb1Ac-szint változásait is a diabéteszes betegeknél a diabéteszes kezelés hatására. A CEdG és a diabéteszes szövődmények kapcsolatát cukorbetegeknél is vizsgáljuk.

Statisztikai szempontok az elsődleges célhoz:

Mintanagyság: Mivel az emberi alanyoknál sokkal több változó van, a kutatók sokkal konzervatívabb feltevés alapján számították ki a minta méretét, mint amit a kutatók a cukorbeteg állatmodellek során megfigyeltek. A kutatók független kontroll és kísérleti alanyok folyamatos válaszváltozójának vizsgálatát tervezik, kísérleti alanyonként 1 kontrollal. Az állatok adatai alapján a vizsgálók arra számítanak, hogy az egyes alanycsoportokon belül az eredmények normális eloszlásúak, 0,3 szórással. Ha a cukorbeteg és a nem cukorbeteg csoportok átlagának valódi különbsége 0,5, akkor a kutatóknak 9 cukorbeteg és 9 nem cukorbeteg alanyt kell megvizsgálniuk, hogy el tudják utasítani azt a nullhipotézist, amely szerint a populáció átlaga a kísérleti és a kontrollcsoportban. egyenlők 0,9 valószínűséggel (hatékonysággal). Ennek a nullhipotézisnek a tesztjéhez kapcsolódó I. típusú hiba valószínűsége 0,05. A lehetséges 30%-os lemorzsolódási arány figyelembevétele érdekében a vizsgálók 12 cukorbeteg és 12 nem cukorbeteg alanyt vonnak be a vizsgálatba.

Statisztikai elemzés: A diabéteszes állapotnak a vizelet CEdG-szintjére gyakorolt ​​hatását Student-féle t-teszttel hasonlítjuk össze. A folytonos változók közötti különbségeket az alanyok csoportjai között egyirányú ANOVA vagy Student-féle t-teszt segítségével teszteljük, ha szükséges. Az aránybeli különbségeket khi-négyzet teszttel értékeljük. Azokat a folytonos változókat, amelyek nem teljesítik a Normalitás tesztet, az elemzés előtt logaritmikusan transzformáljuk. A zavaró változók hatásának vizsgálatához lépcsőzetes regressziós elemzést alkalmazunk. A 0,05-nél kisebb p értéket statisztikailag szignifikánsnak tekintjük.

A NIH iránymutatásai szerint a gyógyszerfejlesztésben használt biomarkerek analitikai módszereinek validálására, kis molekulákra, bioanalitikai vizsgálatokra, ahol az analitikai futtatást akkor fogadják el érvényesnek, ha a minőségellenőrzések legalább 67%-a (4/6) a minőségellenőrzések 15%-án belülre esik. névértékük. A 6 ismételt futtatás konzisztenciáját Grubbs-teszttel értékelik az egyes alanyokon belüli megismételhetőség szempontjából. A CEdG mérések általános konzisztenciája számszerűsíthető az 1+ azonosított kiugró értékkel rendelkező alanyok arányával a 6 ismételt futtatás között. A CEdG-teszt konzisztenciájának kiindulási becsléséhez a vizsgálók annak a hat mérésnek a számát veszik alapul, amelyek az átlag 15%-án belül vannak. A biomarker végleges validálásához végleges kvantitatív vagy relatív kvantitatív vizsgálati megközelítésre van szükség.

Statisztikai szempontok a másodlagos célkitűzéshez:

A kutatók a vizsgálatban résztvevők y-var (HbA1c) értékeit az x-var (CEdG) ellenében regresszióba vonják. A korábbi adatok szerint az x-var szórása 0,15, a regressziós hibák szórása pedig 0,15 lesz. Ha az y-var és az x-var regressziójával kapott egyenes valódi meredeksége 0,3, akkor a kutatóknak 89 alanyt kell megvizsgálniuk ahhoz, hogy el tudják utasítani azt a nullhipotézist, hogy ez a meredekség nullával egyenlő 0,8 valószínűséggel (hatékonysággal). Ennek a nullhipotézisnek a tesztjéhez kapcsolódó I. típusú hiba valószínűsége 0,05. Ezért 100 alanyt vesznek fel a vizsgálatba, hogy figyelembe vegyék az alanyok potenciális lemorzsolódását.

A betegek demográfiai és klinikai jellemzőit táblázatba foglaljuk az átlag, a szórás, a medián, a tartomány, a szám és a százalékos statisztikák felhasználásával, ha szükséges. A CEdG adatokat a mért expressziós szint folytonos vagy transzformált változójaként elemezzük. A CEdG-expresszió és az egyes kvantitatív klinikai mérőszámok közötti egyváltozós korrelációt Pearson-korreláció és annak 95%-os konfidencia intervallumának felhasználásával értékeljük. A longitudinális adatok időbeli trendjét és más kockázati tényezőkkel való lehetséges kölcsönhatásait boxplot-ok, illesztett görbék, általánosított lineáris modellek és általánosított becslési egyenletek segítségével vizsgáljuk meg. A CEdG adatok és a klinikai végpontok közötti becsült korrelációk, valamint annak lehetséges időbeli trendjei a 12 hónapos időszak során értékes információkkal szolgálnak az elsődleges végpont és a mintanagyság kiválasztásához egy jövőbeni nagyobb léptékű korrelációs vizsgálat során.