N2-(1-karboksyetyl)-2'deoksyguanosin (CEdG) en potensiell biomarkør for diabetes

Primært mål er å replikere og validere CEdG-analysen som skal brukes i mennesker. En helautomatisk analyse for urin-CEdG er utviklet. etterforskerne vil validere observasjonene gjort i diabetiske dyremodeller hos mennesker med og uten type 2 diabetes mellitus (T2DM). Spesifikt vil etterforskerne undersøke og etablere inter- og intra-analyse-koeffisientene for variasjon hos mennesker.

Sekundært mål er å bestemme korrelasjonen mellom CEdG-nivåer og hemoglobulin A1c (HbA1c) hos mennesker med T2DM og responsen på diabetesbehandling og å definere forholdet mellom CEdG og diabetiske komplikasjoner. Etterforskerne vil undersøke forholdet mellom CEdG og glykemisk kontroll, basert på HbA1c, som er gjeldende gullstandard, både hos pasienter med type 1 og type 2 diabetes. Etterforskerne sammenligner også endringene i CEdG- og Hb1Ac-nivåer som respons på diabetesbehandling hos diabetespasienter. Forholdet mellom CEdG og diabetiske komplikasjoner vil også bli undersøkt hos diabetespasienter.

Statistiske betraktninger for hovedmålet:

Prøvestørrelse: Fordi det er mange flere variabler i menneskelige forsøkspersoner, beregnet etterforskerne prøvestørrelsen basert på en mye mer konservativ antagelse enn det etterforskerne observerte fra diabetiske dyremodeller. Etterforskerne planlegger en studie av en kontinuerlig responsvariabel fra uavhengige kontroll- og forsøkspersoner med 1 kontroll per forsøksperson. Basert på dyredataene forventer etterforskerne at resultatene innenfor hver faggruppe er normalfordelt med et standardavvik på 0,3. Hvis den sanne forskjellen i gjennomsnittet mellom diabetiker- og ikke-diabetikergruppene er 0,5, vil etterforskerne måtte studere 9 diabetikere og 9 ikke-diabetikere for å kunne avvise nullhypotesen om at populasjonen mener forsøks- og kontrollgruppene. er like med sannsynlighet (potens) 0,9. Type I feilsannsynligheten knyttet til denne testen av denne nullhypotesen er 0,05. For å ta høyde for en mulig utmattelsesrate på 30 %, vil etterforskerne samle 12 diabetikere og 12 ikke-diabetikere til studien.

Statistisk analyse: Effekten av diabetesstatus på CEdG-nivåer i urin vil bli sammenlignet med en Students t-test. Forskjeller i kontinuerlige variabler mellom faggruppene vil bli testet med enten enveis ANOVA eller Students t-test når det er hensiktsmessig. Forskjeller i proporsjoner vil bli evaluert ved en kjikvadrattest. De kontinuerlige variablene som ikke klarer normalitetstesten, vil bli logaritmisk transformert før analyse. For å undersøke påvirkningen av konfunderende variabler vil en trinnvis regresjonsanalyse bli brukt. En p-verdi mindre enn 0,05 vil bli ansett som statistisk signifikant.

I henhold til NIHs retningslinjer for validering av analysemetoder for biomarkører brukt i legemiddelutvikling, for små molekyler, bioanalytiske analyser hvor analysekjøringen er akseptert som gyldig når minst 67 % (4/6) av kvalitetskontrollene faller innenfor 15 % av deres nominelle verdi. Konsistensen av 6 gjentatte kjøringer vil bli evaluert av Grubbs test for repeterbarhet innen hvert emne. Den generelle konsistensen av CEdG-tiltak kan kvantifiseres ved andelen forsøkspersoner med 1+ identifiserte uteliggere blant de 6 gjentatte kjøringene. For å få et grunnlinjeestimat av konsistensen til CEdG-analysen, vil etterforskerne ta antallet av de seks målingene som faller innenfor 15 % av gjennomsnittet som vårt resultatmål. Definitiv validering av en biomarkør vil kreve definitive kvantitative eller relative kvantitative analysemetoder.

Statistiske betraktninger for sekundærmålet:

Etterforskerne vil regressere studiedeltakernes verdier av y-var (HbA1c) mot x-var (CEdG). Tidligere data indikerer at standardavviket til x-var er 0,15 og standardavviket for regresjonsfeilene vil være 0,15. Hvis den sanne helningen til linjen oppnådd ved å regresjonere y-var mot x-var er 0,3, må etterforskerne studere 89 forsøkspersoner for å kunne avvise nullhypotesen om at denne helningen er lik null med sannsynlighet (potens) 0,8. Type I feilsannsynligheten knyttet til denne testen av denne nullhypotesen er 0,05. Derfor vil 100 forsøkspersoner bli rekruttert til studien for å redegjøre for potensiell avgang av emner.

Pasientdemografiske og klinikkegenskaper vil bli tabellert ved hjelp av statistikk over gjennomsnitt, standardavvik, median, rekkevidde, antall og prosentandel når det er hensiktsmessig. CEdG-data vil bli analysert som en kontinuerlig eller transformert variabel for det målte uttrykksnivået. Den univariate korrelasjonen mellom CEdG-uttrykket og hvert kvantitativt klinisk mål vil bli evaluert ved å bruke Pearson-korrelasjon og dets 95 % konfidensintervall. Tidstrenden i longitudinelle data og dens mulige interaksjon med andre risikofaktorer vil bli utforsket ved å bruke boksplott, tilpassede kurver, generaliserte lineære modeller og generaliserte estimeringsligninger etter behov. Estimerte korrelasjoner mellom CEdG-data og kliniske endepunkter, og mulige tidstrender i løpet av 12-månedersperioden, vil gi verdifull informasjon for valg av primær endepunkt og prøvestørrelse i en fremtidig større skala korrelasjonsstudie.