La respiration yogique modifie les composants salivaires

A. OBJECTIFS SPECIFIQUES

SA1 : Obtenir une estimation préliminaire de la mesure dans laquelle un exercice de chant structuré stimule la sécrétion salivaire qui contient des quantités quantifiables de NGF chez des sujets sains.

SA2 : Obtenir une estimation préliminaire de la mesure dans laquelle un exercice de respiration structuré stimule la sécrétion salivaire qui contient des quantités quantifiables de NGF chez des sujets sains.

B. CONTEXTE ET IMPORTANCE CONTEXTE Maladies neurodégénératives Les maladies neurodégénératives telles que la maladie d'Alzheimer sont un problème de santé majeur à l'échelle mondiale. Aux États-Unis, la MA est la 6e cause de décès. Des facteurs génétiques et non génétiques contribuent au développement de la MA. Les personnes atteintes de la MA ont besoin de soutiens allant des médicaments, des appareils d'assistance et des soins personnels qui représentent un énorme fardeau émotionnel et financier. La MA est associée à des altérations importantes au niveau moléculaire qui se traduisent éventuellement par un dysfonctionnement cellulaire, tissulaire, organique et systémique. Par conséquent, la thérapie moléculaire qui modifie les fonctions cellulaires a été une option clinique majeure pour le traitement de la MA. Par exemple, le NGF, un facteur trophique impliqué dans le développement, le maintien et la survie du système nerveux périphérique et des neurones cholinergiques du système nerveux central, montre une réduction significative chez les sujets AD. La réduction du NGF entraîne une baisse significative des fonctions cognitives. Par conséquent, l'administration de NGF est suivie comme une option clinique viable pour les sujets AD. En plus de ces options thérapeutiques, des modes de traitement non pharmacologiques tels que la méditation et le yoga ont été considérés comme des approches alternatives pour traiter la MA. Ces pratiques et modes de vie sont profondément enracinés dans plusieurs cultures anciennes. Ce projet est basé sur deux pratiques de santé de style de vie de l'ancienne culture tamoule.

NGF Le facteur de croissance nerveuse (NGF) est une protéine neurotrophique (MW = 13 kDa). Le NGF est produit par chaque tissu/organe qui est innervé par des afférences sensorielles et/ou des efférents sympathiques, ainsi que par le système nerveux central (CNS) et périphérique (PNS) et les cellules immunitaires. Le NGF est important pour l'intégrité fonctionnelle des neurones cholinergiques dans le SNC et pour le développement et l'intégrité fonctionnelle des neurones dans le SNP. Le NGF est un facteur de survie, de différenciation et de trophicité des cellules du système immunitaire et d'origine épithéliale. Les glandes salivaires (sous-maxillaires/sous-maxillaires) produisent une grande quantité de NGF chez l'homme et la souris. Le NGF produit à partir des glandes sous-maxillaires de souris est utilisé dans plusieurs essais cliniques. Dans le SNC, le NGF est produit dans le cortex, l'hippocampe et l'hypophyse ; et également dans d'autres domaines, y compris les ganglions de la base, le thalamus, la moelle épinière et dans la rétine. Le NGF se lie à son récepteur TrkA et active les voies mitogènes MAPK, PI3K/Akt et PLC-gamma pour assurer la croissance, la différenciation et la survie des cellules. La survie médiée par le NGF est importante pour les neurones cholinergiques du complexe basal du cerveau antérieur (BFC). Ces neurones contribuent à la conscience, à la mémoire, à l'attention et à l'éveil. Les neurones BFC sont fortement affectés dans les maladies neurodégénératives telles que la MA. Le NGF protège les neurones BFC dans les modèles de traumatismes expérimentaux et dans le déclin cholinergique associé à l'âge. En raison des effets positifs du NGF dans de multiples systèmes, le développement du NGF en tant que médicament est activement poursuivi pour le traitement de la neurodégénérescence, de la dérégulation immunitaire, de l'inflammation chronique et des maladies auto-immunes. Cependant, jusqu'à récemment, les essais cliniques avec le NGF ont été sans grand succès en raison de l'hyperalgésie. Des études récentes montrent que la thérapie génique, les voies nasales et oculaires d'administration du NGF sont efficaces avec beaucoup moins d'effets secondaires nociceptifs. De plus, une découverte récente selon laquelle la modification chimique du NGF réduit la douleur est considérée comme une nouvelle direction dans la thérapie par le NGF. Un essai clinique de phase II évaluant les effets bénéfiques de l'expression du NGF médiée par un virus adéno-associé dans les neurones cholinergiques du cerveau est en cours au MUSC et implique le co-investigateur de ce projet, le Dr Jacobo Mintzer.

Le NGF est prélevé des organes cibles par les neurones innervants et transporté vers le corps axonal par transport axonal rétrograde. Les chercheurs ont utilisé du NGF marqué par des points quantiques pour montrer que chaque dimère de NGF est conditionné dans des endosomes individuels pendant le transport rétrograde. Transport axonal rétrograde des signaux NGF pour la survie, la différenciation et le maintien des neurones sympathiques et sensoriels périphériques et des neurones cholinergiques du prosencéphale basal. La toxine botulique suit une voie rétrograde pour atteindre les neurones centraux. De plus, il a été récemment confirmé que les neurotoxines botuliques A et E atteignent les sites distaux du système nerveux via un transport rétrograde à longue distance via les motoneurones et ont suggéré que ce mécanisme pourrait également être courant pour la dissémination d'autres facteurs neurotrophiques. Cela pourrait expliquer pourquoi l'application intranasale de NGF est considérée comme efficace pour la thérapie par NGF. De plus, la voie d'absorption sublinguale qui contourne la voie gastro-intestinale est utilisée pour l'application de nitroglycérine et d'autres agents psychoactifs. Ainsi, notre raisonnement selon lequel le NGF produit par les glandes salivaires est absorbé par 1) les neurones sensoriels et moteurs innervants pour le transport axonal rétrograde vers le corps cellulaire et la transcytose pour atteindre les neurones centraux, et 2) la voie d'absorption sublinguale dans la circulation sanguine pour atteindre d'autres organes cibles distaux s'inscrit bien dans le cadre théorique des mécanismes de production et de transport établis pour les neuromodulateurs. Il convient de souligner ici que cette proposition est la toute première tentative de stimulation du NGF par des procédés non invasifs.

Le chant Le chant et le chant sont deux anciennes pratiques culturelles de l'histoire humaine. Des preuves récentes suggèrent que ces deux pratiques peuvent réguler la respiration. Le symbole sonore Om (Figure 2) est appelé la clé à une lettre de la vie heureuse. Om est un préfixe bien connu dans plusieurs chants à travers les religions orientales. Chanting Om est censé être associé au bien-être physique et émotionnel. Chanter Om augmente la résistance vasculaire périphérique cutanée, ce qui est un signe de vigilance mentale accrue même en étant physiologiquement détendu. Chez environ 40% des sujets Alzheimer, le potentiel évoqué auditif de latence moyenne (MLAEP) fait défaut. Il a été démontré que chanter Om améliore la MLAEP chez les sujets normaux après avoir chanté, ce qui suggère qu'un effet similaire pourrait être observé chez les sujets AD. La stimulation du nerf vague (VNS) a été bénéfique chez les sujets AD car elle améliore les fonctions cognitives. Les impulsions électriques pour VNS ont montré la désactivation des régions limbiques du cerveau. Chanter Om a également provoqué une désactivation similaire des régions cérébrales limbiques, de l'amygdale, de l'hippocampe, du gyrus parahippocampique, de l'insula, des cortex orbitofrontal et cingulaire antérieur et du thalamus. Les effets neurophysiologiques du chant Om pourraient être médiés par les branches auriculaires des nerfs vagaux. Cependant, on ne sait pas si des changements moléculaires spécifiques, en termes de facteurs neurotrophiques comme le NGF, se produisent après le chant Om.

Exercice de respiration L'exercice de respiration est une façon active de réguler la respiration. La fréquence respiratoire courante est de 15 fois par minute chez l'homme adulte normal. Cette fréquence change avec l'âge et l'état physiologique. Chez les sujets souffrant d'insuffisance cardiaque, Bernardi et al ont montré que le ralentissement de la respiration était bénéfique. Des exercices tels que le yoga, le chant et les exercices de respiration régulent les fonctions respiratoires et cognitives. L'un des textes anciens faisant référence aux bienfaits de l'exercice respiratoire est Thirumanthiram écrit par le sage tamoul Thirumoolar dont les textes sont connus pour leurs pratiques de santé et de longévité. On pense que l'exercice de respiration produit des cycles d'états d'oxygénation et de non-oxygénation comme moyen de préconditionnement ischémique. Le préconditionnement ischémique à distance, c'est-à-dire l'induction de courtes périodes d'ischémie dans un organe distant, offre une protection contre une agression ischémique ultérieure. L'apnée augmente le tonus vagal, augmente la dominance parasympathique et diminue les décharges sympathiques. La respiration régulée conduit à une prédominance de la respiration abdominale/diaphragmatique. Ainsi, l'exercice de respiration pourrait être un moyen potentiel d'induire un préconditionnement ischémique dans les neurones. Il est connu dans le cerveau et le cœur que le préconditionnement ischémique est bénéfique pour éviter de futurs événements ischémiques majeurs en produisant une signalisation de survie cellulaire. Fait intéressant, le NGF est une molécule de signalisation de survie cellulaire. Par conséquent, il est concevable que l'exercice de respiration induit la survie cellulaire dans les cellules du système nerveux central et périphérique via les actions du NGF.

La salive comme biomarqueur Un être humain normal produit environ 0,75 à 1,5 L de salive par jour. La salive contient de nombreuses molécules biologiquement actives, notamment des protéines, des peptides, des ARNm, de l'ADN et des miARN d'origine microbienne humaine et orale. La sécrétion salivaire régule les systèmes digestif, nerveux, immunitaire et respiratoire. Par exemple, 1) le facteur de croissance nerveuse (NGF), la substance P et le peptide lié au gène de la calcitonine (CGRP) sont sécrétés dans la salive en réponse à la migraine chronique, et 2) l'opiorphine, un puissant agent anti-nociceptif, est exprimée dans la salive. La protéomique salivaire et le profilage de l'ARNm ont identifié des différences significatives entre les sujets témoins et les sujets cancéreux. Ces études indiquent que la salive sert de source de biomarqueurs dans le diagnostic et le pronostic d'un certain nombre de conditions pathologiques, y compris la maladie d'Alzheimer.

IMPORTANCE Les maladies neurodégénératives telles que la MA constituent un problème de santé mondial majeur. Des pratiques non pharmacologiques et non invasives pourraient altérer les fonctions neurologiques dans des contextes normaux et pathologiques. La sécrétion salivaire des facteurs neurotrophiques indique que la salive pourrait être une source potentielle et un biomarqueur des facteurs neurotrophiques. Par conséquent, l'estimation du NGF salivaire pourrait être un outil de diagnostic et de pronostic dans la MA. L'ancienne culture tamoule a conservé des pratiques pour maintenir un état psychologique et physiologique sain. Le chant et les exercices de respiration sont connus pour favoriser la sécrétion salivaire. Cependant, il n'est pas entièrement compris si de telles pratiques induisent l'expression de facteurs neurologiques dans la salive. Notre objectif est de quantifier le NGF salivaire en réponse au chant et à l'exercice de respiration chez des sujets humains normaux. Cela établira une relation jusqu'ici non rapportée entre les signaux tactiles et respiratoires de la langue pour la sécrétion salivaire de NGF, et ses effets sur le système nerveux. Notre projet quantifiera le facteur neurotrophique candidat NGF dans la salive à la base, pendant et après l'exercice. Dans de futures études, nous utiliserons des approches protéomiques, peptidiques et génomiques pour identifier d'autres facteurs neurotrophiques régulés dans la salive par ces exercices. Nos résultats introduiront un nouveau paradigme dans le traitement et les soins des personnes atteintes ou sujettes à la MA et à d'autres maladies neurodégénératives.

Impact clinique et translationnel : étant donné que la MA, le vieillissement et d'autres troubles neurodégénératifs sont associés à une diminution de la production de facteurs neurotrophiques (par ex. NGF), et que le NGF est activement poursuivi en tant que médicament dans les essais cliniques, nos découvertes selon lesquelles le NGF pourrait être stimulé in situ par des pratiques ethniques simples et non invasives auront une forte application clinique. De futures études utilisant des approches génomiques et protéomiques identifieront des facteurs neurotrophiques supplémentaires dans la salive qui pourraient potentiellement être des cibles médicamenteuses pour traiter la MA et d'autres maladies neurodégénératives.

C. ETUDES PRELIMINAIRES Néant. D. CONCEPTION ET MÉTHODES DE RECHERCHE Sujets humains

Un total de 20 volontaires (hommes ou femmes), âgés de 18 ans et plus seront inclus dans l'étude. Voici une liste des conditions d'exclusion :

• problèmes respiratoires (incapacité à respirer par les narines, bronchite chronique, emphysème et asthme)
• problèmes d'élocution qui empêcheraient de chanter
• incapacité d'écouter et de suivre les instructions d'exercice
• congestion des sinus
• le syndrome de Sjogren
• bouche sèche chronique due à des médicaments ou à d'autres conditions
• utilisation de médicaments anti-cholinergiques Un consentement éclairé sera obtenu de chaque sujet après avoir décrit complètement l'étude.

Recrutement de sujets humains Une fois que nous aurons obtenu l'approbation de l'IRB, nous recruterons 20 sujets requis pour cette étude en publiant une annonce dans les ascenseurs du MUSC et dans les centres de yoga à proximité. Les participants intéressés contacteront le PI au numéro de téléphone indiqué. L'éligibilité des sujets sera évaluée par le PI sur la base des questions données dans le questionnaire. Le PI et le participant conviendront d'une heure de rendez-vous. Le participant se rendra au laboratoire du PI au bâtiment Strom Thurmond (STB, salle 222). Cette salle de réunion est située au même étage que le laboratoire de recherche du PI. Nous avons choisi cette salle pour son atmosphère calme sans aucune interférence par d'autres membres du personnel du laboratoire pendant le protocole. Cette salle est réservée via le Gazes Cardiac Research Institute Lab Manager, et est librement disponible pour le PI. À son arrivée, le PI expliquera l'étude au sujet et obtiendra son consentement à l'aide du formulaire de consentement. Le chercheur principal signera et datera également le formulaire de consentement et en remettra une copie au participant. Le sujet remplira ensuite le questionnaire pour confirmer son éligibilité.

Les sujets inscrits et consentants seront randomisés dans l'une des 2 conditions (le bras "Chant/Respiration" (CB) par rapport au bras "Contrôle". La randomisation sera menée en collaboration avec un biostatisticien et se fera de manière stratifiée (c'est-à-dire par sexe), pour assurer une répartition égale entre les sexes dans les 2 groupes expérimentaux (CB vs. Contrôle). Le biostatisticien fournira au chercheur principal des enveloppes contenant le numéro d'identification de l'étude et l'assignation au groupe aléatoire (c'est-à-dire CB vs Contrôle). Chaque enveloppe ne sera ouverte qu'après que l'éligibilité à l'étude aura été établie et que le consentement aura été obtenu.

Avant l'exercice et la collecte d'échantillons, le PI enseignera à chaque sujet comment effectuer des exercices de chant et de respiration. Chaque sujet sera testé individuellement en raison de la facilité de collecte des échantillons et pour éviter toute variabilité qui pourrait survenir dans la stimulation neuronale chez les sujets en présence d'individus autres que les chercheurs.

Chant, exercice de respiration et collecte de spécimens Les sujets recevront une introduction au chant et à l'exercice de respiration. En tant que praticien d'exercices de chant/yoga/respiration, le PI fournira cette formation, qui ne devrait pas prendre plus de 5 minutes à apprendre. Le plan de collecte d'échantillons de salive entière est illustré à la figure 3. Les échantillons salivaires seront collectés une fois au début du protocole (temps 0) pendant que les sujets sont assis. La salive pourra naturellement s'accumuler dans la cavité buccale et le participant la déchargera dans le tube à échantillon (capacité de 5 ml) avec couvercle.

Chanter Om (C):

Les sujets chanteront alors Om comme suit :

1. Forte inspiration profonde par les narines
2. Expirez lentement par la bouche en chantant Om. À cette étape, les sujets effectueront une expiration lente et complète.

Ces deux étapes sont répétées en continu pendant 10 min les yeux fermés.

Exercice de respiration (BE):

Après le chant, les sujets effectueront l'exercice de respiration comme suit, selon les instructions du PI basé sur Thirumanthiram :

1. Vérifiez laquelle des deux narines présente une libre circulation de l'air. À des fins d'explication, la narine à circulation d'air libre est traitée comme la narine 1 et l'autre comme la narine 2.
2. Fermez la narine 2 et inspirez profondément par la narine 1, puis fermez les deux narines afin qu'aucun air inhalé ne s'échappe. L'air ne doit pas non plus s'échapper par la bouche. Cette étape d'inhalation devrait prendre environ 4 secondes.
3. Retenez votre souffle dans cette position pendant environ 16 secondes.
4. Ouvrez la narine 2 et expirez pendant environ 8 secondes. Une expiration complète est requise. L'abdomen se courbera lentement lorsque le sujet expirera. Ceci est normal et encouragé. Aucun air ne doit fuir par la narine 1 ou la bouche.
5. Passez à l'étape a). Au cours de l'exercice, si la cavité buccale accumule de la salive, le sujet peut l'avaler à la fin de l'étape d'expiration (étape d). Les sujets effectueront un exercice de respiration pendant 10 min. Des échantillons salivaires seront prélevés à 5 et 10 minutes d'exercice respiratoire dans des tubes étiquetés BE-1, BE-2. Ainsi, chaque individu fournira les cinq échantillons de salive suivants : + (Temps 0), Om chantant (C-1 et C2) et Exercice de respiration (BE-1 et BE-2).

Groupe témoin Dans le cas du groupe témoin, les sujets resteront assis tranquillement pendant la même durée que le groupe CB. Des échantillons de salive seront prélevés aux mêmes moments (à des intervalles de 5 min pendant 20 min) que le groupe CB.

Le temps total approximatif pour l'ensemble du protocole sera le suivant :

Introduction et questionnaire - 10 minutes Instruction pour le chant, l'exercice de respiration (groupe CB) ou s'asseoir tranquillement (groupe témoin) et prélèvement d'échantillon salivaire - 10 minutes (groupe CB) ou 5 minutes (groupe témoin) Prélèvement d'échantillon basal - 1 minute Om Chanting - 10 minutes Exercice de respiration - 10 minutes Toute autre question du sujet - 2-3 minutes Durée totale du rendez-vous pour un sujet = environ 45 minutes (groupe CB) 40 minutes (groupe témoin) Pour le temps des participants à l'étude et tout inconvénient, une compensation monétaire qui seront fournis.

Traitement des échantillons Placer les échantillons de salive collectés sur de la glace. En utilisant des techniques stériles, transférer la salive dans des tubes à centrifuger tout en mesurant la quantité de chaque échantillon. Le nombre d'échantillons prélevés sur chaque échantillon à chaque étape de l'expérience peut varier. Traiter les échantillons de tubes individuels séparément sans regrouper aucun échantillon. Calculez le volume total de salive pendant la phase de repos normale, pendant le chant et pendant l'exercice de respiration. Stocker les échantillons à -80 degrés C jusqu'à l'analyse. Les échantillons seront jetés après l'analyse des données.

Immunoessai enzymatique Quantifier les niveaux de NGF dans chaque échantillon par immunoessai enzymatique à l'aide de kits commerciaux selon les instructions du fabricant (Promega). Tous les réactifs nécessaires à la réalisation de l'expérience ELISA sont fournis dans le kit. Des réactifs supplémentaires, le cas échéant, et le lecteur ELISA sont à la disposition du PI au STB Room 511.

Gestion des données Toutes les données de l'étude recueillies auprès des participants par le PI seront entrées dans une base de données REDCap, développée avec l'aide du biostatisticien du projet. REDCap (Research Electronic Data Capture) est un ensemble d'outils logiciels et une méthodologie de flux de travail pour la collecte et la gestion électroniques des données de recherche et d'essais cliniques disponibles pour les chercheurs du MUSC. Le processus itératif de développement et de test aboutit à une stratégie de collecte de données bien planifiée pour les études individuelles, ce qui facilite la saisie des données, les vérifications de contrôle et l'analyse statistique éventuelle. La base de données sous-jacente est hébergée au centre de données MUSC et le système est protégé par une connexion et un cryptage Secure Sockets Layer (SSL).

Analyse statistique L'analyse statistique sera effectuée sous la direction d'un biostatisticien, qui a collaboré avec l'IP à l'élaboration de cette étude. Initialement, des statistiques descriptives seront utilisées pour caractériser les participants à l'étude en ce qui concerne les caractéristiques démographiques, les caractéristiques cliniques pertinentes et les mesures du NGF au départ et au fil du temps. Les différences entre les groupes en matière de démographie et d'autres variables de base seront examinées au moyen de tests t, de tests du chi carré et de tests exacts de Fisher, selon le cas. Cette étude vise à obtenir des preuves préliminaires de l'efficacité de ces exercices (chant et/ou respiration vs contrôle au repos) pour stimuler le NGF salivaire ; en tant que tel, aucun test d'hypothèse formel ne sera effectué. Au lieu de cela, des modèles mixtes linéaires généraux (GLMM) seront utilisés pour obtenir des estimations (et leurs intervalles de confiance respectifs à 95 %) des différences de groupe au fil du temps en ce qui concerne les niveaux de NGF. Les GLMM sont idéaux pour les analyses impliquant la variabilité inter- et intra-sujet et sont particulièrement utiles pour les plans d'étude à mesures répétées tels que celui utilisé pour cette étude proposée. Puisque l'on pense que l'âge affecte le NGF, l'âge sera inclus comme covariable dans tous les modèles. Les effets linéaires, quadratiques et cubiques du temps seront pris en compte. Différents types de structures de covariance d'erreur seront examinés et les valeurs du critère d'information d'Akaike seront utilisées pour sélectionner le GLMM le mieux adapté. L'utilisation du GLMM nous permettra de caractériser la trajectoire typique des mesures de NGF au fil du temps dans les deux conditions expérimentales et nous donnera également l'occasion de comparer les exercices de chant et de respiration au sein du groupe CB. Les résultats de ce type de modélisation statistique seront précieux pour la planification d'études futures (financées par des sources externes), plus vastes et plus définitives.

Justification de la taille de l'échantillon Étant donné qu'aucun test d'hypothèse formel ne sera effectué, la puissance statistique n'est pas pertinente pour cette proposition ; ainsi, la justification de la taille de l'échantillon est basée sur la précision de nos processus d'estimation et sur les expériences d'apprentissage impliquées dans l'inscription, l'observation et la mesure des sujets de cette étude ainsi que la réalisation des tests de laboratoire de la manière la plus efficace possible. Avoir n = 10 sujets dans chaque groupe expérimental (pour un total de n = 20 sujets) nous permettra de faire des estimations préliminaires des mesures de NGF au fil du temps dans chaque groupe. Avec n = 10 sujets par groupe, les intervalles de confiance à 95 % autour des estimations moyennes du groupe s'étendront à environ 0,6 écart-type dans les deux sens, et les intervalles de confiance à 95 % autour des estimations de la différence moyenne du groupe s'étendront à environ 0,9 écart-type dans l'un ou l'autre sens. Avec n = 10 par groupe, nous aurons également une meilleure compréhension de la volonté des sujets d'être randomisés dans ce type d'étude de médecine complémentaire et alternative et des meilleures techniques associées à l'intervention des exercices de chant et de respiration.

E. PROTECTION DES SUJETS HUMAINS

1. Risques pour les sujets Il y aura 20 sujets hommes et femmes participant à cette étude qui sont dans le groupe d'âge de 18 ans et plus. Ce protocole consistera en une seule visite, des séances individuelles pour chaque participant. Ces exercices ne présentent aucun risque physique, psychologique, social pour les participants. La violation de la confidentialité pourrait être un risque potentiel car le questionnaire recueille des informations sur la santé des sujets. Les participants peuvent se sentir légèrement mal à l'aise de cracher ou de baver en présence d'un autre individu. Il est possible que le participant ait l'impression qu'il ne connaît pas les exercices à l'avance ou qu'il ne soit pas entièrement capable de suivre les instructions de l'exercice.

   Protections contre les risques L'instructeur s'efforcera de faire en sorte que les sujets se sentent à l'aise et à l'aise. Toutes les informations recueillies dans le cadre de l'étude seront traitées de manière confidentielle et stockées sur des serveurs sécurisés comme décrit ci-dessus. Les travaux papier générés dans la présente étude contiennent des informations personnelles potentielles. Ces documents seront conservés dans une armoire verrouillée appartenant au PI située dans la salle 625 du STB au MUSC. Les participants seront identifiés par un numéro d'identification dans tous les documents, données et dans les prélèvements salivaires. Le consentement éclairé est le lien entre le numéro d'identification du participant et son nom. Les échantillons salivaires prélevés seront sécurisés dans un congélateur à -80 degrés avec une serrure dans la salle STB 213 et jetés immédiatement après l'analyse des données. Les exercices de respiration et le chant sont des formes d'exercices légers et ne présentent aucun risque pour la santé des participants. Les participants à l'étude ne seront pas contactés pour une autre étude.

2. Avantages potentiels pour la santé des sujets La respiration yogique en particulier et le yoga en général sont de bons exercices pour une vie saine. Plusieurs études indiquent que la respiration yogique réduit le stress et améliore la qualité de vie de plusieurs groupes de patients et d'individus par ailleurs en bonne santé. À la fin de l'étude, les sujets du groupe Exercices de chant/respiration pouvaient se sentir mieux physiquement et psychologiquement en raison des effets neurotrophiques. Ces sujets finissent par apprendre de nouvelles techniques d'une autre culture (expérience interculturelle) pour réguler la respiration qu'ils peuvent pratiquer quotidiennement à leur guise car une pratique continue pourrait leur être bénéfique à long terme.