Oddychanie jogiczne zmienia składniki śliny

A. SZCZEGÓLNE CELE

SA1: Uzyskać wstępne oszacowanie stopnia, w jakim zorganizowane ćwiczenie intonowania stymuluje wydzielanie śliny, która zawiera wymierne ilości NGF u zdrowych osób.

SA2: Uzyskaj wstępne oszacowanie stopnia, w jakim uporządkowane ćwiczenie oddechowe stymuluje wydzielanie śliny zawierające wymierne ilości NGF u zdrowych osób.

B. TŁO I ZNACZENIE TŁO Choroby neurodegeneracyjne Choroby neurodegeneracyjne, takie jak choroba Alzheimera, stanowią poważny problem zdrowotny na całym świecie. W USA AD jest szóstą najczęstszą przyczyną zgonów. Zarówno czynniki genetyczne, jak i niegenetyczne przyczyniają się do rozwoju AD. Osoby dotknięte chorobą Alzheimera wymagają wsparcia obejmującego leki, urządzenia wspomagające i opiekę osobistą, co stanowi ogromne obciążenie emocjonalne i finansowe. AD wiąże się ze znacznymi zmianami na poziomie molekularnym, które ostatecznie przekładają się na dysfunkcje komórkowe, tkankowe, narządowe i ogólnoustrojowe. Dlatego terapia molekularna, która zmienia funkcje komórek, była główną opcją kliniczną w leczeniu AD. Na przykład NGF, czynnik troficzny zaangażowany w rozwój, utrzymanie i przeżycie obwodowego układu nerwowego i neuronów cholinergicznych ośrodkowego układu nerwowego, wykazuje znaczną redukcję osób z AD. Zmniejszenie NGF powoduje znaczny spadek funkcji poznawczych. Dlatego podawanie NGF jest rozważane jako realna opcja kliniczna dla pacjentów z AD. Oprócz tych opcji terapeutycznych, niefarmakologiczne sposoby leczenia, takie jak medytacja i joga, zostały uznane za alternatywne podejścia do leczenia AD. Takie praktyki i style życia są głęboko zakorzenione w kilku starożytnych kulturach. Ten projekt opiera się na dwóch praktykach zdrowotnych stylu życia ze starożytnej kultury tamilskiej.

NGF Czynnik wzrostu nerwów (NGF) jest białkiem neurotroficznym (MW=13 kDa). NGF jest wytwarzany przez każdą tkankę/narząd, który jest unerwiony przez nerwy czuciowe i/lub odprowadzające współczulne, a także przez ośrodkowy (OUN) i obwodowy (PNS) układ nerwowy oraz komórki odpornościowe. NGF jest ważny dla funkcjonalnej integralności neuronów cholinergicznych w OUN oraz dla rozwoju i funkcjonalnej integralności neuronów w PNS. NGF jest czynnikiem przeżycia, różnicowania i troficznym dla komórek układu odpornościowego i pochodzenia nabłonkowego. Gruczoły ślinowe (podżuchwowe/podszczękowe) wytwarzają duże ilości NGF u ludzi i myszy. NGF wytwarzany z gruczołów podszczękowych myszy jest używany w kilku badaniach klinicznych. W OUN NGF jest wytwarzany w korze mózgowej, hipokampie i przysadce mózgowej; a także w innych obszarach, w tym w jądrach podstawnych, wzgórzu, rdzeniu kręgowym iw siatkówce. NGF wiąże się ze swoim receptorem TrkA i aktywuje mitogenne szlaki MAPK, PI3K/Akt i PLC-gamma, aby pośredniczyć we wzroście, różnicowaniu i przeżyciu komórek. Przeżycie, w którym pośredniczy NGF, jest ważne dla neuronów cholinergicznych kompleksu podstawy przodomózgowia (BFC). Te neurony przyczyniają się do świadomości, pamięci, uwagi i pobudzenia. Neurony BFC są silnie dotknięte chorobami neurodegeneracyjnymi, takimi jak AD. NGF chroni neurony BFC w eksperymentalnych modelach urazów oraz w związanym z wiekiem spadkiem cholinergicznym. Ze względu na pozytywny wpływ NGF na wiele układów, aktywnie dąży się do rozwoju NGF jako leku do leczenia neurodegeneracji, dysregulacji immunologicznej, przewlekłych stanów zapalnych i chorób autoimmunologicznych. Jednak do niedawna próby kliniczne z NGF były bez większego powodzenia z powodu hiperalgezji. Ostatnie badania wykazują, że terapia genowa, donosowe i do oczu drogi podawania NGF są skuteczne przy znacznie mniejszych efektach ubocznych nocyceptywnych. Ponadto niedawne odkrycie, że chemiczna modyfikacja NGF zmniejsza ból, jest uważane za nowy kierunek w terapii NGF. Badanie kliniczne fazy II oceniające korzystny wpływ ekspresji NGF za pośrednictwem wirusa związanego z adenowirusami w neuronach cholinergicznych mózgu jest w toku w MUSC z udziałem współbadacza tego projektu, dr Jacobo Mintzera.

NGF jest pobierany z narządów docelowych przez unerwiające neurony i transportowany do ciała aksonalnego przez wsteczny transport aksonalny. Naukowcy wykorzystali NGF znakowany kropkami kwantowymi, aby wykazać, że każdy dimer NGF jest pakowany w indywidualne endosomy podczas transportu wstecznego. Wsteczny transport aksonalny sygnałów NGF dla przeżycia, różnicowania i utrzymania obwodowych neuronów współczulnych i czuciowych oraz neuronów cholinergicznych podstawy przodomózgowia. Toksyna botulinowa podąża drogą wsteczną, aby dotrzeć do neuronów centralnych. Ponadto ostatnio potwierdzono, że neurotoksyny botulinowe A i E docierają do dystalnych miejsc w układzie nerwowym poprzez wsteczny transport dalekiego zasięgu przez neurony ruchowe i zasugerowano, że ten mechanizm może być wspólny również dla rozprzestrzeniania się innych czynników neurotroficznych. To może wyjaśniać, dlaczego donosowe podanie NGF jest uważane za skuteczne w terapii NGF. Ponadto do aplikacji nitrogliceryny i innych środków psychoaktywnych wykorzystywana jest podjęzykowa droga wchłaniania z pominięciem przewodu pokarmowego. Tak więc nasze uzasadnienie, że NGF wytwarzany przez gruczoły ślinowe jest pobierany przez 1) unerwiające neurony czuciowe i ruchowe w celu wstecznego transportu aksonalnego do ciała komórki i transcytozy w celu dotarcia do neuronów centralnych oraz 2) podjęzykowa droga wchłaniania do krwioobiegu w celu dotarcie do innych odległych narządów docelowych dobrze mieści się w teoretycznych ramach mechanizmów produkcji i transportu ustalonych dla neuromodulatorów. W tym miejscu należy podkreślić, że propozycja ta jest pierwszą w historii próbą stymulacji NGF metodami nieinwazyjnymi.

Intonowanie Intonowanie i śpiewanie to dwie starożytne praktyki kulturowe w historii ludzkości. Ostatnie dowody sugerują, że te dwie praktyki mogą regulować oddychanie. Symbol dźwiękowy Om (Rysunek 2) jest określany jako jednoliterowy klucz do szczęśliwego życia. Om jest dobrze znanym przedrostkiem w kilku pieśniach wschodnich religii. Uważa się, że śpiewanie Om wiąże się z dobrym samopoczuciem fizycznym i emocjonalnym. Śpiewanie Om zwiększa obwodowy opór naczyniowy skóry, co jest oznaką zwiększonej czujności umysłowej, nawet w stanie fizjologicznego odprężenia. U około 40% pacjentów z chorobą Alzheimera brakuje wywołanego potencjału słuchowego o średnim opóźnieniu (MLAEP). Wykazano, że śpiewanie Om poprawia MLAEP u zdrowych osób po śpiewaniu, co sugeruje, że podobny efekt można zaobserwować u pacjentów z AD. Stymulacja nerwu błędnego (VNS) była korzystna u osób z AD, ponieważ poprawia funkcje poznawcze. Pulsowanie elektryczne dla VNS wykazało dezaktywację limbicznych obszarów mózgu. Intonowanie Om spowodowało również podobną dezaktywację limbicznych obszarów mózgu, ciała migdałowatego, hipokampu, zakrętu przyhipokampowego, wyspy, kory oczodołowo-czołowej i przedniego zakrętu obręczy oraz wzgórza. W neurofizjologicznych skutkach intonowania Om mogą pośredniczyć gałęzie uszne nerwów błędnych. Jednak nie jest zrozumiałe, czy po śpiewaniu Om zachodzą określone zmiany molekularne, jeśli chodzi o czynniki neurotroficzne, takie jak NGF.

Ćwiczenia oddechowe Ćwiczenia oddechowe to aktywny sposób regulowania oddychania. Typowa częstotliwość oddychania u normalnego dorosłego człowieka wynosi 15 razy na minutę. Częstotliwość ta zmienia się wraz z wiekiem i stanem fizjologicznym. U pacjentów z niewydolnością serca Bernardi i wsp. wykazali, że spowolnienie oddychania jest korzystne. Ćwiczenia takie jak joga, intonowanie i ćwiczenia oddechowe regulują funkcje oddechowe i poznawcze. Jednym ze starożytnych tekstów odnoszących się do korzyści płynących z ćwiczeń oddechowych jest Thirumanthiram napisany przez tamilskiego mędrca Thirumoolara, którego teksty znane są z praktyk zdrowotnych i długowieczności. Uważa się, że ćwiczenia oddechowe wytwarzają cykle stanów natlenienia i braku natlenienia jako środka wstępnego przygotowania niedokrwiennego. Kondycjonowanie wstępne niedokrwienia na odległość, tj. indukowanie krótkich okresów niedokrwienia w odległym narządzie, zapewnia ochronę przed kolejnym urazem niedokrwiennym. Wstrzymywanie oddechu zwiększa napięcie nerwu błędnego, zwiększa dominację przywspółczulną i zmniejsza wyładowania współczulne. Regulowane oddychanie prowadzi do przewagi oddychania brzusznego/przeponowego. Zatem ćwiczenia oddechowe mogą być potencjalnym sposobem indukowania wstępnego przygotowania niedokrwiennego w neuronach. W mózgu i sercu wiadomo, że wstępne kondycjonowanie niedokrwienne jest korzystne w zapobieganiu przyszłym poważnym zdarzeniom niedokrwiennym poprzez wytwarzanie sygnalizacji przeżycia komórek. Co ciekawe, NGF jest cząsteczką sygnalizującą przeżycie komórki. Dlatego można sobie wyobrazić, że ćwiczenia oddechowe indukują przeżycie komórek w komórkach centralnego i obwodowego układu nerwowego poprzez działanie NGF.

Ślina jako biomarker Normalny człowiek produkuje około 0,75 do 1,5 l śliny dziennie. Ślina zawiera liczne biologicznie aktywne cząsteczki, w tym białka, peptydy, mRNA, DNA i miRNA pochodzenia mikrobiologicznego zarówno ludzkiego, jak i jamy ustnej. Wydzielanie śliny reguluje pracę układu pokarmowego, nerwowego, odpornościowego i oddechowego. Na przykład 1) Czynnik wzrostu nerwów (NGF), substancja P i peptyd związany z genem kalcytoniny (CGRP) są wydzielane w ślinie w odpowiedzi na przewlekłą migrenę, oraz 2) Opiorfina, silny środek przeciwbólowy, jest wyrażana w ślinie. Profilowanie proteomiczne i mRNA śliny pozwoliło zidentyfikować znaczące różnice między grupą kontrolną a pacjentami z rakiem. Badania te wskazują, że ślina służy jako źródło biomarkerów w diagnostyce i prognozowaniu szeregu stanów patologicznych, w tym AZS.

ZNACZENIE Choroby neurodegeneracyjne, takie jak AD, stanowią poważny globalny problem zdrowotny. Niefarmakologiczne i nieinwazyjne praktyki mogą zmieniać funkcje neurologiczne w normalnych i patologicznych warunkach. Wydzielanie śliny czynników neurotroficznych wskazuje, że ślina może być potencjalnym źródłem i biomarkerem dla czynników neurotroficznych. Dlatego ocena NGF w ślinie może być narzędziem diagnostycznym i rokowniczym w AD. Starożytna kultura tamilska zachowała praktyki mające na celu utrzymanie zdrowego stanu psychicznego i fizjologicznego. Wiadomo, że śpiewanie i ćwiczenia oddechowe pobudzają wydzielanie śliny. Jednak nie jest w pełni zrozumiałe, czy takie praktyki indukują ekspresję czynników neurologicznych w ślinie. Naszym celem jest ilościowe określenie NGF w ślinie w odpowiedzi na śpiewanie i ćwiczenia oddechowe u normalnych ludzi. Ustali to dotychczas nieopublikowany związek między sygnałami dotykowymi języka i sygnałami oddechowymi dla wydzielania NGF w ślinie i jego wpływem na układ nerwowy. Nasz projekt będzie oznaczał ilościowo kandydującego czynnika neurotroficznego NGF w ślinie na początku, podczas i po wysiłku. W przyszłych badaniach wykorzystamy podejścia proteomiczne, peptydowe i genomowe, aby zidentyfikować inne czynniki neurotroficzne regulowane w ślinie przez te ćwiczenia. Nasze odkrycia wprowadzą nowy paradygmat w leczeniu i opiece nad osobami ze skłonnością do AD i innymi chorobami neurodegeneracyjnymi.

Wpływ kliniczny i translacyjny: Biorąc pod uwagę fakt, że AD, starzenie się i inne zaburzenia neurodegeneracyjne są związane ze zmniejszoną produkcją czynników neurotroficznych (np. NGF) i że NGF jest aktywnie poszukiwany jako lek w badaniach klinicznych, nasze odkrycia, że ​​NGF może być stymulowany in situ przez proste, nieinwazyjne praktyki etniczne, będą miały silne zastosowanie kliniczne. Przyszłe badania z wykorzystaniem metod genomicznych i proteomicznych pozwolą zidentyfikować dodatkowe czynniki neurotroficzne w ślinie, które mogą potencjalnie stanowić cel leków w leczeniu AD i innych chorób neurodegeneracyjnych.

C. BADANIA WSTĘPNE Brak. D. PROJEKT BADAŃ I METODY Na ludziach

W badaniu weźmie udział łącznie 20 ochotników (mężczyzn lub kobiet) w wieku od 18 lat. Poniżej znajduje się lista warunków wykluczenia:

• problemy z oddychaniem (niemożność oddychania przez nozdrza, przewlekłe zapalenie oskrzeli, rozedma płuc i astma)
• problemy z mową, które uniemożliwiłyby intonowanie
• niezdolność do słuchania i wykonywania instrukcji ćwiczeń
• przekrwienie zatok
• zespół Sjogrena
• przewlekła suchość w jamie ustnej spowodowana lekami lub innymi stanami
• stosowanie leków antycholinergicznych Świadoma zgoda zostanie uzyskana od każdego uczestnika po dokładnym opisaniu badania.

Rekrutacja ludzi Po uzyskaniu zgody IRB zrekrutujemy 20 osób wymaganych do tego badania, umieszczając ogłoszenie w windach MUSC iw pobliskich ośrodkach jogi. Zainteresowani uczestnicy będą kontaktować się z IP pod podanym numerem telefonu. Kwalifikowalność przedmiotów zostanie oceniona przez PI na podstawie pytań podanych w Kwestionariuszu. PI i uczestnik uzgadniają termin spotkania. Uczestnik przyjdzie do laboratorium PI w budynku Strom Thurmond (STB, pokój 222). Ta sala konferencyjna znajduje się na tym samym piętrze co laboratorium badawcze PI. Wybraliśmy to pomieszczenie ze względu na cichą atmosferę bez ingerencji innych pracowników laboratorium podczas protokołu. Pokój ten jest rezerwowany przez kierownika laboratorium Gazes Cardiac Research Institute i jest bezpłatnie dostępny dla PI. Po przybyciu PI wyjaśni uczestnikowi badanie i uzyska zgodę za pomocą formularza zgody. PI podpisze również i opatrzy datą Formularz zgody oraz przekaże kopię uczestnikowi. Następnie pacjent wypełni kwestionariusz, aby potwierdzić uprawnienia.

Zarejestrowani i wyrażeni zgodę pacjenci zostaną losowo przydzieleni do jednego z 2 warunków (grupa „Intonowanie/Oddychanie” (CB) w porównaniu z grupą „Kontrola”. Randomizacja zostanie przeprowadzona we współpracy z biostatystykiem i zostanie przeprowadzona w sposób warstwowy (tj. według płci), aby zapewnić równy rozkład płci w 2 grupach eksperymentalnych (CB vs. Control). Biostatystyk dostarczy PI koperty zawierające numer identyfikacyjny badania i losowe przydziały do ​​grup (tj. CB kontra kontrola). Każda koperta zostanie otwarta dopiero po ustaleniu kwalifikowalności do badania i uzyskaniu zgody.

Przed ćwiczeniami i pobraniem próbek, PI nauczy każdego badanego, jak wykonywać intonowanie i ćwiczenia oddechowe. Każdy badany będzie testował indywidualnie ze względu na łatwość pobierania próbek i uniknięcie jakiejkolwiek zmienności, która mogłaby powstać w stymulacji neuronów u badanych w obecności osób innych niż badacze.

Śpiewanie, ćwiczenia oddechowe i pobieranie próbek Uczestnicy otrzymają wprowadzenie do śpiewania i ćwiczeń oddechowych. Jako praktykujący śpiewanie/jogę/ćwiczenia oddechowe, PI przeprowadzi to szkolenie, którego nauka nie powinna zająć więcej niż 5 minut. Plan pobierania całych próbek śliny przedstawiono na rycinie 3. Próbki śliny będą pobierane raz na początku protokołu (czas 0), gdy badani siedzą. Ślina będzie mogła naturalnie gromadzić się w jamie ustnej, a uczestnik wypuści ją do probówki z próbką (pojemność 5 ml) z pokrywką.

Intonowanie Om (C):

Następnie badani będą intonować Om w następujący sposób:

1. Ostry głęboki wdech przez nozdrza
2. Powolny wydech przez usta podczas intonowania Om. Na tym etapie badani wykonują powolny i pełny wydech.

Te dwa etapy powtarza się w sposób ciągły przez 10 minut z zamkniętymi oczami.

Ćwiczenia oddechowe (BE):

Po śpiewie badani wykonują następujące ćwiczenie oddechowe, zgodnie z instrukcjami PI w oparciu o Thirumanthiram:

1. Sprawdź, które z dwóch nozdrzy wykazują swobodny przepływ powietrza. Dla wyjaśnienia nozdrze ze swobodnym przepływem powietrza traktujemy jako Nozdrze 1, a drugie nozdrze jako Nozdrze 2.
2. Zamknij nozdrze 2 i weź ostry, głęboki wdech przez nozdrze 1, a następnie zamknij oba nozdrza, aby wdychane powietrze nie wydostawało się na zewnątrz. Powietrze nie powinno również wydostawać się przez usta. Ten etap inhalacji powinien zająć około 4 sekund.
3. Wstrzymaj oddech w tej pozycji przez około 16 sekund.
4. Otwórz nozdrze 2 i wydychaj powietrze przez około 8 sekund. Wymagany jest pełny wydech. Brzuch będzie się powoli wyginał podczas wydechu. To normalne i zachęcające. Powietrze nie powinno przeciekać przez nozdrze 1 ani przez usta.
5. Przejdź do kroku a). Podczas ćwiczenia, jeśli w jamie ustnej gromadzi się ślina, badany może ją połknąć pod koniec etapu wydechu (etap d). Badani będą wykonywać ćwiczenia oddechowe przez 10 min. Próbki śliny będą pobierane po 5 i 10 minutach ćwiczeń oddechowych do probówek oznaczonych BE-1, BE-2. Tak więc każda osoba dostarczy pięć następujących próbek śliny: + (czas 0), śpiewanie Om (C-1 i C2) oraz ćwiczenie oddechowe (BE-1 i BE-2).

Grupa kontrolna W przypadku grupy kontrolnej badani będą siedzieć cicho przez taki sam czas jak grupa CB. Próbki śliny będą pobierane w tych samych punktach czasowych (w odstępach 5-minutowych przez 20 minut), co grupa CB.

Przybliżony całkowity czas całego protokołu będzie następujący:

Wprowadzenie i Kwestionariusz - 10 minut Instrukcja śpiewania, ćwiczenia oddechowe (grupa CB) lub spokojne siedzenie (grupa kontrolna) i pobieranie próbki śliny - 10 minut (grupa CB) lub 5 minut (grupa kontrolna) Pobieranie próbki podstawowej - 1 minuta Om Chanting - 10 minut Ćwiczenie oddechowe - 10 minut Każde inne pytanie badanego - 2-3 minuty Całkowity czas spotkania dla badanego = około 45 minut (grupa CB) 40 minut (grupa kontrolna) Za czas uczestników badania i wszelkie niedogodności rekompensata pieniężna będzie zapewnione.

Przetwarzanie próbek Umieścić pobrane próbki śliny na lodzie. Stosując sterylne techniki, przenieś ślinę do probówek wirówkowych, jednocześnie mierząc ilość każdej próbki. Liczba próbek pobranych z każdej próbki na każdym etapie eksperymentu może być różna. Potraktuj próbki z poszczególnych probówek oddzielnie, bez łączenia próbek. Oblicz całkowitą objętość śliny podczas normalnej fazy spoczynku, podczas śpiewania i podczas ćwiczeń oddechowych. Przechowywać próbki w temperaturze -80 stopni C do czasu analizy. Próbki zostaną odrzucone po analizie danych.

Test immunoenzymatyczny Oznaczyć ilościowo poziomy NGF w każdej próbce za pomocą testu immunoenzymatycznego przy użyciu komercyjnych zestawów zgodnie z instrukcjami producenta (Promega). Wszystkie odczynniki niezbędne do przeprowadzenia eksperymentu ELISA znajdują się w zestawie. Dodatkowe odczynniki, jeśli są, oraz czytnik ELISA są dostępne dla PI w STB Room 511.

Zarządzanie danymi Wszystkie dane badawcze zebrane od uczestników przez PI zostaną wprowadzone do bazy danych REDCap, opracowanej z pomocą biostatystyka projektu. REDCap (Research Electronic Data Capture) to zestaw narzędzi programowych i metodologia przepływu pracy do elektronicznego gromadzenia i zarządzania danymi z badań i badań klinicznych dostępnych dla badaczy MUSC. Iteracyjny proces opracowywania i testowania skutkuje dobrze zaplanowaną strategią gromadzenia danych dla poszczególnych badań, co ułatwia wprowadzanie danych, sprawdzanie edycji i ewentualną analizę statystyczną. Podstawowa baza danych jest hostowana w MUSC Data Center, a system jest chroniony za pomocą logowania i szyfrowania Secure Sockets Layer (SSL).

Analiza statystyczna Analiza statystyczna zostanie przeprowadzona pod kierunkiem biostatystyka, który współpracował z PI przy opracowywaniu tego badania. Początkowo statystyki opisowe zostaną wykorzystane do scharakteryzowania uczestników badania w odniesieniu do danych demograficznych, wszelkich istotnych cech klinicznych oraz pomiarów NGF na początku badania iw czasie. Różnice grupowe w danych demograficznych i innych zmiennych wyjściowych zostaną zbadane odpowiednio za pomocą testów t, testów chi-kwadrat i dokładnych testów Fishera. To badanie ma na celu uzyskanie wstępnych dowodów na skuteczność tych ćwiczeń (intonowanie i/lub oddychanie vs. kontrola spoczynku) w stymulowaniu NGF w ślinie; w związku z tym nie zostanie przeprowadzone żadne formalne testowanie hipotez. Zamiast tego zostaną wykorzystane ogólne liniowe modele mieszane (GLMM) w celu uzyskania szacunków (i ich odpowiednich 95% przedziałów ufności) różnic między grupami w czasie w odniesieniu do poziomów NGF. GLMM są idealne do analiz obejmujących zmienność międzyobiektową i wewnątrzobiektową i są szczególnie przydatne w przypadku projektów badań z powtarzanymi pomiarami, takich jak ten zastosowany w tym proponowanym badaniu. Ponieważ uważa się, że wiek wpływa na NGF, wiek będzie uwzględniany jako współzmienna we wszystkich modelach. Rozważone zostaną liniowe, kwadratowe i sześcienne efekty czasu. Zbadane zostaną różne typy struktur kowariancji błędów, a wartości kryterium informacyjnego Akaike zostaną wykorzystane do wybrania najbardziej odpowiedniego GLMM. Korzystanie z GLMM pozwoli nam scharakteryzować typową trajektorię pomiarów NGF w czasie w obu warunkach eksperymentalnych, a także zapewni nam możliwość porównania śpiewania z ćwiczeniami oddechowymi w grupie CB. Wyniki tego typu modelowania statystycznego będą cenne przy planowaniu (finansowanych zewnętrznie) przyszłych, większych i bardziej definitywnych badań.

Uzasadnienie wielkości próby Ponieważ nie zostanie przeprowadzone żadne formalne testowanie hipotez, moc statystyczna nie ma znaczenia dla tej propozycji; dlatego uzasadnienie wielkości próby opiera się na precyzji naszych procesów szacowania oraz na doświadczeniach edukacyjnych związanych z rejestracją, obserwacją i pomiarami uczestników tego badania, a także przeprowadzaniem testów laboratoryjnych w możliwie najbardziej efektywny sposób. Posiadanie n=10 osobników w każdej grupie eksperymentalnej (w sumie n=20 osobników) pozwoli nam na wstępne oszacowanie pomiarów NGF w czasie w każdej grupie. Przy n=10 osobników na grupę, 95% przedziały ufności wokół średnich szacunków grupowych wydłużą się o ~0,6 odchylenia standardowego w dowolnym kierunku, a 95% przedziały ufności wokół średnich szacunków różnic grupowych rozszerzą się o ~0,9 odchylenia standardowego w dowolnym kierunku. Przy n = 10 na grupę, uzyskamy również lepsze zrozumienie chęci pacjentów do randomizacji w tego typu badaniach medycyny komplementarnej i alternatywnej oraz najlepszych technik związanych z interwencjami intonowania i ćwiczeń oddechowych.

E. OCHRONA OSÓB LUDZKICH

1. Zagrożenia dla uczestników W tym badaniu weźmie udział 20 osób, zarówno mężczyzn, jak i kobiet, w wieku od 18 lat. Protokół ten będzie składał się z jednej wizyty, sesji jeden na jeden dla indywidualnego uczestnika. Ćwiczenia te nie stanowią dla uczestników żadnego fizycznego, psychologicznego ani społecznego zagrożenia. Naruszenie poufności może być jednym z potencjalnych zagrożeń, ponieważ Kwestionariusz zbiera informacje o stanie zdrowia badanych. Uczestnicy mogą czuć się nieco nieswojo plując lub śliniąc się w obecności innej osoby. Istnieje szansa, że ​​uczestnik poczuje, że nie zna wcześniej ćwiczeń lub może poczuć, że nie jest w stanie w pełni wykonać instrukcji ćwiczeń.

   Zabezpieczenia przed zagrożeniami Instruktor postara się, aby uczestnicy czuli się swobodnie i komfortowo. Wszystkie informacje zebrane w badaniu będą traktowane jako poufne i przechowywane na zabezpieczonych serwerach, jak opisano powyżej. Prace papierowe wygenerowane w niniejszym badaniu zawierają potencjalne dane osobowe. Dokumenty te będą zabezpieczone w zamykanej na klucz szafie należącej do PI znajdującej się w pokoju 625 STB w MUSC. Uczestnicy będą identyfikowani za pomocą numeru identyfikacyjnego we wszystkich dokumentach, danych oraz próbkach śliny. Świadoma zgoda jest powiązaniem numeru identyfikacyjnego uczestnika z jego imieniem i nazwiskiem. Pobrane próbki śliny zostaną zabezpieczone w temperaturze -80 stopni w zamrażarce z zamkiem w STB Room 213 i wyrzucone natychmiast po analizie danych. Ćwiczenia oddechowe i intonowanie są łagodnymi formami ćwiczeń i nie stwarzają żadnego zagrożenia dla zdrowia uczestników. Z uczestnikami badania nie będziemy kontaktować się w sprawie innego badania.

2. Potencjalne korzyści zdrowotne dla badanych Oddychanie jogiczne w szczególności i ogólnie joga są dobrymi ćwiczeniami dla zdrowego życia. Liczne badania wskazują, że jogiczne oddychanie zmniejsza stres i poprawia jakość życia wielu grup pacjentów oraz zdrowych osób. Pod koniec badania badani w grupie Intonowanie/Ćwiczenia Oddechowe mogli poczuć się lepiej fizycznie i psychicznie z powodu efektów neurotroficznych. Osoby te w końcu uczą się nowych technik z innej kultury (doświadczenie międzykulturowe), aby regulować oddychanie, które mogą ćwiczyć codziennie do woli, ponieważ ciągła praktyka może przynieść im korzyści na dłuższą metę.