La respirazione yogica modifica i componenti salivari

A. FINALITÀ SPECIFICHE

SA1: ottenere una stima preliminare della misura in cui un esercizio di canto strutturato stimola la secrezione salivare che contiene quantità quantificabili di NGF in soggetti sani.

SA2: Ottenere una stima preliminare della misura in cui un esercizio di respirazione strutturata stimola la secrezione salivare che contiene quantità quantificabili di NGF in soggetti sani.

B. BACKGROUND E SIGNIFICATO BACKGROUND Malattie neurodegenerative Le malattie neurodegenerative come il morbo di Alzheimer sono una delle principali preoccupazioni sanitarie a livello globale. Negli Stati Uniti, l'AD è la sesta causa di morte. Sia i fattori genetici che quelli non genetici contribuiscono allo sviluppo dell'AD. Le persone affette da AD richiedono supporti che vanno da farmaci, dispositivi di assistenza e cure personali che rappresentano un enorme onere emotivo e finanziario. L'AD è associato a significative alterazioni a livello molecolare che alla fine si traducono in disfunzioni cellulari, tissutali, organiche e sistemiche. Pertanto, la terapia molecolare che altera le funzioni cellulari è stata una delle principali opzioni cliniche per il trattamento dell'AD. Ad esempio, l'NGF, un fattore trofico coinvolto nello sviluppo, mantenimento e sopravvivenza del sistema nervoso periferico e dei neuroni colinergici del sistema nervoso centrale, mostra una significativa riduzione nei soggetti AD. La riduzione del NGF provoca un significativo declino delle funzioni cognitive. Pertanto la somministrazione di NGF è seguita come opzione clinica praticabile per i soggetti con AD. Oltre a queste opzioni terapeutiche, le modalità di trattamento non farmacologiche come la meditazione e lo yoga sono state considerate come approcci alternativi per il trattamento dell'AD. Tali pratiche e stili di vita sono profondamente radicati in diverse culture antiche. Questo progetto si basa su due pratiche sanitarie stile di vita dell'antica cultura Tamil.

NGF Il fattore di crescita nervoso (NGF) è una proteina neurotrofica (MW=13 kDa). L'NGF è prodotto da ogni tessuto/organo innervato da afferenze sensoriali e/o efferenti simpatiche, nonché dal sistema nervoso centrale (SNC) e periferico (SNP) e dalle cellule immunitarie. L'NGF è importante per l'integrità funzionale dei neuroni colinergici nel sistema nervoso centrale e per lo sviluppo e l'integrità funzionale dei neuroni nel sistema nervoso centrale. NGF è un fattore di sopravvivenza, differenziazione e trofica per le cellule del sistema immunitario e di origine epiteliale. Le ghiandole salivari (sottomandibolari/sottomascellari) producono una grande quantità di NGF nell'uomo e nei topi. L'NGF prodotto dalle ghiandole sottomascellari del topo viene utilizzato in numerosi studi clinici. Nel SNC, l'NGF è prodotto nella corteccia, nell'ippocampo e nella ghiandola pituitaria; e anche in altre aree, compresi i gangli della base, il talamo, il midollo spinale e nella retina. L'NGF si lega al suo recettore TrkA e attiva le vie mitogeniche MAPK, PI3K/Akt e PLC-gamma per mediare la crescita, la differenziazione e la sopravvivenza cellulare. La sopravvivenza mediata da NGF è importante per i neuroni colinergici del complesso prosencefalo basale (BFC). Questi neuroni contribuiscono alla coscienza, alla memoria, all'attenzione e all'eccitazione. I neuroni BFC sono altamente colpiti nelle malattie neurodegenerative come l'AD. NGF protegge i neuroni BFC nei modelli sperimentali di trauma e nel declino colinergico associato all'età. A causa degli effetti positivi dell'NGF in più sistemi, lo sviluppo dell'NGF come farmaco è attivamente perseguito per il trattamento della neurodegenerazione, della disregolazione immunitaria, dell'infiammazione cronica e delle malattie autoimmuni. Tuttavia, fino a poco tempo fa gli studi clinici con NGF non hanno avuto molto successo a causa dell'iperalgesia. Studi recenti stanno dimostrando che la terapia genica, le vie nasali e oculari della somministrazione di NGF sono efficaci con effetti collaterali molto meno nocicettivi. Inoltre, una recente scoperta secondo cui la modificazione chimica dell'NGF riduce il dolore è considerata una nuova direzione nella terapia dell'NGF. Presso il MUSC è in corso uno studio clinico di fase II che valuta gli effetti benefici di un'espressione di NGF mediata da virus adeno-associato nei neuroni colinergici del cervello, coinvolgendo il co-ricercatore di questo progetto, il dott. Jacobo Mintzer.

L'NGF viene prelevato dagli organi bersaglio dai neuroni innervanti e trasportato al corpo assonale mediante trasporto assonale retrogrado. I ricercatori hanno utilizzato l'NGF marcato con punti quantici per dimostrare che ogni dimero di NGF è impacchettato in singoli endosomi durante il trasporto retrogrado. Trasporto assonale retrogrado dei segnali NGF per la sopravvivenza, la differenziazione e il mantenimento dei neuroni simpatici e sensoriali periferici e dei neuroni colinergici del proencefalo basale. La tossina botulinica segue un percorso retrogrado per raggiungere i neuroni centrali. Inoltre, è stato recentemente confermato che le neurotossine botuliniche A ed E raggiungono i siti distali nel sistema nervoso attraverso il trasporto retrogrado a lungo raggio attraverso i motoneuroni e ha suggerito che questo meccanismo potrebbe essere comune anche per la diffusione di altri fattori neurotrofici. Questo potrebbe spiegare perché l'applicazione intranasale di NGF è considerata efficace per la terapia con NGF. Inoltre, la via di assorbimento sublinguale che bypassa la via gastrointestinale viene utilizzata per l'applicazione di nitroglicerina e altri agenti psicoattivi. Pertanto, la nostra logica secondo cui l'NGF prodotto dalle ghiandole salivari è assorbito da 1) i neuroni sensoriali e motori innervanti per il trasporto assonale retrogrado al corpo cellulare e la transcitosi per raggiungere i neuroni centrali, e 2) la via di assorbimento sublinguale nel flusso sanguigno per raggiungere altri organi bersaglio distali rientra nel quadro teorico dei meccanismi di produzione e trasporto stabiliti per i neuromodulatori. Va qui sottolineato che questa proposta è il primo tentativo in assoluto di stimolare l'NGF con metodi non invasivi.

Il canto Il canto e il canto sono due antiche pratiche culturali nella storia umana. Prove recenti suggeriscono che queste due pratiche possono regolare la respirazione. Il simbolo sonoro Om (figura 2) è indicato come la chiave di una lettera per una vita felice. Om è un prefisso ben noto in diversi canti in tutte le religioni orientali. Si ritiene che il canto di Om sia associato al benessere fisico ed emotivo. Il canto di Om aumenta la resistenza vascolare periferica cutanea, che è un segno di maggiore prontezza mentale anche quando si è fisiologicamente rilassati. In circa il 40% dei soggetti con Alzheimer manca il potenziale evocato uditivo di media latenza (MLAEP). È stato dimostrato che il canto di Om migliora la MLAEP nei soggetti normali dopo il canto, suggerendo che un effetto simile potrebbe essere osservato nei soggetti con AD. La stimolazione del nervo vagale (VNS) è stata benefica nei soggetti AD in quanto migliora le funzioni cognitive. Le pulsazioni elettriche per VNS hanno mostrato la disattivazione delle regioni cerebrali limbiche. Il canto di Om ha anche causato una simile disattivazione delle regioni cerebrali limbiche, dell'amigdala, dell'ippocampo, del giro paraippocampale, dell'insula, della corteccia orbitofrontale e del cingolo anteriore e del talamo. Gli effetti neurofisiologici del canto di Om potrebbero essere mediati attraverso i rami auricolari dei nervi vagali. Tuttavia, non è chiaro se dopo il canto di Om si verifichino cambiamenti molecolari specifici, in termini di fattori neurotrofici come l'NGF.

Esercizio di respirazione L'esercizio di respirazione è un modo attivo di regolare la respirazione. La frequenza respiratoria comune è di 15 volte al minuto negli esseri umani adulti normali. Questa frequenza cambia con l'età e le condizioni fisiologiche. Nei soggetti con insufficienza cardiaca Bernardi et al. hanno dimostrato che il rallentamento della respirazione è benefico. Esercizi come lo yoga, il canto e gli esercizi di respirazione regolano la respirazione e le funzioni cognitive. Uno degli antichi testi che si riferiscono ai benefici dell'esercizio di respirazione è Thirumanthiram scritto dal saggio tamil Thirumoolar i cui testi sono noti per le pratiche di salute e longevità. Si ritiene che l'esercizio di respirazione produca cicli di stati di ossigenazione e non ossigenazione come mezzo di precondizionamento ischemico. Il precondizionamento ischemico remoto, cioè l'induzione di brevi periodi di ischemia in un organo remoto, fornisce protezione da un successivo insulto ischemico. Trattenere il respiro aumenta il tono vagale, aumenta la dominanza parasimpatica e diminuisce le scariche simpatiche. La respirazione regolata porta alla predominanza della respirazione addominale/diaframmatica. Quindi l'esercizio di respirazione potrebbe essere un modo potenziale per indurre il precondizionamento ischemico nei neuroni. È noto nel cervello e nel cuore che il precondizionamento ischemico è utile per evitare futuri eventi ischemici maggiori producendo segnali di sopravvivenza cellulare. È interessante notare che l'NGF è una molecola di segnalazione della sopravvivenza cellulare. Pertanto è ipotizzabile che l'esercizio respiratorio induca la sopravvivenza cellulare nelle cellule del sistema nervoso centrale e periferico attraverso l'azione dell'NGF.

La saliva come biomarcatore Un essere umano normale produce da 0,75 a 1,5 L di saliva al giorno. La saliva contiene numerose molecole biologicamente attive tra cui proteine, peptidi, mRNA, DNA e miRNA di origine microbica sia umana che orale. La secrezione salivare regola il sistema digestivo, nervoso, immunitario e respiratorio. Ad esempio, 1) il fattore di crescita nervoso (NGF), la sostanza P e il peptide correlato al gene della calcitonina (CGRP) sono secreti nella saliva in risposta all'emicrania cronica, e 2) l'opiorfina, un potente agente anti-nocicettivo, è espressa nella saliva. La proteomica salivare e la profilazione dell'mRNA hanno identificato differenze significative tra soggetti di controllo e soggetti con cancro. Questi studi indicano che la saliva funge da fonte di biomarcatori nella diagnosi e nella prognosi di una serie di condizioni patologiche tra cui l'AD.

SIGNIFICATO Le malattie neurodegenerative come l'AD costituiscono un grave problema sanitario globale. Le pratiche non farmacologiche e non invasive potrebbero alterare le funzioni neurologiche in contesti normali e patologici. La secrezione salivare di fattori neurotrofici indica che la saliva potrebbe essere una potenziale fonte e un biomarcatore per fattori neurotrofici. Pertanto, la stima dell'NGF salivare potrebbe essere uno strumento per la diagnosi e la prognosi nell'AD. L'antica cultura Tamil ha preservato pratiche per mantenere uno stato psicologico e fisiologico sano. È noto che il canto e l'esercizio di respirazione promuovono la secrezione salivare. Tuttavia, non è del tutto chiaro se tali pratiche inducano l'espressione di fattori neurologici nella saliva. Miriamo a quantificare l'NGF salivare in risposta al canto e all'esercizio di respirazione in soggetti umani normali. Ciò stabilirà una relazione finora non segnalata tra i segnali tattili e respiratori della lingua per la secrezione salivare di NGF ei suoi effetti sul sistema nervoso. Il nostro progetto quantificherà il fattore neurotrofico candidato NGF nella saliva al basale, durante e dopo l'esercizio. In studi futuri utilizzeremo approcci proteomici, peptidici e genomici per identificare altri fattori neurotrofici regolati nella saliva da questi esercizi. I nostri risultati introdurranno un nuovo paradigma nel trattamento e nella cura di individui con/incline all'AD e ad altre malattie neurodegenerative.

Impatto clinico e traslazionale: dato che l'AD, l'invecchiamento e altri disturbi neurodegenerativi sono associati a una diminuzione della produzione di fattori neurotrofici (ad es. NGF) e che l'NGF è attivamente perseguito come farmaco negli studi clinici, le nostre scoperte secondo cui l'NGF potrebbe essere stimolato in situ da pratiche etniche semplici e non invasive avranno una forte applicazione clinica. Studi futuri che utilizzano approcci genomici e proteomici identificheranno ulteriori fattori neurotrofici nella saliva che potrebbero potenzialmente essere bersagli farmacologici per il trattamento dell'AD e di altre malattie neurodegenerative.

C. STUDI PRELIMINARI Nessuno. D. DISEGNO E METODI DELLA RICERCA Soggetti umani

Saranno inclusi nello studio un totale di 20 volontari (maschi o femmine), di età pari o superiore a 18 anni. Di seguito è riportato un elenco delle condizioni di esclusione:

• problemi respiratori (incapacità di respirare attraverso le narici, bronchite cronica, enfisema e asma)
• problemi di linguaggio che impedirebbero il canto
• incapacità di ascoltare e seguire le istruzioni degli esercizi
• congestione sinusale
• sindrome di Sjogren
• bocca secca cronica a causa di farmaci o altre condizioni
• uso di farmaci anticolinergici Il consenso informato sarà ottenuto da ciascun soggetto dopo aver descritto completamente lo studio.

Reclutamento di soggetti umani Una volta ottenuta l'approvazione dell'IRB, recluteremo 20 soggetti richiesti per questo studio pubblicando un annuncio negli ascensori MUSC e nei vicini centri Yoga. I partecipanti interessati contatteranno il PI al numero di telefono indicato. L'idoneità dei soggetti sarà valutata dal PI sulla base delle domande riportate nel Questionario. Il PI e il partecipante concorderanno l'orario dell'appuntamento. Il partecipante verrà al laboratorio del PI presso Strom Thurmond Building (STB, Room 222). Questa sala riunioni si trova sullo stesso piano del laboratorio di ricerca del PI. Abbiamo scelto questa stanza per la sua atmosfera tranquilla senza alcuna interferenza da parte di altro personale di laboratorio durante il protocollo. Questa stanza è riservata tramite il responsabile del laboratorio del Gazes Cardiac Research Institute ed è liberamente disponibile per il PI. All'arrivo, il PI spiegherà lo studio al soggetto e otterrà il consenso utilizzando il modulo di consenso. Il PI firmerà e data anche il modulo di consenso e ne darà una copia al partecipante. Il soggetto compilerà quindi il questionario per confermare l'idoneità.

I soggetti arruolati e consenzienti saranno randomizzati a una delle 2 condizioni (il braccio "Canto/respirazione" (CB) rispetto al braccio "Controllo". La randomizzazione sarà condotta in collaborazione con un biostatistico e sarà effettuata in modo stratificato (cioè per genere), per garantire un'equa distribuzione di genere nei 2 gruppi sperimentali (CB vs. Controllo). Il biostatistico fornirà al PI buste contenenti il ​​numero di identificazione dello studio e l'assegnazione casuale del gruppo (ad es. CB vs Controllo). Ciascuna busta verrà aperta solo dopo aver accertato l'idoneità allo studio e ottenuto il consenso.

Prima dell'esercizio e della raccolta dei campioni, il PI insegnerà a ogni soggetto come eseguire gli esercizi di canto e respirazione. Ogni soggetto testerà individualmente a causa della facilità di raccolta del campione e per evitare qualsiasi variabilità che potrebbe insorgere nella stimolazione neuronale in soggetti in presenza di individui diversi dai ricercatori.

Canto, esercizio di respirazione e raccolta di campioni I soggetti riceveranno un'introduzione al canto e all'esercizio di respirazione. Come praticante di esercizi di canto/yoga/respirazione, il PI fornirà questo addestramento, che non dovrebbe richiedere più di 5 minuti per essere appreso. Il piano per la raccolta di campioni di saliva interi è illustrato nella Figura 3. I campioni salivari verranno raccolti una volta all'inizio del protocollo (Tempo 0) mentre i soggetti sono seduti. La saliva sarà naturalmente lasciata accumulare nella cavità orale e il partecipante la scaricherà nel tubo del campione (capacità 5 ml) con coperchio.

Cantando Om (Do):

I sudditi canteranno quindi Om come segue:

1. Inalazione acuta e profonda attraverso le narici
2. Espirazione lenta attraverso la bocca mentre canti Om. A questo punto i soggetti eseguiranno una lenta e completa espirazione.

Questi due passaggi vengono ripetuti continuamente per 10 min con gli occhi chiusi.

Esercizio di respirazione (BE):

Dopo il canto, i soggetti eseguiranno l'esercizio di respirazione come segue, come indicato dal PI basato su Thirumanthiram:

1. Controlla quale delle due narici presenta libero flusso d'aria. A scopo esplicativo la narice con libero flusso d'aria è trattata come Nostril 1 e l'altra come Nostril 2.
2. Chiudi la narice 2 e inspira un respiro profondo e deciso attraverso la narice 1, quindi chiudi entrambe le narici in modo che l'aria inalata non fuoriesca. Anche l'aria non dovrebbe fuoriuscire dalla bocca. Questa fase di inalazione dovrebbe richiedere circa 4 secondi.
3. Trattenete il respiro in questa posizione per circa 16 secondi.
4. Apri Nostril 2 ed espira per circa 8 secondi. È necessaria un'espirazione completa. L'addome si incurverà lentamente mentre il soggetto espira. Questo è normale e incoraggiato. L'aria non deve fuoriuscire dalla narice 1 o dalla bocca.
5. Vai al passaggio a). Durante l'esercizio, se il cavo orale accumula saliva, il soggetto può deglutirla al termine della fase di espirazione (Fase d). I soggetti eseguiranno esercizi di respirazione per 10 min. I campioni salivari saranno raccolti a 5 e 10 minuti di esercizio di respirazione in provette etichettate BE-1, BE-2. Quindi ogni individuo fornirà i seguenti cinque campioni di saliva: + (Tempo 0), Canto di Om (C-1 e C2) ed Esercizio di respirazione (BE-1 e BE-2).

Gruppo di controllo Nel caso del gruppo di controllo, i soggetti staranno seduti in silenzio per la stessa durata del gruppo CB. I campioni di saliva saranno raccolti negli stessi punti temporali (a intervalli di 5 min per 20 min) del gruppo CB.

Il tempo totale approssimativo per l'intero protocollo sarà il seguente:

Introduzione e questionario - 10 minuti Istruzioni per salmodiare, esercizio di respirazione (gruppo CB) o sedersi in silenzio (gruppo di controllo) e raccolta di campioni salivari - 10 minuti (gruppo CB) o 5 minuti (gruppo di controllo) Raccolta di campioni basali - 1 minuto canto di Om - 10 minuti Esercizio di respirazione - 10 minuti Qualsiasi altra domanda del soggetto - 2-3 minuti Tempo totale dell'appuntamento per un soggetto = circa 45 minuti (gruppo CB) 40 minuti (gruppo di controllo) Per il tempo dei partecipanti allo studio ed eventuali disagi un compenso monetario saranno forniti.

Elaborazione dei campioni Posizionare i campioni di saliva raccolti su ghiaccio. Utilizzando tecniche sterili, trasferire la saliva in provette da centrifuga misurando la quantità di ciascun campione. Il numero di campioni raccolti da ciascun campione in ogni fase dell'esperimento potrebbe variare. Trattare separatamente i campioni delle singole provette senza riunire alcun campione. Calcola il volume totale di saliva durante la normale fase di riposo, durante il canto e durante l'esercizio di respirazione. Conservare i campioni a -80 gradi C fino all'analisi. I campioni saranno scartati dopo l'analisi dei dati.

Saggio immunologico legato all'enzima Quantificare i livelli di NGF in ciascun campione mediante saggio immunologico legato all'enzima utilizzando kit commerciali secondo le istruzioni del produttore (Promega). Tutti i reagenti necessari per condurre l'esperimento ELISA sono forniti nel kit. Eventuali reagenti aggiuntivi e il lettore ELISA sono disponibili per il PI presso la STB Room 511.

Gestione dei dati Tutti i dati dello studio raccolti dai partecipanti dal PI saranno inseriti in un database REDCap, sviluppato con l'assistenza del biostatistico del progetto. REDCap (Research Electronic Data Capture) è un set di strumenti software e una metodologia di flusso di lavoro per la raccolta elettronica e la gestione dei dati di ricerca e sperimentazione clinica disponibili per i ricercatori MUSC. Il processo iterativo di sviluppo e test si traduce in una strategia di raccolta dati ben pianificata per i singoli studi che facilita l'inserimento dei dati, i controlli di modifica e l'eventuale analisi statistica. Il database sottostante è ospitato presso il data center MUSC e il sistema è protetto da un accesso e dalla crittografia SSL (Secure Sockets Layer).

Analisi statistica L'analisi statistica sarà effettuata sotto la guida di un biostatistico, che ha collaborato con il PI nello sviluppo di questo studio. Inizialmente, verranno utilizzate statistiche descrittive per caratterizzare i partecipanti allo studio rispetto a dati demografici, eventuali caratteristiche cliniche rilevanti e misurazioni dell'NGF al basale e nel tempo. Le differenze di gruppo nei dati demografici e in altre variabili di base saranno esaminate tramite t-test, test del chi quadrato e test esatti di Fisher, a seconda dei casi. Questo studio ha lo scopo di ottenere prove preliminari dell'efficacia di questi esercizi (canti e/o respirazione rispetto al controllo a riposo) per stimolare l'NGF salivare; in quanto tale, non verrà condotto alcun test formale di ipotesi. Verranno invece utilizzati modelli misti lineari generali (GLMM) per ottenere stime (ei rispettivi intervalli di confidenza al 95%) delle differenze di gruppo nel tempo rispetto ai livelli di NGF. I GLMM sono ideali per le analisi che coinvolgono la variabilità tra e all'interno del soggetto e sono particolarmente utili per i disegni di studio a misure ripetute come quello utilizzato per questo studio proposto. Poiché si ritiene che l'età influisca sull'NGF, l'età sarà inclusa come covariata in tutti i modelli. Verranno presi in considerazione effetti del tempo lineari, quadratici e cubici. Verranno esaminati diversi tipi di strutture di covarianza dell'errore e verranno utilizzati i valori del criterio informativo di Akaike per selezionare il GLMM più appropriato. L'uso del GLMM ci consentirà di caratterizzare la traiettoria tipica delle misurazioni NGF nel tempo in entrambe le condizioni sperimentali e ci offrirà anche l'opportunità di confrontare il canto con gli esercizi di respirazione all'interno del gruppo CB. I risultati di questo tipo di modellazione statistica saranno preziosi per la pianificazione di studi futuri (finanziati esternamente), più ampi e definitivi.

Giustificazione della dimensione del campione Poiché non verrà condotto alcun test formale di ipotesi, il potere statistico non è rilevante per questa proposta; quindi la giustificazione della dimensione del campione si basa sulla precisione dei nostri processi di stima e sulle esperienze di apprendimento coinvolte con l'iscrizione, l'osservazione e la misurazione dei soggetti in questo studio, nonché la conduzione dei test di laboratorio nel modo più efficiente possibile. Avere n=10 soggetti in ciascun gruppo sperimentale (per un totale di n=20 soggetti) ci consentirà di effettuare stime preliminari delle misurazioni NGF nel tempo in ciascun gruppo. Con n = 10 soggetti per gruppo, gli intervalli di confidenza del 95% attorno alle stime medie del gruppo estenderanno ~ 0,6 deviazioni standard in entrambe le direzioni e gli intervalli di confidenza del 95% attorno alle stime della differenza media del gruppo estenderanno ~ 0,9 deviazioni standard in entrambe le direzioni. Con n=10 per gruppo, acquisiremo anche una maggiore comprensione della volontà dei soggetti di essere randomizzati in questo tipo di studio di medicina complementare e alternativa e delle migliori tecniche associate all'esecuzione dell'intervento di canti e esercizi di respirazione.

E. TUTELA DEI SOGGETTI UMANI

1. Rischi per i soggetti Parteciperanno a questo studio 20 soggetti, uomini e donne, di età pari o superiore a 18 anni. Questo protocollo consisterà in una singola visita, sessioni individuali per singolo partecipante. Questi esercizi non comportano rischi fisici, psicologici e sociali per i partecipanti. La violazione della riservatezza potrebbe essere un potenziale rischio poiché il questionario raccoglie informazioni sulla salute dei soggetti. I partecipanti possono sentirsi leggermente a disagio a sputare o sbavare in presenza di un altro individuo. C'è la possibilità per il partecipante di sentire di non conoscere gli esercizi in anticipo o di non essere pienamente in grado di seguire le istruzioni degli esercizi.

   Protezioni contro i rischi L'istruttore cercherà di assicurarsi che i soggetti si sentano a proprio agio ea proprio agio. Tutte le informazioni raccolte nello studio saranno trattate con riservatezza e archiviate in server protetti come sopra descritto. I lavori cartacei generati nel presente studio contengono potenziali informazioni personali. Questi documenti saranno custoditi in un armadietto chiuso a chiave appartenente al PI situato nella stanza 625 di STB al MUSC. I partecipanti saranno identificati da un numero di identificazione in tutti i documenti, i dati e nei campioni salivari. Il consenso informato è il collegamento tra il numero di identificazione del partecipante e il suo nome. I campioni salivari raccolti saranno protetti in un congelatore a -80 gradi con un lucchetto nella STB Room 213 e scartati immediatamente dopo l'analisi dei dati. Gli esercizi di respirazione e il canto sono forme di esercizio leggero e non comportano alcun rischio per la salute dei partecipanti. I partecipanti allo studio non saranno contattati per un altro studio.

2. Potenziali benefici per la salute dei soggetti La respirazione yogica in particolare e lo yoga in generale sono buoni esercizi per una vita sana. Diversi studi indicano che la respirazione yogica riduce lo stress e migliora la qualità della vita in più gruppi di pazienti e in individui altrimenti sani. Alla fine dello studio, i soggetti del gruppo Canto/Esercizio di respirazione potevano sentirsi fisicamente e psicologicamente meglio a causa degli effetti neurotrofici. Questi soggetti finiscono per apprendere nuove tecniche da un'altra cultura (esperienza interculturale) per regolare la respirazione che possono praticare quotidianamente a loro piacimento poiché la pratica continua potrebbe avvantaggiarli a lungo termine.