Activation d'un inflammasome cutané dans la peau des patients atteints d'hidrosadénite suppurée

L'objectif est d'étudier ex vivo la réponse inflammatoire dans l'hidrosadénite suppurée (activation d'un inflammasome, rôle de cytokines pro-inflammatoires) au niveau de la peau de patients traités chirurgicalement pour cette maladie.

Les chercheurs émettent l'hypothèse que les cytokines dérivées de Th17, en particulier l'IL-17, pourraient servir de relais dans le processus inflammatoire conduisant à la sévérité et aux récidives de l'HS. Pour réaliser cette proposition, les chercheurs viseront à démontrer et à caractériser la présence d'un inflammasome associé à Maladie HS - Hypothèse Il est largement admis que l'hyperkératinisation et l'occlusion folliculaire sont à l'origine d'une infection provoquant une inflammation cutanée. Les chercheurs ont émis l'hypothèse que les signaux de danger dérivés de l'hôte conduisaient à la libération de médiateurs inflammatoires tels que l'IL-1β en activant une structure inflammasome.

L'inflammasome est une plateforme moléculaire contrôlant l'expression et l'activation de l'IL-1β via différents capteurs. La cytokine pro-inflammatoire IL-1β pourrait par la suite conduire au recrutement et à l'orientation des lymphocytes vers un sous-type Th17 créant une boucle de rétroaction entretenant une inflammation tissulaire excessive dans l'HS.

Si un tel processus inflammatoire complexe est présent dans l'HS, le blocage à la fois de l'inflammation induite par les bactéries (IL-1β) et de l'inflammation associée à la stérilité (IL-17) améliorerait largement le bénéfice thérapeutique pour les patients atteints d'HS.

- Approche expérimentale

Les chercheurs chercheront à mettre en évidence la présence de capteurs et d'effecteurs de l'inflammasome dans les explants de peau de HS par rapport à la peau témoin. Pour cette étude physiopathologique originale, 10 peaux lésionnelles excisées de patients HS ou témoins (chirurgie plastique) après avoir signé le consentement éclairé requis par le comité d'éthique (CPP accepté le 23-01-2015) seront investiguées. La gravité de l'HS sera basée sur la stadification selon la stadification de Hurley. Des poinçons de peau de six mm seront récoltés à partir d'explants de contrôle et à la fois sur les sites in situ et péri-lésionnels d'explants de peau HS. Les échantillons de peau seront manipulés directement (jour 0) ou après une période de culture tissulaire de 4 jours avec ou sans traitements.

Toutes les expériences se dérouleront comme suit :

• Des échantillons de tissus cutanés ex vivo seront insérés dans un filtre Transwell® et cultivés sur une période de 4 jours avec ou sans antibiotiques (Rifampicine, Clindamycine).

• Au jour 0 et au jour 4 :

  • un ensemble d'échantillons de peau sera intégré pour analyser la présence de capteurs et d'effecteurs d'inflammasome par immunohistochimie (IHC)
  • Un autre ensemble sera homogénéisé pour la détermination des cytokines (ELISA) et la stimulation cellulaire (voir ci-dessous)
• Les échantillons homogénéisés seront traités ou non avec des anticorps anti-cytokines (Secukinumab vs isotype) pendant 4 heures avant addition à la lignée cellulaire de kératinocytes ou à la lignée cellulaire de monocytes/macrophages. L'influence de l'IL-17 et de l'infection bactérienne sur l'activation de l'inflammasome dans ces lignées cellulaires sera étudiée comme décrit ci-dessus et associée à la technique PCR.