Активация кожной инфламмасомы в коже пациентов с гнойным гидраденитом

Цель состоит в том, чтобы исследовать ex vivo воспалительную реакцию при гнойном гидрадените (активация инфламмасомы, роль провоспалительных цитокинов) в коже пациентов, оперированных по поводу этого заболевания.

Исследователи предполагают, что цитокины, происходящие из Th17, особенно IL-17, могут служить реле в воспалительном процессе, приводящем к тяжести и рецидивам СГ. Заболевание HS - Гипотеза Широко признано, что гиперкератинизация и закупорка фолликулов вызывают инфекцию, вызывающую воспаление кожи. Исследователи здесь предположили, что сигналы опасности, исходящие от хозяина, приводят к высвобождению медиаторов воспаления, таких как IL-1β, путем активации структуры воспаления.

Воспаление представляет собой молекулярную платформу, контролирующую экспрессию и активацию IL-1β с помощью различных сенсоров. Провоспалительный цитокин IL-1β может впоследствии привести к рекрутированию и ориентации лимфоцитов в сторону подтипа Th17, создавая петлю обратной связи, поддерживающую чрезмерное воспаление тканей при HS.

Если такой сложный воспалительный процесс присутствует при HS, блокирование как бактериального (IL-1β), так и стерильно-ассоциированного (IL-17) воспаления в значительной степени улучшит терапевтический эффект для пациентов с HS.

- Экспериментальный подход

Исследователи будут стремиться выявить наличие воспалительных сенсоров и эффекторов в эксплантатах кожи от HS по сравнению с контрольной кожей. Для этого первоначального физиопатологического исследования будут исследованы 10 пораженных участков кожи, иссеченных у пациентов с HS или у контрольной группы (пластическая хирургия) после того, как они подписали информированное согласие в соответствии с требованиями этического наблюдательного совета (CPP принято 23 января 2015 г.). Тяжесть заболевания HS будет основываться на стадии в соответствии со стадией Hurley. Кожные пробоины размером 6 мм будут взяты из контрольных эксплантатов, а также из участков эксплантатов кожи HS как in situ, так и вокруг очагов поражения. Образцы кожи будут обработаны либо сразу (день 0), либо после 4-дневного периода культивирования тканей с обработкой или без нее.

Все эксперименты будут проводиться следующим образом:

• Образцы ткани кожи ex vivo помещают в фильтр Transwell® и культивируют в течение 4 дней с антибиотиками или без них (рифампицин, клиндамицин).

• Как в день 0, так и в день 4:

  • один набор образцов кожи будет встроен для анализа наличия воспалительных сенсоров и эффекторов с помощью иммуногистохимии (ИГХ).
  • Другой набор будет гомогенизирован для определения цитокинов (ИФА) и стимуляции клеток (см. ниже).
• Гомогенизированные образцы будут обрабатываться или не обрабатываться антицитокиновыми антителами (секукинумаб в сравнении с изотипом) в течение 4 часов перед добавлением к клеточной линии кератиноцитов или клеточной линии моноцитов/макрофагов. Влияние IL-17 и бактериальной инфекции на активацию воспалительных заболеваний в этих клеточных линиях будет исследовано, как описано выше, и в сочетании с методом ПЦР.